وضعیت ایمنی، فاگوسیتوز (شاخص فاگوسیتوز، شاخص فاگوسیتوز، شاخص تکمیل فاگوسیتوز)، خون. فاگوسیتوز و تعیین فعالیت فاگوسیتی فعالیت فاگوسیتوز سلولها

دفاع سلولی غیر اختصاصی بدن توسط لکوسیت ها انجام می شود که قادر به فاگوسیتوز هستند. فاگوسیتوز فرآیند شناسایی، جذب و جذب مواد خارجی مختلف است...

میانگین قیمت در منطقه شما: 4195 از 880 ... تا 5300

شرح مطالعه

آمادگی برای مطالعه:خون نیازی به آماده سازی خاصی ندارد. مواد تست:خون گرفتن

دفاع سلولی غیر اختصاصی بدن توسط لکوسیت ها انجام می شود که قادر به فاگوسیتوز هستند. فاگوسیتوز فرآیند شناسایی، جذب و جذب ساختارهای خارجی مختلف (سلول های تخریب شده، باکتری ها، کمپلکس های آنتی ژن-آنتی بادی و غیره) است. سلول هایی که فاگوسیتوز را انجام می دهند (نوتروفیل ها، مونوسیت ها، ماکروفاژها) با اصطلاح کلی فاگوسیت نامیده می شوند. فاگوسیت ها به طور فعال حرکت می کنند و حاوی تعداد زیادیگرانول هایی با مواد فعال بیولوژیکی مختلف لکوسیت ها

روش

یک سوسپانسیون لکوسیت به روش خاصی از خون به دست می آید که با مقدار دقیق لکوسیت (1 میلیارد میکروب در 1 میلی لیتر) مخلوط می شود. پس از 30 و 120 دقیقه، اسمیر از این مخلوط تهیه می شود و طبق رومانوفسکی-گیمسا رنگ آمیزی می شود. حدود 200 سلول زیر میکروسکوپ بررسی شده و تعداد فاگوسیت هایی که باکتری ها را جذب کرده اند، شدت گرفتن و تخریب آنها مشخص می شود.

1. شاخص فاگوسیتیک درصد فاگوسیت هایی است که باکتری ها را پس از 30 و 120 دقیقه به تعداد کل سلول های مورد بررسی جذب کردند.

2. شاخص فاگوسیتیک - میانگین تعداد باکتری های موجود در فاگوسیت پس از 30 و 120 دقیقه (از نظر ریاضی تعداد کل باکتری های جذب شده توسط فاگوسیت ها را بر شاخص فاگوسیتی تقسیم کنید)

3. شاخص تکمیل فاگوسیتوز - با تقسیم تعداد باکتری های کشته شده در فاگوسیت ها بر تعداد کل باکتری های جذب شده و ضرب در 100 محاسبه می شود.

مقادیر مرجع - هنجار
(وضعیت ایمنی، فاگوسیتوز (شاخص فاگوسیتوز، شاخص فاگوسیتوز، شاخص تکمیل فاگوسیتوز)، خون)

اطلاعات مربوط به مقادیر مرجع شاخص ها و همچنین ترکیب شاخص های موجود در تجزیه و تحلیل ممکن است بسته به آزمایشگاه کمی متفاوت باشد!

هنجار:

شاخص های طبیعی فعالیت فاگوسیتی:

1. شاخص فاگوسیتیک: بعد از 30 دقیقه - 1.5±94.2، بعد از 120 دقیقه - 2.5±92.0

2. نشانگر فاگوسیتیک: بعد از 30 دقیقه - 1.0±11.3، پس از 120 دقیقه - 1.0±9.8

نشانه ها

1. عفونت های شدید و طولانی مدت

2. تظاهرات هر گونه نقص ایمنی

3. بیماری های جسمی - سیروز کبدی، گلومرولونفریت - با تظاهرات نقص ایمنی

افزایش مقادیر (نتیجه مثبت)

1. در مورد فرآیندهای التهابی باکتریایی (هنجار)

2. افزایش محتوای لکوسیت ها در خون (لکوسیتوز)

3. واکنش های آلرژیک، بیماری های خودآلرژیک

مقادیر پایین تر (نتیجه منفی)

کاهش شاخص های فعالیت فاگوسیتوز نشان دهنده اختلالات مختلف در سیستم ایمنی سلولی غیر اختصاصی است. این ممکن است به دلیل کاهش تولید فاگوسیت ها، پوسیدگی سریع آنها، اختلال در تحرک، اختلال در روند جذب مواد خارجی، اختلال در فرآیندهای تخریب آن و غیره باشد. همه اینها نشان دهنده کاهش مقاومت بدن در برابر عفونت است.

بیشتر اوقات، فعالیت فاگوسیتیک زمانی کاهش می یابد که:

1. در پس زمینه عفونت های شدید، مسمومیت ها، پرتوهای یونیزان (نقص ایمنی ثانویه)

2. بیماری های خود ایمنی سیستمیک بافت همبند (لوپوس اریتماتوی سیستمیک، آرتریت روماتوئید)

3. نقص ایمنی اولیه (سندرم چدیاک هیگاشی، بیماری گرانولوماتوز مزمن)

4. هپاتیت فعال مزمن، سیروز کبدی

5. برخی از اشکال گلومرولونفریت

کجا باید آزمایش داد

8 آزمایشگاه این تجزیه و تحلیل را در منطقه شما انجام می دهند.

برای پیدا کردن نزدیکترین آزمایشگاه و مقایسه قیمت ها برای تجزیه و تحلیل - وضعیت ایمنی (فاگوسیتوز): شاخص فاگوسیتوز، شاخص فاگوسیتوز، (TUBE WITH EDTA) شاخص تکمیل فاگوسیتوز (TUBE WITH EDTA) - روی دکمه کلیک کنید. به لطف فناوری های پزشکی کنونی و قدرت تفکر بشری، تشخیص بیماری ها به موفقیت چشمگیری دست یافته است. به عنوان مثال، می توان وضعیت سیستم ایمنی فرد را با اندازه گیری تعداد لکوسیت ها در خون تعیین کرد. همانطور که مشخص است، لکوسیت ها، همچنین به نام "خون سفید" از لاتین leiko - سفید، kytos - سلول، محافظت می کنند.بدن انسان از مهاجمان مخرب آنهاعملکرد اصلی - ایجاد نوعی خط دفاعی در برابر ویروس ها و باکتری های بیماری زا،مواد سمی

هرکس وظیفه خودش را دارد. برخی از آنها در جستجوی عناصر خارجی در بدن فعال هستند. برای دیگران، وظیفه تعیین این عنصر به عنوان "دوست یا دشمن" است. سومین نوع از سلول های سفید پیکربندی شده است تا اطلاعات مربوط به کار لکوسیت ها را به سلول های جوان منتقل کند و به اصطلاح "حافظه دفاعی" ایجاد کند. و آخرین وتر در محافظت از سیستم ایمنی توسط سلول هایی نواخته می شود که بدن های مضر را جذب می کنند. ماکروفاژها به طور کامل مهاجم را جذب کرده و آن را حل می کنند.

روشی برای مطالعه فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها

نوتروفیل‌های موجود در خون، اگرچه گلبول‌های سفید نامیده می‌شوند، اما در زیر میکروسکوپ به رنگ صورتی مایل به ارغوانی هستند. سلول های برنامه ریزی شده دفاع طبیعی بدن را با استفاده از گرانول های متعدد حاوی عناصر فعال بیولوژیکی انجام می دهند.

انواع لکوسیت ها

در اصطلاح پزشکی، پنج نام برای "سلول های سفید" لکوسیت ها وجود دارد (درصد طبیعی آنها آورده شده است):

• نوتروفیل ها - باکتری های بیماری زا موجود در جریان خون را از بین می برند - 55٪.
• لنفوسیت ها - مسئول حافظه سیستم ایمنی - 35٪؛
• مونوسیت ها - عناصر عوامل خارجی را جذب می کنند - 5٪.
• ائوزینوفیل ها - مبارزه با پاتوژن های آلرژی - 2.5-3٪؛
• بازوفیل ها - در جستجوی عناصر خارجی به سایر لکوسیت ها، از 0.5-1٪ کمک می کنند.

لکوسیت ها قادر به فاگوسیتوز هستند. ماکروفاژها بسته به وضعیت خون و تنش عصبی فاگوسیتوز می کنند. به عنوان یک قاعده، زمانی که مرحله اولیهبیماری ها، تعداد نوتروفیل ها در خون انسان افزایش می یابد، آنها با عوامل بیماری زا خارجی مبارزه می کنند و مقابله می کنند. درمان نادرست با آنتی بیوتیک ها منجر به افزایش مزمن آنها می شود.

تجزیه و تحلیل و محاسبه

تحلیل نیاز دارد آماده سازی اولیه: روزه گرفتن چند ساعته، هوشیاری مطلق (نوشیدن مشروبات الکلی و استعمال دخانیات ممنوع است).

تعیین فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها در چند مرحله انجام می شود:

• توده ای از 1-2 میلیارد جسم میکروبی را در 1 میلی لیتر مایع بگیرید.
• محلول 2% سیترات سدیم، خون و توده میکروبی را به نسبت 1:2:1 مخلوط کنید. مخلوط را به مدت 30 دقیقه در ترموستات با دمای 40.5 درجه سانتیگراد قرار دهید.
• سپس مخلوط را با سرعت 1500 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کرده و لایه ها را با پیپت روی یک ظرف پتری یا شیشه آزمایش قرار می دهیم.
• لایه ها را با متیل الکل به مدت 3-5 دقیقه ثابت کنید.
• سپس طبق رومانوفسکی گیمسا به مدت 10 دقیقه رنگ آمیزی می شوند.
• نتیجه واکنش را محاسبه کنید. با در نظر گرفتن تعداد میکروب های سلول و اشباع رنگ آنها (هضم) 100 سلول فاگوسیت را در زیر میکروسکوپ شمارش می کنند، چه میکروب ها را جذب کرده باشند یا نه.
• در اسمیر پس از نیم ساعت و دو ساعت، تعداد فاگوسیت‌هایی که میکروب‌ها را جذب می‌کنند، نسبت به تعداد کل سلول‌های مورد بررسی - شاخص فاگوسیتی (PI30 و FI120) محاسبه می‌شود.

تعداد کل میکروب های جذب شده بر تعداد سلول های شرکت کننده در فاگوسیتوز تقسیم می شود و عدد فاگوسیتی (PF) به دست می آید. این شکل نشان می دهد که به طور متوسط ​​چند میکروب در داخل یک فاگوسیت وجود دارد. همچنین این شاخص پس از نیم ساعت (FC30) و دو ساعت (FC120) ارزیابی می شود.

شاخص باکتری کش فاگوسیت ها با تقسیم تعداد میکروب های تخریب شده بر تعداد جذب شده و ضرب عدد حاصل در صد بدست می آید.

به منظور ارزیابی کیفیت کار فاگوسیت، مفهوم شاخص تکمیل فاگوسیتوز معرفی شد. این نشان دهنده میانگین تعداد میکروب های خورده شده پس از نیم ساعت تقسیم بر میانگین تعداد میکروب های بلعیده شده پس از 2 ساعت و نسبت شاخص های فاگوسیتی است.

IPF فرد سالمباید باشد برابر با یک. این تجزیه و تحلیل و تفسیر آن، که نیاز به دانش خاصی دارد، تصویر کاملی از وضعیت ایمنی بدن را منعکس می کند.

لکوسیتوز

در طول تحقیقات، فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها در موش ها با تغییر شرایط عادی زندگی افزایش یافت. این پدیده گاهی در افراد نیز رخ می دهد. لکوسیتوز دارد دلیل فیزیولوژیکیو در هر فردی قابل مشاهده است. به عنوان مثال، افزایش فعالیت گلبول های سفید تحت عوامل بی اهمیت روزمره خود را نشان می دهد: استرس، تغییر آب و هوا، فعالیت بدنی غیر معمول.

زنان در دوران بارداری و قاعدگی جهش در تعداد گلبول های سفید را تجربه می کنند. باید در نظر داشت که در چنین مواردی افزایش لکوسیت ها ناچیز است و به نسبت یکسان برای همه گروه های سلولی رخ می دهد. دلیلی برای نگرانی وجود ندارد. با این حال، شرایطی وجود دارد که تعداد لکوسیت ها 2-3 برابر بیشتر از حد طبیعی افزایش می یابد. این نوع رشد سلولی به معنای واکنش دفاعی است و پاتولوژیک تلقی می شود.

سلول ها گروه های مختلفرشد نامتناسب به دلیل بیماری یا فرآیند التهابی. لکوسیتوز نوتروفیلیک زمانی است که تعداد سلول های یک گروه به طور قابل توجهی غالب باشد. چنین افزایشی در طول عفونت مشاهده می شود منشا باکتریایی، التهاب حاد، مسمومیت، از دست دادن خون گسترده، حملات قلبی و استرس یا شوک.

تضعیف خواص دفاعی سیستم ایمنی

در موش هایی که آزمایش هایی برای مطالعه ماکروفاژهای خون روی آنها انجام شد، تعداد نوتروفیل ها با افزایش سن به طور قابل توجهی کاهش می یابد. اختلال در فعالیت فاگوسیتیک نوتروفیل ها به کاهش آن کمک می کند خواص طبیعیبدن با بیماری ها مبارزه می کند و مواد زائد و سموم را دفع می کند. تقریباً همان روش کاهش تعداد سلول های محافظ در بدن انسان وجود دارد.

نقص ایمنی طبیعی و فیزیولوژیکی ممکن است با پیری همراه باشد. ایمنی همچنین باعث کاهش فعالیت در هنگام قرار گرفتن در معرض اشعه می شود. گزارش Braude نشان می‌دهد که وقتی موش‌ها یک بار تحت تابش قرار می‌گیرند، ظرفیت حل شدن ماکروفاژها به طور ناگهانی کاهش می‌یابد. نتیجه این است که بدن انسان، تحت تابش اشعه گاما یا آلفا، ایمنی خود را ضعیف می کند.

واقعیت جالب: وقتی موش ها احساس اضطراب و خطر را تجربه می کنند، تعداد گلبول های سفید خون و تحرک آنها به طور غیرقابل کنترلی در خون افزایش می یابد. به روشی مشابه، بدن حیوان برای نیاز فرضی برای دفاع از خود آماده می شود - برای جلوگیری از اثرات نیش ها، ضد عفونی کردن زخم ها. این الگوریتم برای انسان نیز مشخص است. در حالت استرس عاطفی، محتوای گلبول های سفید در خون افزایش می یابد و یک سد دفاعی تشکیل می دهد.

در واقعیت های امروزی، آزمایش خون برای دفاع ایمنی بدن به طور گسترده ای مورد استفاده قرار می گیرد.

بیشتر:

انواع لکوسیت های خون، اهمیت آنها برای انسان چیست؟

اصل روش.برخی از گلبول های سفید (گرانولوسیت ها و به میزان کمترمونوسیت ها) در شرایط in vitro و in vivo قادر به جذب و اغلب از بین بردن ذرات خارجی با کمک آنزیم های خود هستند. علاوه بر این، خود این فرآیند چندین مرحله را طی می کند که شامل کموتاکسی، فاگوسیتوز، تخریب میکروب ها و هضم مواد جذب شده است. با تماس مکرر یا ایمن سازی خاص، سلول ها اپسونیزه می شوند، یعنی این توانایی افزایش می یابد. تعداد زیادی روش برای تعیین فعالیت فاگوسیتیک سلول های خونی ایجاد شده است. برای این منظور، از یک سیستم آزمایشی خاص (نوع خاصی از میکروب، zymosan) استفاده می شود. در برخی موارد، واکنش در لوله های آزمایش یا ظروف پتری روی آگار، و در برخی دیگر - در داخل بدن حیوان (داخل عروقی، داخل صفاقی یا روش "پنجره شاخ") انجام می شود.
پیشرفت عزم.
1. تهیه سیستم آزمایش: سوسپانسیون میکروبی حاوی 1-2 میلیارد اجسام در 1 میلی لیتر طبق استاندارد نوری.
2. مخلوط کردن محلول 2% سیترات سدیم، خون و سوسپانسیون میکروبی به نسبت 1:2:1 و ترموستات به مدت 30 دقیقه در دمای 40.5 درجه سانتیگراد.
3. سانتریفیوژ در 1500 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه و تهیه اسمیر بر روی لام های شیشه ای از لایه بالایی رسوب و روی آگار در ظروف پتری.
4. تثبیت آماده سازی با متیل الکل به مدت 3-5 دقیقه و رنگ آمیزی طبق Romanovsky - Giemsa به مدت 10-15 دقیقه.
5. حسابداری برای واکنش. در اسمیرهای رنگ‌آمیزی، با در نظر گرفتن تعداد میکروب‌ها در سلول و درجه رنگ‌آمیزی (هضم) آن‌ها، 100 نوتروفیل یا مونوسیت، اعم از حاوی میکروب یا بدون آن، در زیر میکروسکوپ (بزرگ‌نمایی 90x7) شمارش می‌شود. درصد سلول های فاگوسیتوز شده محاسبه می شود - نشانگر فعالیت و میانگین تعداد میکروب ها در هر فاگوسیت - شاخص فاگوسیتوز. نسبت تعداد میکروب های هضم شده به تعداد کل سلول های فاگوسیتوز شده درصد هضم و تعداد متوسط ​​آنها در هر فاگوسیت شاخص هضم را نشان می دهد.
برای تعیین کمیت توانایی گوارشی فاگوسیت ها، مفهوم شاخص تکمیل فاگوسیتوز معرفی شد. برای این کار، نسبت درصد فاگوسیتوز به دست آمده پس از 30 دقیقه انکوباسیون به درصد فاگوسیتوز پس از 2 ساعت و نسبت شاخص های فاگوسیتوز را تعیین کنید. به طور کلی پذیرفته شده است که اگر شاخص تکمیل فاگوسیتوز بیشتر از 1 باشد، فاگوسیتوز کامل است، اگر کمتر باشد، ناقص است. برای ارزیابی میزان افزایش فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها در طول ایمن سازی خاص، شاخص اپسونوفاگوسیتیک در رابطه با تعداد فاگوسیتی در حیوانات ایمن شده و کنترل محاسبه می شود. در حیوانات تازه متولد شده، توصیه می شود توانایی حذف لکوسیت های خون را بر اساس تعداد مطلق میکروب های فاگوسیتوز شده توسط همه فاگوسیت های موجود در 1 میکرولیتر خون محاسبه کنید، یعنی شاخص های مطلق را بدست آورید.

مطالعه فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها یک آزمایش خون است که با هدف تعیین توانایی های ذخیره نوتروفیل ها و مونوسیت ها برای انجام عملکرد اصلی آنها - جذب و پردازش عوامل خارجی انجام می شود. این آزمایش به عنوان بخشی از مجموعه ایمونوگرام انجام می شود. برای بیماران با عود و عفونت های مزمن، شرایط نقص ایمنی اکتسابی و ژنتیکی، بیماری های خود ایمنی و انکولوژیک که تحت عمل های پیچیده ای از جمله پیوند اعضا قرار گرفته اند. خون کامل آنالیز می شود. این مطالعه بر اساس ارزیابی فاگوسیتوز باکتری های دارای برچسب فلورسنت است. به طور معمول، گرانولوسیت های فاگوسیتی از 82 تا 90 درصد کل، مونوسیت های فاگوسیتی - از 75 تا 85 درصد را تشکیل می دهند. آمادگی نتایج - تا 8 روز.

فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها یک شاخص آزمایشگاهی است که نشان دهنده درصد نوتروفیل ها و مونوسیت ها است که قادر به اتصال به میکرو فلور بیماری زا و هضم آن هستند. فاگوسیت ها سلول هایی هستند که از بدن در برابر ایجاد عفونت محافظت می کنند. آنها جزء ایمنی ذاتی در خون در نظر گرفته می شوند که توسط دو نوع لکوسیت - مونوسیت ها و نوتروفیل ها نشان داده می شوند. مونوسیت ها سلول های بزرگی هستند - ماکروفاژها. آنها توانایی قابل توجهی در جذب، پردازش سلول های بزرگ و ترکیبات آلی دارند. در محل التهاب، باکتری ها، توده لکوسیت ها و سلول های آسیب دیده را فاگوسیتوز می کنند. در نتیجه بافت ها تمیز می شوند و برای بازسازی آماده می شوند. نوتروفیل ها بر خلاف مونوسیت ها میکروفاژها هستند، آنها فقط سلول های کوچک و اجزای آلی را جذب می کنند. پس از پردازش عوامل، نوتروفیل ها می میرند، موادی آزاد می کنند که به باکتری ها و قارچ ها آسیب می رساند و جریان سلول های ایمنی را به محل التهاب افزایش می دهد.

آزمایش خون برای فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها به شما امکان می دهد ذخیره مونوسیت ها و نوتروفیل ها را برای هضم عوامل خارجی ارزیابی کنید. تغییرات در ویژگی های فاگوسیت ها نه تنها منعکس کننده واکنش ایمنی بدن است، بلکه ویژگی های برخی از فرآیندهای دیگر - متابولیسم پروتئین و کربوهیدرات، وجود مسمومیت و خستگی بدن، فعالیت بهبودی پس از بیماری ها و غیره را نیز منعکس می کند. ، تجزیه و تحلیل نه تنها در ایمونولوژی و بیماری های عفونی، بلکه در روماتولوژی، انکولوژی، جراحی استفاده می شود. نتایج مطالعه به عنوان درصد فاگوسیت های فعال به تعداد کل آنها نمایش داده می شود. نوتروفیل ها و مونوسیت های فعال با استفاده از باکتری هایی با برچسب های فلورسنت شناسایی می شوند. بیومتریال برای مطالعه خون کامل با هپارین است.

نشانه ها

در صورت مشکوک بودن به نقص ایمنی مادرزادی یا اکتسابی، مطالعه فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها نشان داده می شود. برای طولانی مدت، مزمن و عود کننده تجویز می شود بیماری های عفونی- نشانه مشخصه کاهش ایمنی است. اغلب بیماران مبتلا به پنومونی، سینوزیت، اوتیت، انتروکولیت، کاندیدیازیس و سیستیت برای تجزیه و تحلیل فرستاده می شوند. همچنین، زخم‌ها و عوارض طولانی‌مدت غیرقابل التیام پس از عمل ممکن است نشان‌دهنده فقدان دفاع ایمنی باشد. بنابراین، تجزیه و تحلیل در آماده سازی برای جراحی و در موارد پیچیده انجام می شود. دوره بعد از عمل، در طول نقاهت طولانی مدت پس از صدمات و سوختگی. برای نشانه های دیگر برای این مطالعهشامل آلرژیک، خود ایمنی و بیماری های انکولوژیک. نتایج به ما اجازه می دهد تا فعالیت دفاع ایمنی (فاگوسیتوز) و نقش آن در توسعه بیماری را ارزیابی کنیم.

آزمایش خون برای فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها امکان تعیین آمادگی واقعی بدن برای مقاومت در برابر عفونت ها را فراهم می کند. با این حال، شایان ذکر است که این شاخص تحت تأثیر بسیاری از عوامل تغییر می کند. بنابراین، فعالیت مونوسیت ها و نوتروفیل ها پس از آن کاهش می یابد فعالیت بدنیو با خستگی روحی و بعد از خوردن غذای پرکالری افزایش می یابد. یکی دیگر از محدودیت های تحلیل این است که روند تحقیق تا 8 روز کاری طول می کشد، نتایج به دست آمده نشان دهنده وضعیت هفته قبل است.

آماده سازی برای تجزیه و تحلیل و جمع آوری مطالب

برای مطالعه فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها، خون از ورید گرفته می شود. یک روز قبل از آزمایش، باید الکل را از رژیم غذایی خود حذف کنید، تمرینات ورزشی و سایر فعالیت های بدنی شدید را لغو کنید و از موقعیت های استرس زا دوری کنید. همچنین لازم است با پزشک خود در مورد تأثیر داروهایی که مصرف می کنید بر روی نتیجه آزمایش مشورت کنید. روش نمونه گیری خون معمولاً در صبح، پس از یک دوره ناشتا بودن یک شبه یا 4 ساعت پس از غذا انجام می شود.

خون از ورید اولنار با استفاده از سوراخ برای مطالعه فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها گرفته می شود، از روش ارزیابی فاگوسیتوز باکتری ها با برچسب فلورسنت استفاده می شود. مونوسیت ها و نوتروفیل ها، مواد مورد آزمایش، با سانتریفیوژ و شستشو از خون جدا می شوند. سپس یک کشت از باکتری های شب تاب به نمونه وارد می شود، مخلوط مجدداً معلق و انکوبه می شود و تعداد لکوسیت هایی که باکتری را فاگوسیتوز کرده اند با شدت لومینسانس تعیین می شود. نتایج تجزیه و تحلیل ظرف 7-8 روز کاری آماده می شود. فعالیت فاگوسیتی مونوسیت ها و نوتروفیل ها را می توان با روش های دیگری تعیین کرد، به عنوان مثال، با رنگ آمیزی سلول های فاگوسیتوز شده (روش رومانوفسکی-گیمسا)، با فعالیت آنزیم های لیزوزومی، تولید سیتوکین ها و وجود پروتئین های کاتیونی.

مقادیر نرمال

نتیجه آزمایش خون برای فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها به صورت درصدی از سلول های فاگوسیتی از تعداد کل آنها بیان می شود. مقادیر طبیعی گرانولوسیت ها از 82 تا 90 درصد، برای مونوسیت ها از 75 تا 85 درصد است. این نرخ ها برای بیماران در تمام سنین و هر دو جنس یکسان است. کاهش فیزیولوژیکی فاگوسیتوز را می توان در دوران بارداری، پس از فعالیت بدنی که با سطح تمرین مطابقت ندارد و بعد از آن تشخیص داد. استرس عاطفی.

افزایش و کاهش شاخص

افزایش فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها هیچ اهمیت تشخیصی ندارد عفونت های حاد. فعالیت مونوسیت ها و نوتروفیل ها نسبت به سطح اولیه افزایش می یابد.

تجزیه و تحلیل فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها یک روش تحقیق ایمونولوژیک است. شاخص های آن تعیین توانایی ذخیره سلول های خونی برای جذب و هضم عوامل عفونی، یعنی آمادگی بدن برای مقاومت در برابر توسعه بیماری را امکان پذیر می کند. اگر نتایج آزمایش کمتر از حد نرمال باشد، باید با پزشک خود - ایمونولوژیست، متخصص بیماری های عفونی، جراح، روماتولوژیست یا انکولوژیست مشورت کنید. کاهش فیزیولوژیکی عملکرد را می توان با انتخاب مناسب فعالیت بدنی و پیشگیری از استرس اصلاح کرد.

www.krasotaimedicina.ru

ایمونولوژیست-آلرژیست ولادیمیر آناتولیویچ بولیبوک

آنتی بادی ها یا ایمونوگلوبولین ها. ایمونوگلوبولین ها مولکول های پروتئینی نسبتاً بزرگ و پیچیده ای هستند که توسط سلول های سیستم ایمنی - سلول های پلاسما - سنتز می شوند. به نوبه خود، سلول های پلاسما از لنفوسیت های B منشاء می گیرند. ایمونوگلوبولین ها دارای خاصیت اتصال به مولکول های خارجی (پروتئین ها، لیپوپروتئین ها) هستند که هم در حالت محلول و هم روی سطح ویروس ها، باکتری ها و غیره یافت می شوند. اگر این سلول ها آلوده به ویروس یا جهش یافته باشند، می توان مولکول های خارجی را نیز بر روی غشای سلول های خود یافت. آنتی بادی ها به خودی خود نمی توانند ویروس، باکتری یا سلول را از بین ببرند یا سمی را که باکتری ترشح می کنند از بین ببرند. اما آنها می توانند اولاً آنها را خنثی کنند، عملکرد را مختل کنند یا سمیت را از بین ببرند. ثانیاً، آنها سیستم ایمنی را به سمت یک «غریبه» که باید از بین برود، "نشان می دهند". پس از واکنش آنتی بادی ها با مولکول های خارجی روی سطح ویروس ها، باکتری ها و سایر اشیاء، پروتئین های سیستم کمپلمان، لنفوسیت های T سیتوتوکسیک یا سلول های فاگوسیت (نوتروفیل ها و مونوسیت-ماکروفاژها) وارد نبرد با آنها می شوند. در عین حال، اتصال آنتی بادی ها بسیار انتخابی است - یک نوع آنتی بادی فقط با مولکول خارجی که در برابر آن تولید می شود واکنش نشان می دهد. این خاصیت ویژگی آنتی بادی نامیده می شود. به عنوان مثال، آنتی بادی های ضد ویروس سرخک با ویروس واکنش نشان نمی دهند آبله مرغان، و بالعکس.

توسط ساختار شیمیاییایمونوگلوبولین ها به 5 دسته تقسیم می شوند:

ایمونوگلوبولین‌های کلاس G. این کلاس اصلی آنتی‌بادی‌های محافظ است که بیش از 80 درصد از کل آنتی‌بادی‌هایی را تشکیل می‌دهد که در خون و در طول گردش می‌کنند. محیط داخلیبدن ایمونوگلوبولین های کلاس G تقریباً 7 تا 10 روز پس از اولین تماس با یک عفونت ناآشنا تولید می شوند و سطح آنها به حداکثر در حدود 30-40 روز افزایش می یابد. ایمونوگلوبولین های کلاس G برای مدت طولانی در خون باقی می مانند، گاهی اوقات سنتز آنها برای سال ها و دهه ها ادامه می یابد و آنها هستند که ایمنی اکتسابی را در برابر بیشتر عفونت ها، چه پس از بیماری و چه پس از واکسیناسیون، ایجاد می کنند. ایمونوگلوبولین های G می توانند از جفت به جنین در حال رشد عبور کرده و قبل از تولد در خون نوزاد تجمع کنند. این معنای عمیقی دارد، زیرا ... کودکی که دارای آنتی بادی های مادری است نیز در برابر عفونت هایی که مادر در محیط معمول خود با آنها تماس پیدا می کند، مصونیت پیدا می کند.

ایمونوگلوبولین های کلاس M. اینها بزرگترین آنتی بادی ها هستند و ابتدا در تماس با یک عفونت ناآشنا تولید می شوند. ایمونوگلوبولین های کلاس M در اولین روز از شروع عفونت ظاهر می شوند، سطح قابل توجهی در روز 3 - 4 ایجاد می شود، حداکثر در روز 7 - 10، و سپس، پس از اینکه عفونت در بدن از بین رفت، به سرعت ناپدید می شوند - بعد از حدود 4-6 هفته ایمونوگلوبولین های کلاس M از جفت عبور نمی کنند.

ایمونوگلوبولین های کلاس A. اینها به اصطلاح آنتی بادی های ترشحی هستند. آنها با مخاط از طریق غشاهای مخاطی ترشح می شوند دستگاه تنفسی، در طول مسیر دستگاه گوارش، با مایع اشک بر روی ملتحمه، با عرق و سبوم روی پوست. هدف اصلی ایمونوگلوبولین های کلاس A تخریب و مسدود کردن عفونت قبل از تماس با بافت های پوششی بدن و جلوگیری از ورود عفونت به بدن است. ایمونوگلوبولین های کلاس A از جفت عبور نمی کنند. ایمونوگلوبولین های کلاس A در مقادیر قابل توجهی از طریق غدد پستانی ترشح می شوند شیر مادر(به خصوص غلظت بالای IgA در آغوز)، و از غشاهای مخاطی نوزاد و محافظت می کند. نوزاداز عفونت

ایمونوگلوبولین های کلاس D. غلظت این آنتی بادی ها در خون نیز بسیار کم است - کمتر از 1%. ایمونوگلوبولین‌های کلاس D، بر خلاف سایر کلاس‌های ایمونوگلوبولین‌ها، توسط سلول‌های پلاسما، بلکه توسط خود لنفوسیت‌ها سنتز می‌شوند و گیرنده‌های لایه‌برداری شده از سطح غشای خارجی لنفوسیت‌ها هستند. اهمیت بالینی این ایمونوگلوبولین ها هنوز مشخص نشده است، بنابراین سطح آنها معمولا بررسی نمی شود.

پروتئین های سیستم کمپلمان

آنتی بادی ها یا ایمونوگلوبولین ها، همانطور که در بالا ذکر شد، قادر به اتصال به ویروس ها و باکتری ها هستند، اما قادر به کشتن آنها نیستند. پروتئین های سیستم کمپلمان توانایی کشتن باکتری ها، قارچ ها و سایر سلول ها را دارند. سیستم مکمل دارای 9 پروتئین اصلی و 2 پروتئین اضافی است که همه آنها در خون هستند و بلافاصله پس از آنتی بادی ها آماده حمله به "غریبه ها" هستند. این پروتئین ها متعلق به پروتئین های آنزیمی، یعنی پروتئازها هستند. پروتئین‌های سیستم کمپلمان قادرند در تعامل با یکدیگر، در نوعی "لوله" یا "سوزن" جمع شوند که پوسته ویروس، میکروب یا سلول عفونی یا خارجی خود را دقیقاً در محلی که آنتی‌بادی‌ها واکنش نشان می‌دهند سوراخ می‌کند. . این "سوزن" "مجموعه حمله غشایی" نامیده می شود. در نتیجه یک سوراخ در غشای سلولی ایجاد می شود. با در نظر گرفتن این واقعیت که بیش از 10000 مولکول آنتی بادی می توانند به طور همزمان با یک میکروب واکنش دهند، همان تعداد "سوراخ" از پروتئین ها به طور همزمان در آن ایجاد می شود. در زیر میکروسکوپ الکترونی، سطح سلولی که توسط آنتی بادی‌ها و مکمل‌ها مورد حمله قرار می‌گیرد، شبیه یک منظره ماه است که با دهانه‌های شهاب‌سنگ پوشیده شده است. از آنجایی که غلظت نمک در داخل سلول میکروبی بیشتر از خارج است، آب از طریق منافذ غشاء به داخل سلول میکروبی می رود و میکروب به معنای واقعی کلمه می ترکد و با آب متورم می شود. میکروب لیز می شود و بقایای آن توسط فاگوسیت ها خورده می شود.

مکمل یک سلاح است" واکنش سریع" پروتئین های سیستم کمپلمان بلافاصله به محض اینکه آنتی بادی ها خارجی را شناسایی کردند، واکنش نشان می دهند. این برای محافظت در برابر عفونت در زخم ها مهم است - اگر فعالیت مکمل در بدن زیاد باشد، عفونت وارد شده به زخم تقریباً فوراً از بین می رود و زخم (که از عفونت بیشتر توسط یک دلمه خون منعقد شده محافظت می شود) نخواهد بود. چرک.

لیزوزیم

بدن آنزیم‌های خاصی تولید می‌کند که می‌توانند غشای باکتری را حل کنند، لیزوزیم (مورامیل پپتیداز) که بیشتر مورد مطالعه قرار گرفته است. هنگامی که پوسته توسط لیزوزیم حل می شود، میکروب خاصیت بیماری زایی خود را از دست می دهد، نمی تواند بدن را بیشتر آلوده کند و هدف آسان تری برای آنتی بادی ها و مکمل و "غذای" آسان تر برای فاگوسیت ها می شود.

اینترفرون ها

این یک گروه ویژه از پروتئین ها است که هم توسط سلول های سیستم ایمنی (لکوسیت ها) و هم سلول های دیگر بدن، اغلب اپیتلیال، در صورت آلوده شدن به ویروس تولید می شوند. اینترفرون ها از سایر سلول های بدن در برابر عفونت توسط ویروس محافظت می کنند. در غیر این صورت هر عفونت ویروسیمنجر به این واقعیت می شود که تمام سلول های بدن آلوده می شوند.

پروتئین واکنشی C

این پروتئین به مقدار بسیار کم در خون وجود دارد، اما با ظاهر شدن کانون التهاب باکتریایی، مقدار آن ده ها و صدها بار افزایش می یابد. به همین دلیل است پروتئین واکنشی C(بخوانید C) به پروتئین ها اشاره دارد " فاز حاد" SRB قادر به چسباندن و "چسباندن" پوسته های باکتری ها است: در طول فرآیند تولید مثل، میکروب ها به هم چسبیده می مانند و مجموعه بزرگی از سلول های میکروبی را تشکیل می دهند. اولاً از انتشار میکروب ها از طریق خون و لنف در سراسر بدن جلوگیری می کند. ثانیاً ، در داخل چنین "کلونی" میکروب ها به اندازه کافی دریافت نمی کنند مواد مغذیو رشد و تولیدمثل آنها کند می شود یا به طور کلی متوقف می شود. ثالثاً، فاگوسیت‌ها به پروتئین واکنش‌گر C که به پوسته میکروب‌ها می‌چسبد واکنش نشان می‌دهند. افزایش فعالیتو با حرص و طمع بیشتری شروع به مصرف این میکروب ها می کنند.

doktor-bolibok.narod.ru

فعالیت فاگوسیتیک نوتروفیل ها

عملکرد فاگوسیتیک سلول‌های خون محیطی معمولاً با درصد نوتروفیل‌های فاگوسیتی، تعداد فاگوسیتی (متوسط ​​تعداد میکروارگانیسم‌های جذب شده توسط یک گرانولوسیت) و شاخص فاگوسیتی مطلق، که یک مقدار انتزاعی است که از ضرب عدد فاگوسیتی در عدد به دست می‌آید، ارزیابی می‌شود. تعداد نوتروفیل های فاگوسیتیک در 1 میلی متر مکعب خون. به عبارت دیگر، شاخص فاگوسیتیک مطلق تعداد میکروب هایی است که قادر به جذب نوتروفیل های موجود در 1 میلی متر مکعب خون هستند. هنگام مرحله بندی واکنش های فاگوسیتوز، از سوسپانسیون میکروارگانیسم های کشته شده و خون بیمار استفاده می شود. پس از انکوباسیون خون و باکتری در ترموستات، اسمیر تهیه شده، رنگ آمیزی می شود و ظرفیت جذب گرانولوسیت ها ارزیابی می شود.

برای مرحله واکنش فاگوسیتوز، از سوسپانسیون میکروارگانیسم های زنده نیز استفاده می شود. در این موارد، فعالیت فاگوسیتی گرانولوسیت ها 2 تا 2.5 برابر کمتر از واکنش با باکتری های کشته شده خواهد بود. خواص روزت سازی نوتروفیل ها در سال های اخیرمشخص شده است که نوتروفیل های انسانی دارای گیرنده هایی در سطح غشای خود برای تعدادی از اجزای مکمل و قطعات Fc ایمونوگلوبولین ها هستند. وجود گیرنده هایی برای گلبول های قرمز گوسفند بر روی غشای نوتروفیل ها نیز ثابت شده است.

مانند لنفوسیت ها، نوتروفیل ها را می توان بر اساس توانایی آنها در تشکیل روزت خود به خود با گلبول های قرمز گوسفند و تشکیل روزت مکمل با گلبول های قرمز آلوژنیک در حضور کمپلمان و ایمونوگلوبولین ها به جمعیت هایی تقسیم کرد.

مرحله‌بندی واکنش‌های تشکیل روزت خودبه‌خود و مکمل نوتروفیل‌ها مشابه مرحله‌بندی واکنش‌های تشکیل روزت خودبه‌خود و مکمل لنفوسیت‌ها است. فعالیت مکمل سرم خون اجزای کمپلمان از نظر بیولوژیکی خنثی هستند، اما هنگامی که توسط کمپلکس آنتی ژن-آنتی بادی فعال می شوند، خواص آنزیم ها را به دست می آورند و نقش برجسته ای (محافظت کننده یا مخرب) در سیتولیز ایمنی ایفا می کنند. علاوه بر سیتولیز، مکمل به طور مستقیم در تظاهرات مختلف دفاع غیراختصاصی بدن و عمدتاً در مراحل مختلف واکنش التهابی اعم از سلولی و هومورال دخالت دارد.

در میان این تظاهرات، بیشترین مطالعه شده فعالیت مکمل، منجر به آزاد شدن هیستامین و افزایش نفوذپذیری مویرگی، کنترل کموتاکسی و افزایش توانایی فاگوسیتی گرانولوسیت‌های نوتروفیل، تقویت چسبندگی ایمنی و اپسونیزاسیون ذرات فاگوسیتی، اختلال در دیواره سلولی است. و غیره

افزایش نفوذپذیری کوچک عروق خونیبه نظر می رسد مکمل در کنترل مهاجرت گرانولوسیت نقش دارد.

سیستم کمپلمان توسط مولکول‌های پروتئینی که در بخش‌های آلفا و بتا گلوبولین قرار دارند نشان داده می‌شود و از ۱۱ پروتئین سرم خون تشکیل شده است که ۹ جزء را تشکیل می‌دهند.

برای فعال کردن سیستم مکمل، مواد خاصی مورد نیاز است، در نتیجه اجزای مکمل یکدیگر را در یک توالی دقیق (آبشار یا گنجاندن متوالی) به دو طریق - کلاسیک و جایگزین (یا پروپردین) فعال می کنند.

فعال شدن در امتداد مسیر کلاسیک توسط یک کمپلکس آنتی ژن-آنتی بادی که با ایمونوگلوبولین های کلاس G و M جمع شده است یا توسط کمپلکس های پلی آنیون-پلی کاتیون مانند کمپلکس هپارین-پروتامین ایجاد می شود. در این مورد، اولین جزء مکمل (C1) C1-esterase را تشکیل می دهد، که اجزای مکمل چهارم (C4) و دوم (C2) را می شکند و باعث تشکیل C3-convertase مسیر کلاسیک می شود.

مسیر جایگزین فعال سازی مکمل از نظر تکاملی قدیمی تر است. این مهم در مکانیسم دفاعی ضد باکتریایی قبل از شروع تولید است. آنتی بادی های خاص. فعال شدن در طول مسیر جایگزین توسط ایمونوگلوبولین های انباشته کلاس A و E، پلی ساکاریدهای محلول و نامحلول غشاهای باکتری ایجاد می شود و نیازی به حضور اجزای مکمل C1، C4 و C2 ندارد.

در مرحله اول، یک آنزیم بر روی سطح فعال کننده در نتیجه برهمکنش عوامل جزء S3 تشکیل می شود. این آنزیم بسیار ناپایدار است، اما می تواند S3 را بشکند و در نتیجه به تشکیل S3 کانورتاز کارآمدتر کمک کند. تشکیل C3 کانورتاز و برش سومین جزء مکمل تحت تأثیر آن نکات کلیدی در هر دو مسیر فعال سازی است.

در این مرحله، فعل و انفعالات سلولی وابسته به مکمل رخ می دهد. به اصطلاح پل های مکمل در القای پاسخ های ایمنی، از بین بردن کمپلکس های ایمنی و کنترل عفونت های باکتریایی نقش دارند. تشکیل چنین پل هایی از دیرباز به عنوان چسبندگی ایمنی شناخته شده است.

این پدیده در آزمایش تشکیل روزت مکمل استفاده می شود. هر دو مسیر فعال سازی مکمل منجر به تولید قطعات فعال بیولوژیکی از اجزای مکمل می شود. بنابراین، سیستم کمپلمان توسط عواملی فعال می شود که به طور مداوم در یک بدن با عملکرد طبیعی وجود دارند.

در فرآیند تکامل، مکانیسم هایی برای کنترل فعال سازی آن نیز توسعه یافته است. دو مکانیسم اصلی برای تنظیم فعال سازی کمپلمان وجود دارد. اولین مورد ذاتی در خود سیستم است و در ناپایداری C3 کانورتاز هر دو مسیر نهفته است، که فعال شدن اجزای مکمل بعدی درگیر در آبشار فعال سازی (C5 - C9) را محدود می کند.

دوم توسط پروتئین های بازدارنده طبیعی خاص انجام می شود. از این میان، مهم‌ترین آنها مهارکننده C1 است که با قطعه C2 کمپلکسی را تشکیل می‌دهد و از جدا شدن بیشتر C4 و C2 جلوگیری می‌کند و بنابراین مونتاژ C3 کانورتاز مسیر کلاسیک را کنترل می‌کند، و غیرفعال کننده C3، که در خدمت است. به عنوان پروتئین کنترل اصلی سیستم کمپلمان، C3 را در فاز مایع به دو پروتئین غیرفعال همولیتیک تقسیم می کند.

شواهدی از تغییرات در سیستم کمپلمان در شرایط مختلف پاتولوژیک وجود دارد. بنابراین، کاسل (1977) کمبود مکمل و اجزای آن را در بیش از 5000 بیمار مبتلا به سرطان در نقاط مختلف ایجاد کرد.

اجزای تک تک مکمل سرم معمولاً با روش ایمونودیفیوژن شعاعی Mancini با استفاده از آنتی سرم های تک اختصاصی به یک یا آن جزء تعیین می شوند. فعالیت مکمل همچنین با توانایی آن در لیز گلبول های قرمز در حضور آنتی بادی علیه آنها ارزیابی می شود.

واحد فعالیت همولیتیک کمپلمان به عنوان فعالیت لازم برای لیز کردن 50 درصد گلبول های قرمز در حضور آنتی بادی ها در نظر گرفته می شود. با استفاده از روش تیتراسیون جنبشی می توان واکنش را در طول زمان ثبت کرد. این واکنش کیفی است و اطلاعاتی در مورد غلظت مکمل و اجزای آن ارائه نمی دهد.

اصلاح ایمنی در بیماران سرطانی

غده پروستات، V.A. Savinov

www.medchitalka.ru

فعالیت فاگوسیتی لکوسیت های خون محیطی در گونه های مختلف جانوری

ویژگی های تشکیل قیمت برای خدمات دامپزشکی هنگام مراقبت از حیوانات کوچک

تروفیمووا E.N.

با در نظر گرفتن ویژگی های شکل گیری قیمت خدمات دامپزشکی هنگام ارائه خدمات به حیوانات خانگی کوچک، ایجاد قیمت های مبتنی بر علمی را تضمین می کند که در عمل دامپزشکی استفاده می شود.

ویژگی های شکل گیری نقل قول در مورد خدمات دامپزشکی در

خدمات حیوانات خانگی کوچک

شرح ویژگی های شکل گیری مظنه در خدمات دامپزشکی در خدمت حیوانات خانگی کوچک یک استقرار علمی - نقل قول های مستدل است که در عمل دامپزشکی استفاده می شود.

UDC 619:616 - 002.5

فعالیت فاگوسیتیتیک لکوسیت های خون محیطی در گونه های مختلف حیوانات

Trubkin A.I.، Kharitonov M.V.

موسسه آموزشی دولتی فدرال آموزش عالی حرفه ای "کازانسکایا" آکادمی دولتیدامپزشکی به نام N.E. باومن"

کلیدواژه: مایکوباکتریوم، سویه، فعالیت فاگوسیتی.

کلیدواژه: مایکوباکتریوم، سویه، فعالیت فاگوسیتی.

خون یکی از ظریف ترین و حساس ترین شاخص ها است که وضعیت عملکردی بدن را نشان می دهد و تصویری از مبارزه آن با میکروارگانیسم های مهاجم، کرم ها و توانایی واکنشی آن را منعکس می کند. توسعه یافته توسط I.I. نظریه مکانیکف نقش حفاظتیفاگوسیت‌ها در مبارزه بدن با میکروب‌های بیماری‌زا که به بافت‌های آن نفوذ کرده‌اند، اولین گام برای ایجاد نظریه ایمنی ضدعفونی بود. طبق منابع متون، فاگوسیتوز در طی عفونت سل دارای ماهیت محافظتی غیر اختصاصی است. با این حال، تعدادی از مشاهدات وجود دارد که نشان می دهد هنوز درجه خاصی از ویژگی در واکنش های فاگوسیتیک در سل وجود دارد. به عنوان مثال،

جهنم تیموفیفسکی، S.V. Belevolenskaya (1927)، G.D. بلانوفسکی (1928) نشان داد که سلول‌های فاگوسیتیک اگزودای صفاقی، خون محیطی، طحال و ریه، حیوانات ایمن شده و مقاوم به طبیعی در حضور مایکوباکتریوم‌های بدخیم از بین نمی‌روند، بلکه برعکس، تولیدمثل آنها را سرکوب می‌کنند.

حتی پیچیده‌تر از این مسئله سرنوشت خود مایکوباکتری‌های سلی است که به بدن نفوذ می‌کنند و واکنشی که در اندام‌ها ایجاد می‌کنند. با توجه به منابع ادبی (A.S. Rabukhin, 1941; Yu.A. Lebedeva, S.M. Sazhina, 1913 و غیره) در حضور یک فرهنگ حاد سل، لکوسیتوز نوتروفیل و فاگوسیتوز مایکوباکتریوم سل توسط لکوسیتوز نوتروفیلیک و سپس نوتروفیلیک رخ می دهد. لکوسیت ها، پر از پاتوژن رخ می دهد. در عین حال، لکوسیت های بیماران مبتلا به بیماری های غیراختصاصی ریوی، با شکل محدود سل، در موارد عفونت با دوزهای کم باسیل سلافزایش انتقال به لنفوبلاست ها وجود دارد. در عین حال، لکوسیت های کسانی که از سل مزمن یا حاد رنج می برند به سرعت دچار پوسیدگی می شوند.

در این راستا، مطالعه مقایسه ای فعالیت فاگوسیتی لکوسیت های خون محیطی در انواع مختلفحیوانات، از جمله خوکچه هندی و خرگوش.

مواد و روش ها. از لکوسیت های خون محیطی حیوانات سالم استفاده شد: گاو، اسب، گوسفند، بز، سگ، خرگوش، خوکچه هندی، موش سفید.

برای جلوگیری از لخته شدن خون به میزان 4 واحد هپارینه شد. تزریق هپارین در هر 1 میلی لیتر خون. پس از اختلاط اولیه، لوله ها با خون در زاویه 100 در دمای اتاق به مدت 1 ساعت قرار گرفتند. سپس لوله های آزمایش با زاویه 450 به مدت 15-20 دقیقه قرار داده شدند. در این حالت، تعداد مورد نیاز لکوسیت برای انجام آزمایش ها بین گلبول های قرمز و پلاسمای خون به صورت مه جمع می شود. لکوسیت‌های انباشته شده آسپیره شدند و به ویال‌های حاوی 5 میلی‌لیتر محیط 199 اضافه شدند. پس از مخلوط کردن کم مخلوط حاصل، کشت‌های مایکوباکتریایی M. bovis سویه N14 با کدورت استاندارد 1 میلی‌گرم در 1 میلی‌لیتر محلول فیزیولوژیکی به ویال‌ها اضافه شد.

بطری ها را با یک درپوش لاستیکی بسته و پس از هم زدن سبک، در حالت عمودی در ترموستات با دمای 370 درجه سانتیگراد قرار دادند.

در ابتدا هر 15 دقیقه. (15،30،45،60،75،90،105،120 دقیقه)، و سپس پس از 3،4،5،6،24،48 و 72 ساعت از لحظه جوجه کشی، اسمیر با استفاده از شیشه مخصوص این منظور در یک زاویه 200. اسمیر در محلول اشباع دی کلرید جیوه به مدت 2-3 دقیقه ثابت می شود. و رنگ آمیزی با Ziehl carbol fuchsin، رنگ زدایی با محلول 2.5٪ اسید سولفوریک. برای حل کردن گلبول های قرمز به علاوه

با محلول اسید استیک درمان شده و علاوه بر آن با محلول 0.5٪ متیلن بلو مخلوط با محلول 0.5٪ سودا رنگ آمیزی می شود.

100 لکوسیت پلی مورفونکلئر، 50 واحد از هر لبه اسمیر شمارش شد و فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها به صورت درصد محاسبه شد.

شاخص فاگوسیتیز به شرح زیر تعیین شد: تعداد باسیل های سل فاگوسیت شده در 100 لکوسیت شمارش شد و تعداد حاصل بر تعداد لکوسیت های بررسی شده تقسیم شد.

نتایج تحقیقات. مطالعه فعالیت فاگوسیتی لکوسیت های خون محیطی در گونه های مختلف جانوری در رابطه با کشت های بدخیم مایکوباکتریوم توبرکلوزیس گاوی نشان داد که در 15 دقیقه اول. پس از تماس با لکوسیت ها، اجسام میکروبی در اطراف سلول های خونی فاگوسیتوز شده تجمع می یابند (جذب)، اما جذب اجسام میکروبی هنوز مشاهده نشده است. 30 دقیقه پس از معرفی مایکوباکتریوم، افزایش فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها به سمت مایکوباکتری ها در همه گونه های حیوانی مشاهده شد. همانطور که از جدول 1 مشاهده می شود، در 30 دقیقه اول. لکوسیت های موش سفید فعالیت فاگوسیتی قابل توجهی از خود نشان می دهند (03/2±2/9 درصد؛ P

در حیوانات مولد، فعالیت فاگوسیتی بالایی لکوسیت ها در بز 10/2±2/6 درصد مشاهده شد (P

همزمان با فعالیت فاگوسیتیتیک لکوسیت ها، شاخص فاگوسیتوز مورد مطالعه قرار گرفت - تعداد میکروب های فاگوسیت در 100 لکوسیت. داده‌هایی که میانگین تعداد مایکوباکتری‌های جذب‌شده در هر فاگوسیت را نشان می‌دهند در جدول 2 ارائه شده است. در مورد ما، چنین سلول هایی 80٪ را تشکیل می دهند. در دوم - از 10 تا 20، چنین سلول هایی 15٪ را تشکیل می دهند. در سومین - بیش از 20 مایکوباکتری، چنین سلول هایی 5٪ از کل سلول های شمارش شده را تشکیل می دهند.

همانطور که از جدول مشخص است، شاخص فاگوسیتیز اولیه در رابطه با کشت بدخیم مایکوباکتری گاوی در همه حیوانات زیر یک بود.

* 15 30 45 60 75 90 105 120 3 ساعت 4 ساعت 5 ساعت 6 ساعت 24 ساعت 48 ساعت 72 ساعت

1. اسب 3 6.8 ± 1.62 3.5 ± 0.95 4.3 ± 1.10 5.8 ± 1.31 6.4 ± 1.62 8.7 ± 1.62 10.0 ± 2.71 18.5 ± 4.0 0.3 ± 2.0 0.0 ± 3.22 39.0 ± 3.50 43.9 ± 7.72 48.4 ± 6.20 48.7 ± 5.20

2. کر. شاخ دام 3 5.0 ± 1.03 3.4 ± 0.93 4.8 ± 1.14 5.8 ± 1.39 7.4 ± 2.31 12.2 ± 2، 96 19.0 ± 3.14 3.1 ± 0.0 0.8 ± 6.05 40.0 ± 6.15 41.6 ± 8.07 43.0 ± 8.11 43.2 ± 5.08

3. گوسفند 3 5.6 ± 1.11 0.05 4.8 ± 1.05 0.05 6.2 ± 1.21 9.2 ± 2.05 12.4 ± 3.63 15.8 ± 2.33 19.8 ± 0.1 ± 2.2. 33.8 ± 4.17 38.8 ± 5.26 40.0 ± 4.15 44.8 ± 5، 17 49.6 5.09 ± 7.11 ± 51.8

4. بز 3 6.4 ± 2.09 6.2 ± 2.10 7.8 ± 2.81 11.0 ± 2.33 19.4 ± 3.17 23.0 ± 3.19 25.1 ± 2.20 5.1 ± .5 40.0 ± 5.08 44.4 ± 5.19 52.0 ± 7.01 55.6 ± 7.12 60.4 ± 7.01 7.07

5. سگ 3 6.6 ± 1.15 7.8 ± 2.03 9.2 ± 2.97 12.0 ± 3.31 12.8 ± 3.03 26.1 ± 3.95 31.0 ± 3.95 31.0 ± 3.8 7 40.4 ± 6.09 43.2 ± 6.12 49.5 ± 7.05 55.8 ± 8.11 67.0 ± 8.19

6. خرگوش 3 4.3 ± 1.90 2.8 ± 0.9 3.1 ± 1.01 3.8 ± 1.65 5.0 ± 1.68 5.4 ± 1.35 7.4 ± 2.06 .1 ± 0.1 2.51 ± 17.8 ± 3.19 0.05 24.4 ± 4.11 0.05 27.0 ± 4.92 0.05 ± 5.15 31.0

7. M. اوریون 3 2.6 ± 1.07 1.2 ± 0.32 1.5 ± 0.95 2.0 ± 1.00 2.2 ± 1.04 2.8 ± 1.04 3، 4 ± 1.17 0.2 ± 0.2 0.1 ± 0.6 ± 1.92 6.3 ± 2.03 11.8 ± 3.09 13.2 ± 3.19 4.05 ± 17.2

8. موش سفید 3 8.1 ± 1.35 9.2 ± 2.03 13.0 ± 2.20 19.6 ± 3.35 27.6 ± 5.49 31.6 ± 5.82 37.4 ± .6.6 ± 0.8 43.8 ± 0.07 8.15 ± 65.0 72.3 ± 8.03 84.4 ± 8.15 87.0 ± 9.07 87.6 9.19 ±

* - جذب مایکوباکتری ها در سطح لکوسیت ها

نوع حیوانات پس از تماس با پاتوژن از طریق:

15 30 45 60 75 90 105 120 3 ساعت 4 ساعت 4 ساعت 5 ساعت 6 ساعت 24 ساعت 48 ساعت 72 ساعت

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

1. اسب 3 - 0.9 ± 0.03 1.78 ± 0.86 2.82 ± 1.08 3.3 ± 1.01 3.9 ± 1.10 4.07 ± 1.51 5.32 ± 1.51 5.32 ± 1.51 5 5.96 ± 1.14 6.8 ± 1.6 8.1 ± 2.90 8.2 ± 1.70

2. کر. شاخ دام 3 - 0.02 ± 0.9 1.5 ± 0.51 2.0 ± 0.52 2.2 ± 0.91 2.8 ± 0.85 3.1 ± 1.05 3.6 ± 1،21 4.0 ± 1.60 .1 ± 1.65 2.12 5.4 ± 1.36 5.6 ± 2.05 5.6 ± 2، 17

3. گوسفند 3 - 0.8 ± 0.02 1.8 ± 0.30 2.3 ± 0.15 2.8 ± 0.65 3.3 ± 1.02 4.4 ± 1.65 5.8 ± 2.01 5.8 ± 0.6 2.01 ± 0.6 3.18 ± 2.31 ± 6.0 2.15 ± 6.8 3.11 ± 6.8

4. بز 3 - 0.8 ± 0.11 1.7 ± 0.20 2.1 ± 0.80 2.3 ± 0.7 3.8 ± 1.05 4.0 ± 2.11 4.4 ± 2.01 5.1 ± 0.8 2.03 ± 0.1 2.35 7.6 ± 3.05 7.8 ± 3.12 7.8 ± 3.11

5. سگ 3 0.2 ± 0.01 0.8 ± 0.05 1.7 ± 0.17 3.01 ± 1.01 4.5 ± 1.17 5.9 ± 1.19 2.0 ± 0.5 2.0 ± 2.05 2.05 ± 3.15 ± 8.7 3.05 ± 9.5 3.41 ± 9.9 3 ± 10.1، 11

6. خرگوش 3 0.02 ± 0.3 0.3 ± 1.9 0.61 ± 1.3 2.0 ± 0.90 2.1 ± 0.80 2.6 ± 0.31 2.9 ± 0.60 0.3 ± 0.60 1.01 3.8 ± 1.15 3.9 ± 1.12 3.9 ± 1.05

7. M. اوریون 3 - 0.1 ± 0.01 1.2 ± 0.03 1.9 ± 0.2 1.1 ± 0.30 1.3 ± 0.9 1.3 ± 0.12 0.9 ± 0.8 1.8 ± 0.7 0.64 ± 1.01 ± 2.6 1.00 ± 2.6 2، 0.45 ± 7

8. موش سفید 3 0.3 ± 0.05 0.9 ± 0.04 2.8 ± 0.31 3.6 ± 1.15 5.3 ± 1.36 6.8 ± 2.02 7.5 ± 0.04 2.30 ± 0.5 3.06 9.1 ± 2.95 9.9 ± 2.12 10.0 ± 3.01 10.3 3.05 ±

همانطور که سلول ها کشت می شوند، نرخ فاگوسیتوز قابل توجه است (P

4.4.6 تعیین فعالیت فاگوسیتیک سلول های خونی

اصل روش. این روش مبتنی بر پدیده فاگوسیتوز است - یک واکنش ارگانیسم که در توانایی سلول های فاگوسیت برای گرفتن و هضم میکروارگانیسم های خارجی ظاهر می شود.

معرف ها: 1. تثبیت کننده خون.

2. تعلیق کشت میکروبی روزانه (0.5-1 میلیارد mc/ml) در محلول نمکی.

پیشرفت عزم. 0.5 میلی لیتر خون آزمایش تثبیت شده و 0.5 میلی لیتر سوسپانسیون میکروبی حاوی 0.5-1 میلیارد سلول میکروبی در هر میلی لیتر بر اساس استاندارد کدورت نوری در لوله های سانتریفیوژ استریل ریخته می شود.

بسته به وظایف و اهداف تحقیق، کار ممکن است استفاده شود انواع مختلفمیکروارگانیسم های زنده یا کشته شده: E. coli، استافیلوکوک، استرپتوکوک و غیره.

لوله آزمایش با مخلوط آماده شده به دقت تکان داده می شود و به مدت 30 دقیقه در یک ترموستات قرار می گیرد یا حمام آب، روی 37 درجه سانتیگراد تنظیم شده است. پس از مدت زمان مشخص شده، 3-5 اسمیر از مخلوط (طبق روش تهیه اسمیر خون) ساخته می شود، با متیل الکل ثابت می شود و طبق Romanovsky-Giemsa رنگ آمیزی می شود.

محاسبه: فعالیت فاگوسیتیک لکوسیت ها. فعالیت فاگوسیتی به صورت درصد لکوسیت های فعال (فاگوسیت ها) در تعداد کل لکوسیت های نوتروفیل شمارش شده بیان می شود. از تعداد 100 نوتروفیل شمارش شده، نسبت درصد آنها به دست می آید، یعنی لوکوگرام. بر اساس 100 فاگوسیت یافت شده، تعداد سلول های شرکت کننده در فاگوسیتوز (گرفتن تعداد معینی از میکروب ها) تعیین می شود. نتیجه به دست آمده به صورت درصد بیان می شود.

شاخص فاگوسیتوز با میانگین تعداد میکروب های فاگوسیتوز شده در هر لکوسیت فعال تعیین می شود. این شاخص شدت فاگوسیتوز را مشخص می کند. برای تعیین شاخص فاگوسیتی از همان اسمیرهای خونی استفاده می شود که برای تعیین فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها استفاده شد. در آماده سازی های تهیه شده به روشی که در بالا توضیح داده شد، حداقل 100 لکوسیت و تعداد اجسام میکروبی جذب شده توسط آنها شمارش می شود. شاخص فاگوسیتی با تقسیم تعداد باکتری های فاگوسیتوز شده بر تعداد لکوسیت های فعال محاسبه می شود.

عدد فاگوسیتی یک شاخص اضافی است که هم تهاجمی بودن نوتروفیل ها و هم فعالیت آنها را مشخص می کند. تعداد فاگوسیت ها با تقسیم تعداد باکتری های فاگوسیتوز شده بر تعداد کل لکوسیت های شمارش شده محاسبه می شود.

ظرفیت فاگوسیتی با تعداد سلول های میکروبی فاگوسیت شده توسط لکوسیت ها در 1 میلی متر مکعب خون تعیین می شود. این شاخص فعالیت فاگوسیتیک عمومی خون را مشخص می کند و به تعداد لکوسیت های موجود در Imm3 بستگی دارد. برخی از نویسندگان این شاخص را شدت فاگوسیتوز، فاگوسیتوز مطلق یا فاگوسیتوز عمومی می نامند. ظرفیت فاگوسیتی با ضرب عدد فاگوسیتی در تعداد لکوسیت ها در 1 میلی متر مکعب خون محاسبه می شود.

با فعالیت عملکردی بالای فاگوسیت ها، فرآیند هضم میکروب های دستگیر شده بلافاصله و در 30 دقیقه اول شروع می شود. نه تنها تغییر بصری در سلول میکروبی مشاهده می شود، بلکه تغییر شکل برخی لکوسیت های نوتروفیل (تورم، تغییر در طرح هسته، رنگ آمیزی ضعیف و غیره) نیز مشاهده می شود. علائمی ظاهر می شود که مشخصه اتولیز (خود تخریبی) و آغاز تخریب نوتروفیل است. در عرض 2 ساعت، واکنش فاگوسیتی به طور معمول با هضم میکروب های دستگیر شده و تخریب فاگوسیت های پلی مورفونوکلئر پایان می یابد.

برای ارزیابی کمی توانایی گوارشی فاگوسیت ها، مفهوم شاخص تکمیل فاگوسیتوز (PCI) برای این منظور معرفی شد، نیمی از نسبت های فعالیت فاگوسیتی نوتروفیل ها به دست آمده پس از 30 دقیقه تعیین می شود. انکوباسیون به فعالیت فاگوسیتی نوتروفیل ها پس از 2 ساعت به دست آمد و نسبت شاخص های فاگوسیتی در همان زمان. به طور کلی پذیرفته شده است که با IRF 1 یا بیشتر، واکنش کامل و کمتر از 1 - ناقص در نظر گرفته می شود.