HPLC மற்றும் கேபிலரியைப் பயன்படுத்துதல். பார்மகோகினெடிக்ஸ் மற்றும் உயிர் கிடைக்கும் தன்மை பற்றிய ஆய்வு - ஜர்னல் ஆஃப் பார்மகோகினெடிக்ஸ் மற்றும் பார்மகோடைனமிக்ஸ் உயர் செயல்திறன் திரவ நிறமூர்த்தம்

கையெழுத்துப் பிரதியாக

மெல்னிகோவ் இகோர் ஓலெகோவிச்

அமினோ அமிலங்களின் பகுப்பாய்விற்கான மைக்ரோ முறைகளின் வளர்ச்சி,

குறுகிய பெப்டைடுகள் மற்றும் ஒலிகோனூக்ளியோடைடுகள்

ஆர்பி ஹெச்பிஎல்சி மற்றும் கேபில்லரியைப் பயன்படுத்துதல்

எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்

சிறப்பு: 02.00.02 - பகுப்பாய்வு வேதியியல்

வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரைகள்

மாஸ்கோ 2006 மாஸ்கோ ஸ்டேட் அகாடமி ஆஃப் ஃபைன் கெமிக்கல் டெக்னாலஜியின் பகுப்பாய்வு வேதியியல் துறையில் ஆய்வுக் கட்டுரை முடிக்கப்பட்டது.

எம்.வி. லோமோனோசோவ் மற்றும் இன்ஸ்டிடியூட் ஆஃப் பயோஆர்கானிக் கெமிஸ்ட்ரியின் பகுப்பாய்வு புரத வேதியியல் குழுவில் பெயரிடப்பட்டது. கல்வியாளர்கள் எம்.எம். ஷெம்யாகின் மற்றும் யு.ஏ. ஓவ்சினிகோவ் RAS.

அறிவியல் இயக்குனர்:

வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர், இணை பேராசிரியர் குளுபோகோவ் யூரி மிகைலோவிச்

உத்தியோகபூர்வ எதிரிகள்:

வேதியியல் அறிவியல் மருத்துவர், பேராசிரியர் மகரோவ் நிகோலாய் வாசிலீவிச் வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் கிரிலோவா யூலியா ஜெனடிவ்னா

முன்னணி அமைப்பு:

உயிர்வேதியியல் இயற்பியல் நிறுவனம் பெயரிடப்பட்டது. என்.எம். இமானுவேல் ஆர்.ஏ.எஸ்

டிசம்பர் 20, 2006 அன்று 12:00 மணிக்கு மாஸ்கோ ஸ்டேட் அகாடமி ஆஃப் ஃபைன் கெமிக்கல் டெக்னாலஜியில் டி 212.120.05 ஆய்வுக் குழுவின் கூட்டத்தில் பாதுகாப்பு நடைபெறும். எம்.வி. லோமோனோசோவ் முகவரியில்: 119571, மாஸ்கோ, வெர்னாட்ஸ்கி அவென்யூ, 86, அறை. எம்-119.

இந்த ஆய்வுக் கட்டுரையை மாஸ்கோ மாநில அகாடமி ஆஃப் ஃபைன் கெமிக்கல் டெக்னாலஜியின் நூலகத்தில் காணலாம். எம்.வி. லோமோனோசோவ்.

ஆய்வுக் குழுவின் அறிவியல் செயலாளர், வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் யு.ஏ. எஃபிமோவா சம்பந்தம்வேலை. தற்போது, ​​மருத்துவ ஆராய்ச்சியானது மிகவும் பொதுவான மற்றும் ஆபத்தான சமூக முக்கியத்துவம் வாய்ந்த நோய்களைக் கண்டறிவதற்கான கருவி நுண் பகுப்பாய்வு முறைகளைப் பயன்படுத்துவதில் அதிக கவனம் செலுத்துகிறது. இந்த முறைகளின் குறிப்பிடத்தக்க பகுதி முழுமையாக இல்லை மற்றும் எப்போதும் சரியான நேரத்தில் மற்றும் உயர்தர நோயறிதலை வழங்காது, இது பெரும்பாலும் ஒரு நபரின் உயிர்வேதியியல் நிலையை கண்காணிப்பதற்கான நவீன தேவைகளை பூர்த்தி செய்யாது.

உடலியல் திரவங்களின் ஒரு பகுதியாக இருக்கும் இலவச அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் குறுகிய பெப்டைடுகள் முக்கியமான செயல்பாட்டு முக்கியத்துவத்தைக் கொண்டுள்ளன. சில சந்தர்ப்பங்களில், அவை சில நோய்களின் மூலக்கூறு குறிப்பான்களாக செயல்படலாம்.

அவற்றின் செறிவில் ஏற்படும் மாற்றங்கள் பெரும்பாலும் வளர்சிதை மாற்றக் கோளாறுகளுடன் தொடர்புடையவை, இது ஒரு குறிப்பிட்ட நோயின் வளர்ச்சியைக் குறிக்கிறது. அமினோ அமில பகுப்பாய்விற்கான தற்போதுள்ள பெரும்பாலான முறைகள் உணர்திறன் மற்றும் அவற்றை அடையாளம் காண போதுமான அளவு தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டவை அல்ல, அல்லது அமினோ அமிலங்களின் வழித்தோன்றல் தேவைப்படுகிறது, இது அவற்றின் உறுதிப்பாட்டின் செயல்முறையை கணிசமாக சிக்கலாக்குகிறது. இலவச மரபணு குறியிடப்பட்ட அமினோ அமிலங்களின் எளிய மற்றும் செலவு குறைந்த பகுப்பாய்வு பிரச்சனை இன்னும் முழுமையாக தீர்க்கப்படவில்லை. அதே நேரத்தில், அமினோ அமிலங்களின் மருத்துவப் பகுப்பாய்விற்கு, அதிக உணர்திறன் மற்றும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட தீர்மானத்திற்கு அவற்றின் முன் அல்லது பிந்தைய நெடுவரிசை மாற்றம் தேவைப்படுகிறது. உடலியல் திரவங்களில் மூலக்கூறு குறிப்பான்களின் உள்ளடக்கத்தில் ஏற்படும் மாற்றங்கள் ஒரு குறிப்பிட்ட நோய்க்கான நோயாளியின் மரபணு முன்கணிப்புடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம். எனவே ஆய்வின் கீழ் நோய்க்கான காரணத்தை தீர்மானிப்பதற்கான நம்பகத்தன்மையை அதிகரிப்பதற்கும் அதன் சிகிச்சையை மிகவும் பயனுள்ளதாக்குவதற்கும் டிஎன்ஏ துண்டுகளின் ஒப்பீட்டு பகுப்பாய்வு நடத்த வேண்டிய அவசியம் உள்ளது.

இதற்கிடையில், அமினோ அமிலம் மற்றும் நியூக்ளியோடைடு பகுப்பாய்வுக்குத் தேவையான இறக்குமதி செய்யப்பட்ட உபகரணங்கள், ஒரு விதியாக, விலை உயர்ந்தவை மற்றும் பெரும்பாலான மருத்துவ ஆய்வகங்களுக்கு அணுக முடியாதவை. ஒவ்வொரு வகை நோய்களுக்கும் பல சாதனங்கள் மிகவும் நிபுணத்துவம் வாய்ந்தவை என்பதன் மூலம் நிலைமை மேலும் மோசமடைகிறது.

இது மருத்துவ ஆய்வுகளின் விலையை கடுமையாக அதிகரிக்கிறது மற்றும் ஒப்பீட்டை சிக்கலாக்குகிறது.ரஷியன் அகாடமி ஆஃப் சயின்ஸின் உயிரியல் வேதியியல் நிறுவனத்தில் பகுப்பாய்வு புரத வேதியியல் குழுவின் தலைவர், மூத்த ஆராய்ச்சியாளர், வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் ஆகியோருக்கு ஆசிரியர் நன்றியைத் தெரிவிக்கிறார். ஐ.வி. நிலையான உதவி, கவனம் மற்றும் முடிவுகளின் விவாதத்திற்கு நாசிமோவ்.

பெறப்பட்ட பகுப்பாய்வு முடிவுகளின் விளக்கம். எனவே, பயோபாலிமர்கள் மற்றும் அவற்றின் துண்டுகளின் கட்டமைப்பு பகுப்பாய்விற்கு இலவச மற்றும் மாற்றியமைக்கப்பட்ட அமினோ அமிலங்கள், குறுகிய பெப்டைடுகள் மற்றும் ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகள் ஆகியவற்றின் அதிக உணர்திறன், விரைவான மற்றும் நம்பகமான தீர்மானத்திற்காக உள்நாட்டு உற்பத்தியின் பொதுவில் கிடைக்கும் பகுப்பாய்வு உபகரணங்களைப் பயன்படுத்துவதற்கான சாத்தியக்கூறுகளை விரிவுபடுத்தும் புதிய முறைகளின் வளர்ச்சி. மற்றும் மருத்துவ நோயறிதல் நோக்கங்களுக்காக ஒரு அவசர அறிவியல் பணியாகும்.

வேலையின் குறிக்கோள். நோக்கம்ஆய்வறிக்கை வேலை என்பது உள்நாட்டு கருவித் தளத்தைப் பயன்படுத்தி இலவச மற்றும் மாற்றியமைக்கப்பட்ட அமினோ அமிலங்கள், குறுகிய பெப்டைடுகள் மற்றும் ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகள் ஆகியவற்றின் பகுப்பாய்வுக்கான கருவியாக அதிக உணர்திறன் கொண்ட மைக்ரோமெத்தடுகளின் தொகுப்பை உருவாக்குவதாகும்.

அறிவியல் புதுமை.

1. நேரடி UV ஃபோட்டோமெட்ரிக் மற்றும் ரிஃப்ராக்டோமெட்ரிக் கண்டறிதல் முறைகள் மூலம் தந்துகி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மற்றும் மைக்கேலர் எலக்ட்ரோகினெடிக் குரோமடோகிராபி ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி மாற்றப்படாத மரபணு குறியிடப்பட்ட α-அமினோ அமிலங்களைத் தீர்மானிப்பதற்கான முறைகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன.

2. ஃப்ளோரிமெட்ரிக் மற்றும் நேரடி புற ஊதா ஒளிக்கதிர் கண்டறிதல் முறைகள் கொண்ட தலைகீழ்-கட்ட உயர் செயல்திறன் திரவ நிறமூர்த்தம் மற்றும் தந்துகி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி இரத்த பிளாஸ்மாவில் உள்ள குறைந்த-மூலக்கூறு அமினோதியால்களின் கூட்டுத் தீர்மானத்திற்கான முறைகள் உருவாக்கப்பட்டு மருத்துவ நடைமுறையில் பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன.

3. புளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் கூடிய தந்துகி ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பயன்படுத்தி அல்லீல்-குறிப்பிட்ட பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை தயாரிப்புகளின் பகுப்பாய்வின் அடிப்படையில் சிரை இரத்த உறைவுக்கான பிறழ்ந்த மரபணுவின் துண்டுகளை தீர்மானிக்க ஒரு முறை உருவாக்கப்பட்டுள்ளது.

நடைமுறை முக்கியத்துவம் . அமினோ அமில பகுப்பாய்வின் வளர்ந்த முறையானது, மரபணு ரீதியாக குறியிடப்பட்ட அமினோ அமிலங்களின் நுண்ணிய அளவுகளை அவற்றின் பூர்வாங்க வழித்தோன்றல் இல்லாமல் தீர்மானிக்க உதவுகிறது, இது தற்போதுள்ள பகுப்பாய்வு திட்டத்தை கணிசமாக எளிதாக்குகிறது. வாஸ்குலர் விபத்துக்களின் மூலக்கூறு குறிப்பான்களை பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான முறைகளின் தொகுப்பு (ஹோமோசைஸ்டீன், சிஸ்டைன், குளுதாதயோன்), அத்துடன் சிரை இரத்த உறைவுக்கான பிறழ்ந்த மரபணுவின் துண்டுகள் உருவாக்கப்பட்டு நடைமுறை பயன்பாட்டிற்கு முன்மொழியப்பட்டுள்ளன. மேற்கொள்ளப்பட்ட வேலையின் விளைவாக, தந்துகி எலக்ட்ரோபோரேசிஸிற்கான ஒரே சாதனத்தில் புரதம் மற்றும் நியூக்ளிக் கூறுகள் இரண்டின் உயிர்வேதியியல் பகுப்பாய்விற்கு உள்நாட்டு உபகரணங்களை திறம்பட பயன்படுத்துவதற்கான சாத்தியத்தை நிரூபிக்க முடிந்தது. இந்த வேலையில் உருவாக்கப்பட்ட முறையைப் பயன்படுத்தி இரத்த பிளாஸ்மாவில் கந்தகம் கொண்ட அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பெப்டைட்களை தீர்மானிப்பது, நம்பகத்தன்மையுடன் நிறுவப்பட்ட மாரடைப்பு மற்றும் முன்-இன்ஃபார்க்ஷன் நிலைமைகளைக் கொண்ட டஜன் கணக்கான நோயாளிகளின் ஆபத்து காரணியை மதிப்பிடுவதற்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது. மேற்கொள்ளப்பட்ட வேலையின் முடிவுகள் உலகளாவிய, பொருளாதார தானியங்கு சிக்கலான கருவிகள் மற்றும் சில சமூக முக்கியத்துவம் வாய்ந்த நோய்களின் (மாரடைப்பு, பக்கவாதம், த்ரோம்போசிஸ்) மூலக்கூறு கண்டறிவதற்கான முறைகளின் உயிரியல் மருத்துவ பகுப்பாய்வு நடைமுறையில் பயன்படுத்தப்பட்டன. ரஷ்ய அறிவியல் அகாடமியின் பகுப்பாய்வுக் கருவி நிறுவனம்.

பாதுகாப்புக்காக சமர்ப்பிக்கப்பட்டது:

தந்துகி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மற்றும் மைக்கேலர் எலக்ட்ரோகினெடிக் குரோமடோகிராபி ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி அவற்றின் ஆரம்ப வழித்தோன்றல் இல்லாமல் நீர்வாழ் கரைசலில் மரபணு குறியிடப்பட்ட அமினோ அமிலங்களை தீர்மானிக்கும் முறைகள்;

குறைந்த மூலக்கூறு எடை பிளாஸ்மா அமினோதியோல்களை ஃப்ளோரோஜெனிக் ரியாஜெண்டுகளைப் பயன்படுத்தி (monobromobimane மற்றும் 5-iodoacetamidofluorescein) பெறுவதற்கான உகந்த நிலைமைகள்;

RP HPLC மற்றும் கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி இரத்த பிளாஸ்மாவில் குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்களை பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான முறை;

RP HPLC மற்றும் தந்துகி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் முறைகள் மூலம் இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீன் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானித்தல் முடிவுகள்;

லீனியர் பாலி-என், என்'டிமெதிலாக்ரிலாமைடில் கேபிலரி ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பயன்படுத்தி சிரை இரத்த உறைவுக்கான பிறழ்ந்த மரபணுவைத் தீர்மானிக்கும் ஒரு முறை.

வேலை அங்கீகாரம். முக்கிய முடிவுகள்மூலக்கூறு திரவ குரோமடோகிராபி மற்றும் கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (அக்டோபர் 15-19, 2001, மாஸ்கோ, ரஷ்யா) பற்றிய 8வது அனைத்து ரஷ்ய சிம்போசியத்தில் படைப்புகள் வழங்கப்பட்டன, உயிரியலில் பிரிப்பு முறைகள் பற்றிய 3வது சர்வதேச கருத்தரங்கம் (மே 13-18, மாஸ்கோ, 20038, ரஷ்யா , ), அடிப்படை அறிவியலில் இளங்கலை மற்றும் முதுகலை மாணவர்களின் சர்வதேச மாநாடு "Lomonosov-2005" (வேதியியல் பிரிவு. ஏப்ரல் 12-15, 2005, மாஸ்கோ, ரஷ்யா), 2வது அறிவியல் மற்றும் நடைமுறை மாநாடு "மருத்துவ உயிரி தொழில்நுட்பத்தின் தற்போதைய சிக்கல்கள்" (செப்டம்பர் 12 -14 2005, அனபா, ரஷ்யா), ரஷ்யாவின் உயிரி தொழில்நுட்பவியலாளர்கள் சங்கத்தின் 3வது காங்கிரஸ் பெயரிடப்பட்டது. யு.ஏ. ஓவ்சினிகோவ் (அக்டோபர் 25-27, 2005, மாஸ்கோ, ரஷ்யா), MITHT இல் இளம் விஞ்ஞானிகளின் 1வது மாநாடு. எம்.வி. லோமோனோசோவ் (அக்டோபர் 13-14, 2005, மாஸ்கோ, ரஷ்யா), பகுப்பாய்வு அறிவியல்களுக்கான சர்வதேச காங்கிரஸ் ICAS-2006 (ஜூன் 25-30, 2006, மாஸ்கோ, ரஷ்யா), ஐரோப்பிய உயிர்வேதியியல் சங்கங்களின் கூட்டமைப்பின் 31வது சர்வதேச காங்கிரஸ் (ஜூன் 24-29 , இஸ்தான்புல், துருக்கி), புரதங்கள், பெப்டைடுகள் மற்றும் பாலிநியூக்ளியோடைடுகள் பிரித்தல் பற்றிய 26வது சர்வதேச சிம்போசியம் (அக்டோபர் 16-20, 2006, இன்ஸ்ப்ரூக், ஆஸ்திரியா).

வெளியீடுகள். ஆய்வுக் கட்டுரைகளின் அடிப்படையில், 12 படைப்புகள் கட்டுரைகள் மற்றும் சுருக்கங்கள் வடிவில் வெளியிடப்பட்டன.

ஆய்வுக் கட்டுரை அமைப்பு. ஆய்வுக் கட்டுரை ஒரு அறிமுகம், இலக்கிய ஆய்வு, சோதனை பகுதி, முடிவுகளின் விவாதம், முடிவுகள் மற்றும் மேற்கோள் காட்டப்பட்ட இலக்கியங்களின் பட்டியல் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது.

ஆய்வுக் கட்டுரை 147 பக்கங்களில் வழங்கப்படுகிறது, 19 அட்டவணைகள் மற்றும் 42 புள்ளிவிவரங்கள் உள்ளன. இலக்கிய ஆதாரங்களின் பட்டியலில் 187 தலைப்புகள் உள்ளன.

அறிமுகத்தில்தலைப்புக்கான பகுத்தறிவு கொடுக்கப்பட்டுள்ளது, ஆராய்ச்சியின் குறிக்கோள்கள் மற்றும் பாதுகாப்பிற்காக சமர்ப்பிக்கப்பட்ட விதிகள் வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன, அதன் அறிவியல் புதுமை மற்றும் நடைமுறை முக்கியத்துவம் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது. ஆய்வு முடிவுகளின் சோதனை மற்றும் வெளியீடு, அத்துடன் ஆய்வுக் கட்டுரையின் கட்டமைப்பு மற்றும் நோக்கம் பற்றிய தரவுகள் வழங்கப்படுகின்றன.

1வது அத்தியாயம். ஆய்வின் கீழ் உள்ள சேர்மங்களை பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான தற்போதைய முறைகள் பற்றிய பொதுவான தகவல்கள் வழங்கப்படுகின்றன. குரோமடோகிராஃபிக் முறைகள் மற்றும் பொதுவாக ஏற்றுக்கொள்ளப்பட்ட பல அடையாள முறைகள் இன்னும் விரிவாக விவரிக்கப்பட்டுள்ளன. இரத்த பிளாஸ்மாவில் குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்கள் மற்றும் டிஎன்ஏ துண்டுகள் ஆகியவற்றைக் கண்டறியும் முறைகள் கருதப்படுகின்றன. அமினோ அமிலங்கள், குறுகிய பெப்டைடுகள் மற்றும் ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகள் ஆகியவற்றின் பகுப்பாய்விற்கான தற்போதைய முறைகளின் ஒப்பீடு மேற்கொள்ளப்படுகிறது மற்றும் இந்த பகுதியில் மேலும் ஆராய்ச்சியின் பொருத்தம் நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது.

பாடம் 2. பொருட்கள், எதிர்வினைகள், பயன்படுத்தப்படும் தீர்வுகளைத் தயாரிக்கும் முறைகள் மற்றும் வேலையைச் செய்யும் முறைகள் பற்றிய தரவு வழங்கப்படுகிறது.

அத்தியாயம் 3. முடிவுகள் மற்றும் விவாதம்.

உடலியல் திரவங்களில் உள்ள இலவச அமினோ அமிலங்களின் (AA) உள்ளடக்கம் பல நோய்களுக்கான கண்டறியும் அளவுருவாகும். நிகழ்த்தப்பட்ட ஆராய்ச்சி, அவற்றை விரைவாகவும் நம்பகத்தன்மையுடனும் பிரித்து அடையாளம் காண அனுமதிக்கும் ஒரு நுட்பத்தை உருவாக்குவதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளது. அத்தகைய AA கலவைகளின் பகுப்பாய்வு தந்துகி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (CZE) மற்றும் மைக்கேலர் எலக்ட்ரோகினெடிக் குரோமடோகிராபி ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்படுகிறது. .

A) தாங்கல்: 60 mM சோடியம் போரேட், pH 11.0. மின்னழுத்தம்: 20 கி.வி. தற்போதைய: 93 μA. வெப்பநிலை: பின்னணி மின் மாதிரியின் உகந்த கலவையின் 21.0 °C ஊசி நேரம்: 7.0 வி (எலக்ட்ரோகினெடிக், மாதிரி உட்செலுத்தலின் போது மின்னழுத்தம் - 5 kV). பூதம் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டது. இந்த நோக்கத்திற்காக, AA இன் அளவு சோதிக்கப்பட்டது - 0.1 ng; அலனைன், டைரோசின் - 0.2 ng.

4 - புரோலின்; 5 - அலனைன்; 6 - டைரோசின்; 7 - செரின்; - அஸ்பார்டிக் அமிலம்; 9 - மெத்தியோனைன்.

CAPS இடையக அமைப்புகள் மற்றும் அவற்றின் பல்வேறு சேர்க்கைகள் 8 AA மாதிரி கலவையின் உதாரணத்தைப் பயன்படுத்தி வெவ்வேறு இயல்புகள் மற்றும் பண்புகள் மற்றும் அமினோ குழுவின் மிகவும் வேறுபட்ட pKa மதிப்புகள் கொண்ட தீவிரவாதிகள். ஒரு போரேட் துணை எலக்ட்ரோலைட்டைப் பயன்படுத்தி அத்தகைய கலவையைப் பிரிப்பதற்கான எடுத்துக்காட்டு படம் 1 இல் காட்டப்பட்டுள்ளது.

இந்த முறையின் மூலம் இலவச AA ஐ பிரிப்பதற்கான உகந்த பின்னணி எலக்ட்ரோலைட் 60 mM போரேட் பஃபர் (pH 11.0) கொண்ட ஒரு தீர்வு ஆகும்.

அதைப் பயன்படுத்தி, பல்வேறு காரணிகளின் செல்வாக்கு (மின்னழுத்தம், மின்னோட்டம், உள் விட்டம் மற்றும் தந்துகியின் பயனுள்ள நீளம், மாதிரி அறிமுகம் முறை) பிரிப்பு செயல்திறனில் ஆய்வு செய்யப்பட்டது மற்றும் சோதனை நிலைமைகளின் கீழ் கலவையை முழுமையாக பிரிக்க முடியாது என்று காட்டப்பட்டது. அனைத்து குறியிடப்பட்ட AAக்கள். இடம்பெயர்வு நேரத்தின் வேறுபாடு 1 நிமிடத்திற்கு மேல் இருக்கும் ஏசிகள் ஏற்றுக்கொள்ளத்தக்க வகையில் பிரிக்கப்படுகின்றன என்பது பரிசோதனையில் இருந்து பின்வருமாறு. இந்த காரணத்திற்காக, கிளாசிக்கல் CZE முறையானது கிளைசின், அலனைன், வாலின், லியூசின், ஐசோலூசின், ஹிஸ்டைடின், ஃபெனிலாலனைன் மற்றும் டைரோசின், அத்துடன் அஸ்பார்டிக், குளுட்டமிக் அமிலங்கள் மற்றும் சிஸ்டைன் ஆகியவற்றின் இணை இருப்பை பிரித்து அடையாளம் காண முடியாது. அவற்றுக்கான தேர்ந்தெடுக்கும் குணகம் மிகக் குறைவு மற்றும் 1. அர்ஜினைன், லைசின், புரோலின், செரின், அஸ்பார்டிக் அமிலம் மற்றும் மெத்தியோனைன் ஆகியவை எளிதில் தனிமைப்படுத்தப்பட்டு அடையாளம் காணப்படுகின்றன, அதாவது. 5.5-10.0, 15 மற்றும் 19.5-20.8 நிமிடங்கள் இடம்பெயர்வு நேரம் கொண்ட AKகள். AK களின் இந்த குழுவிற்கான தேர்வு குணகம் 1.1 - 1.3 வரம்பில் உள்ளது. எலக்ட்ரோலைட்டை (pH 11.4) ஆதரிக்கும் பாஸ்பேட்டைப் பயன்படுத்தும் போது, ​​இதேபோன்ற ஒட்டுமொத்த பிரிப்பு முறை காணப்பட்டது, ஆனால் மோசமான உச்ச தெளிவுத்திறனுடன். நிகழ்த்தப்பட்ட ஆய்வுகள், ரிஃப்ராக்டோமெட்ரிக் முடிவுடன் கூடிய கிளாசிக்கல் CZE ஆனது, ஒரு அக்வஸ் கரைசலில் 8 AA க்கு மேல் இல்லாத முழுமையான பிரிப்பு மற்றும் அடையாளம் காண அனுமதிக்கிறது. இந்த வழக்கில், அத்தகைய கலவையில் சுட்டிக்காட்டப்பட்ட பிரிக்க முடியாதவற்றிலிருந்து தனிப்பட்ட AA இன் உள்ளடக்கம் இரண்டுக்கு மேல் இருக்கக்கூடாது.

பிஎச் 7 உடன் பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டுகளில் மெத்தனால் சேர்ப்பதன் மூலம் ஏஏ பிரித்தலின் செயல்திறன் குறிப்பிடத்தக்க வகையில் மேம்படுத்தப்படுகிறது. மெத்தனால், 20 மரபணு குறியிடப்பட்ட AAகளில் 16ஐ பிரிக்க முடிந்தது (படம் 2). துரதிருஷ்டவசமாக, இந்த கலவையை முழுமையாக பிரிக்க கணிசமான நேரம் எடுக்கும்.

தந்துகி: உள் விட்டம் 75 µm, மொத்த நீளம் - 65 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் - 50 செ.மீ.

வெப்பநிலை: 28.0 oC. மாதிரி ஊசி நேரம்: 1.5 வி (வெற்றிடம்).

அடையாளம்: 1 - லைசின், 2 - அர்ஜினைன், 3 - ஹிஸ்டைடின், 4 - கிளைசின், 5 - அலனைன், 6 - வாலின், 7 - ஐசோலூசின், 8 - லியூசின், 9 - செரின், 10 - த்ரோயோனைன், 11 - மெத்தியோனைன், பைலானைன், 12 13 - குளுட்டமிக் அமிலம், 14 - புரோலின், 15 - அஸ்பார்டிக் அமிலம், 16 - டைரோசின்.

pH 7 இல் பயன்படுத்தப்பட்ட கிளாசிக்கல் CZE பிரித்தலின் தேவையான தரத்தை வழங்காததால், இலவச AAகளின் பகுப்பாய்விற்கு நேரடி UV கண்டறிதலுடன் MEKC முறையைப் பயன்படுத்த முடிவு செய்யப்பட்டது. சோடியம் டோடெசில் சல்பேட் (SDS) ஒரு சவர்க்காரமாக தாங்கல் கரைசல்களில் சேர்க்கப்பட்டது. வேலையின் போது, ​​பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டின் கூறுகளின் பல்வேறு செறிவுகள் பயன்படுத்தப்பட்டன. 133 mM போரிக் அமிலம், 33 mM சோடியம் போரேட் மற்றும் 100 mM SDS, pH 9.5 ஆகியவற்றைக் கொண்ட பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டைப் பயன்படுத்தி சிறந்த முடிவுகள் பெறப்பட்டன. குறிப்பிட்ட கலவையின் எலக்ட்ரோலைட்டின் பயன்பாடு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட AA இன் எண்ணிக்கையை கணிசமாக அதிகரித்தது, அதே நேரத்தில் முக்கிய பகுதியில் உள்ள பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டின் pH மதிப்புகளில் அவற்றை தீர்மானிக்கிறது. படத்தில். படம் 3 14 AA கலவையின் எலக்ட்ரோபெரோகிராம் காட்டுகிறது.

அரிசி. 3. 14 இலவச ஏஏக்களின் கலவையை மைக்கேலர் எலக்ட்ரோகினெடிக் குரோமடோகிராபி மூலம் நேரடி UV கண்டறிதல் தந்துகி மூலம் பிரித்தல்: உள் விட்டம் 50 μm, மொத்த நீளம் 122 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் 35 செ.மீ. இடையக:

133 mM போரிக் அமிலம், 33 mM சோடியம் டெட்ராபோரேட் (pH 9.5) 100 mM சோடியம் டோடெசில் சல்பேட். மின்னழுத்தம்: 20 கி.வி. தற்போதைய: 48 μA. வெப்பநிலை: 27.5 oC. மாதிரி ஊசி நேரம்: 3.0 வி (வெற்றிடம்).

AA இன் நிர்வகிக்கப்பட்ட அளவுகள் 5.0 ng. அலனைன், வாலின், ஐசோலூசின் மற்றும் கிளைசின் - 7.0 ng.

அடையாளம்: 1 - வேலின், 2 - அலனைன், 3 - ஐசோலூசின், 4 - கிளைசின், 5 - செரின், 6 - த்ரோயோனைன், 7 - டைரோசின், 8 - ஹிஸ்டைடின், 9 - ஃபெனிலாலனைன், 10 - அர்ஜினைன், 11 - லைசின், 12 - சிஸ்டைன் 13 - மெத்தியோனைன், 14 - குளுடாமிக் அமிலம். * - கணினி உச்சநிலைகள்.

இடம்பெயர்வு நேரங்களின் பெறப்பட்ட மதிப்புகள் குறிப்பிடத்தக்கவை.

சிறிய பயனுள்ள தந்துகி நீளம் இருந்தபோதிலும், அவை ஒரு விதியாக, கிளாசிக்கல் CZE ஐ விட அதிகமாக உள்ளன, இது MEKC இன் தன்மையுடன் மிகவும் நல்ல உடன்பாட்டில் உள்ளது. இது தந்துகியின் ஒரு யூனிட் நீளத்திற்கு பயன்படுத்தப்படும் மின்னழுத்தத்தின் அளவுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம். AC பிரிப்பிற்கு தேவையான இடம்பெயர்வு நேரத்தின் வேறுபாடு CZE இன் விஷயத்தை விட கணிசமாக குறைவாக உள்ளது. இது 0.5 நிமிடங்கள் இருந்தால் போதும்.

பொதுவாக ஆரோக்கியமான நன்கொடையாளர்களின் இரத்த பிளாஸ்மாவில் இலவச நிலையில் இருக்கும் 14 மரபணு குறியிடப்பட்ட AA களைப் பிரிப்பதற்கான நிபந்தனைகள் குறித்து மேலும் விரிவான ஆய்வு மேற்கொள்ளப்பட்டது. pH இன் விளைவு மற்றும் பல்வேறு கரிம கரைப்பான்களின் பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டில் உச்ச தீர்மானத்தின் அளவு ஆய்வு செய்யப்பட்டது. 14 AA கலவையை முழுமையாகப் பிரிப்பதற்கு, pH மதிப்பு 9.0-10.0 வரம்பில் இருக்க வேண்டும் என்று பரிசோதனையில் இருந்து அது பின்வருமாறு. குறிப்பிட்ட வரம்பிற்கு வெளியே உள்ள pH மதிப்புகளில், AK இன் தேவையான தீர்மானம் வழங்கப்படவில்லை. வெளிப்படையாக, pH 9 இல் இது pKa (AA) மதிப்புகளுக்கு இடையிலான வேறுபாடு காரணமாகும், மேலும் pH 10 இல் இது DDSNAC இணைப்புகளின் பகுதி சிதைவின் காரணமாகும். கரிம கரைப்பான் சேர்த்தலின் விளைவு மெத்தனால், 2-புரோபனால் மற்றும் அசிட்டோனிட்ரைலைப் பயன்படுத்தி ஆய்வு செய்யப்பட்டது. பெறப்பட்ட தரவு, கரிம கரைப்பான்களில் ஏதேனும் சேர்ப்பது இடம்பெயர்வு நேரங்கள் மற்றும் தேர்ந்தெடுக்கும் குணகங்களில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றத்திற்கு வழிவகுக்கிறது என்பதைக் காட்டுகிறது. மாற்றத்தின் தன்மையானது சேர்க்கையின் தன்மை மற்றும் செறிவு ஆகியவற்றால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. மெத்தனால் மற்றும் அசிட்டோனிட்ரைல் ஆய்வு செய்யப்பட்ட AA பிரிவை மேம்படுத்தாது, இது கலப்பு AA-SDS-R இணைப்புகளை உருவாக்கும் திறன் குறைவாக இருப்பதால், R ஒரு கரிம கரைப்பான் மூலக்கூறு ஆகும். 3-5% 2-புரோபனோல் சேர்ப்பது கூறுகளின் தீர்மானத்தின் அளவை கணிசமாக மேம்படுத்துகிறது, AA இன் இடம்பெயர்வு நேரத்தில் ஒப்பீட்டளவில் சிறிய அதிகரிப்பு. 2-புரோபனோலின் செறிவு அதிகரிப்புடன், AA இன் இடம்பெயர்வு நேரத்தில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு காணப்படுகிறது, இது உறுதிப்பாட்டின் வேகம் குறைவதற்கு வழிவகுக்கிறது. சிறப்பாக நடத்தப்பட்ட ஆய்வுகள், பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டில் 50 mM போரிக் அமிலம், 33 mM சோடியம் போரேட் மற்றும் 50 mM SDS ஆகியவை இருந்தால், ஒரு கரிம கரைப்பான் (2-புரோபனோல்) ஒரு பயனுள்ள அளவு முன்னிலையில் AA இன் சிறந்த பிரிப்பு ஏற்படுகிறது. படத்தில். படம் 4 14 AA கலவையின் எலக்ட்ரோபெரோகிராம் காட்டுகிறது.

வழங்கப்பட்ட தரவு 14 மரபணு குறியிடப்பட்ட AA களில் 13 இன் பயனுள்ள பிரிப்பைக் குறிக்கிறது. மொத்த பிரிப்பு நேரம் நிமிடத்திற்கு மேல் இல்லை. இடம்பெயர்வு நேரம் Sr 0.03 ஆகும். அலனைன், வாலைன் மற்றும் ஹிஸ்டைடின் ஆகியவற்றிற்கு சற்று பெரிய Sr மதிப்புகள், 0.06-0.08க்கு அருகில் காணப்படுகின்றன.

அரிசி. 4. நேரடி UV கண்டறிதல் தந்துகி கொண்ட MEKC மூலம் 14 AA கலவையைப் பிரித்தல்: உள் விட்டம் 75 μm, மொத்த நீளம் 61 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் 41 செ.மீ.

தாங்கல்: 33 mM சோடியம் டெட்ராபோரேட், 100 mM போரிக் அமிலம், 50 mM SDS, 5% 2-புரோபனோல், pH=10.2. மின்னழுத்தம்: 25 கி.வி. தற்போதைய: 65 μA. வெப்பநிலை: 29.5 oC. மாதிரி ஊசி நேரம்: 1.5 வி (வெற்றிடம்). AA இன் நிர்வகிக்கப்பட்ட அளவுகள் 0.5 ng.

அடையாளம்: 1 -லைசின்; 2 - புரோலின்; 3 - ஃபெனிலாலனைன்; 4 - அலனைன்; 5 - வாலைன்; 6 - கிளைசின்;

7 - ஹிஸ்டைடின்; 8 - டைரோசின்; 9 - லியூசின் + ஐசோலூசின்; 10 - செரின்; 11 - த்ரோயோனைன்; 12 - குளுட்டமிக் அமிலம்; 13 - சிஸ்டைன்.

அடையப்பட்ட தீர்மானம், கருதப்பட்ட AAகளின் அளவு நிர்ணயம் பற்றிய ஆய்வுகளை நடத்துவதை சாத்தியமாக்கியது. அறியப்பட்ட கலவையின் 14 AA மாதிரி கலவையின் பகுப்பாய்வு மேற்கொள்ளப்பட்டது. 3-5% 2-புரோபனோல் கொண்ட போரேட் பஃபர் கரைசலைப் பயன்படுத்தி நேரடி UV கண்டறிதலுடன் கூடிய MEKC முறையானது 14-16 மரபணு குறியிடப்பட்ட AAகளை 6-8% பிழையுடன் (Sr) 30 க்கும் குறைவாக அளவிடுவதை சாத்தியமாக்குகிறது என்று ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன. நிமிடங்கள். பெறப்பட்ட முடிவுகளின் துல்லியம் கூடுதலாக "உள்ளிட்ட-கண்டுபிடிக்கப்பட்ட" முறையைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்பட்டது (அட்டவணை 1). MEKC முறை (mo(AA) = 0.50 ng; உள்ளிட்டது - 1.00 ng) பிளாஸ்மா இரத்தத்தில் உள்ள ஹோமோசைஸ்டீன் மற்றும் பிற குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்களின் பகுப்பாய்வு ஹோமோசைஸ்டீன் (Hcy) மற்றும் அதனுடன் இணைந்த அமினோதியால்கள் (AT) (குறியீடு செய்யப்பட்ட அமினோ அமிலம் - சிஸ்டைன் (Cys), டிரிபெப்டைட் குளுதாதயோன் (GSH) இரத்த பிளாஸ்மா என்பது இருதய அமைப்பின் செயலிழப்புக்கான மூலக்கூறு குறிப்பான்கள் ஆகும். இத்தகைய நோய்களுக்கான நம்பகமான ஆபத்து காரணியாக ஹோமோசைஸ்டீன் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிப்பதற்கான ஒரு முறையை உருவாக்குவதே இந்த ஆய்வின் முக்கிய குறிக்கோள்.

இரத்த பிளாஸ்மாவில் உள்ள குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்களின் அளவு பகுப்பாய்வு, டைசல்பைட் பிணைப்புகளைக் குறைத்தல், இரத்த பிளாஸ்மாவின் புரோட்டீனைசேஷன், பொருத்தமான எதிர்வினைகளுடன் அமினோதியால்களை மாற்றியமைத்தல், RP HPLC அல்லது CE மூலம் மாற்றியமைக்கப்பட்ட அமினோதியால்களைப் பிரித்தல் மற்றும் அடையாளம் காணுதல் ஆகியவை அடங்கும். இந்த வேலையில், ஆக்ஸிஜனேற்றப்பட்ட மற்றும் புரதத்துடன் பிணைக்கப்பட்ட அமினோதியால்கள் டிரிபெனில்பாஸ்பைனுடன் குறைக்கப்பட்டன. கன உலோக கேஷன்களை அகற்ற, ஒரு EDTA சேர்க்கை பயன்படுத்தப்பட்டது. முன்மொழியப்பட்ட குறைப்பு நுட்பம் விரைவான (15 நிமிடம்) மற்றும் முழுமையான குறைப்பு (96%) டிஸல்பைடுகளை வழங்கியது மற்றும் அறை வெப்பநிலையில் சல்பைட்ரைல் குழுக்களின் வெளியீடு. இலவச AT இன் உள்ளடக்கத்தை அளவிடுவதற்கான நிலையான செயல்முறையைப் பயன்படுத்தி குறைப்பு எதிர்வினைகளின் விளைச்சல் தீர்மானிக்கப்பட்டது. உயர் மூலக்கூறு எடை பிளாஸ்மா புரதங்கள் 5-சல்போசாலிசிலிக் அமிலத்துடன் துரிதப்படுத்தப்பட்டன.

ஆய்வின் போது அதன் செறிவு உகந்ததாக இருந்தது, இது நடுநிலைப்படுத்தல் கட்டத்தில் நீர்த்துப்போகுவதால் உணர்திறன் இழப்பைத் தவிர்க்கிறது.

இலவச சல்பைட்ரைல்களின் மாற்றம் மோனோபிரோமோபிமேன் (எம்பிஆர்பி) அல்லது 5-அயோடோஅசெட்டமிடோ-ஃப்ளோரெசெசின் (5-ஐஏஎஃப்) மூலம் மேற்கொள்ளப்பட்டது. AT மாற்றத்திற்குப் பயன்படுத்தப்படும் மறுஉருவாக்கத்தைப் பொறுத்து, தேவையான pH மதிப்பு டைத்தனோலமைன் (pK a = 8.9) மற்றும் சோடியம் ஆர்த்தோபாஸ்பேட் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி பராமரிக்கப்பட்டது. டயத்தனோலமைனின் பயன்பாடு மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி மூலம் இலக்கு தயாரிப்புகளின் உருவாக்கத்தை நேரடியாகக் கட்டுப்படுத்த முடிந்தது. AT வழித்தோன்றல்களை அடையாளம் காண, ஃபோட்டோமெட்ரிக் மற்றும் ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதல் முறைகள் பயன்படுத்தப்பட்டன. வழித்தோன்றல்கள் உறிஞ்சுதல், புளோரிமெட்ரிக் மற்றும் நிறை (MALDI-TOF, ESI) ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி மூலம் வகைப்படுத்தப்பட்டன. உறிஞ்சும் நிறமாலை (Hcy-MB - 234 nm) மற்றும் Hcy டெரிவேடிவ்களின் ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்பெக்ட்ரா (390 nm (உற்சாகம்) மற்றும் 478 nm (ஃப்ளோரசன்ஸ்) ஆகியவற்றின் படி தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அலைநீளங்களில் ஃபோட்டோமெட்ரிக் மற்றும் ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதல் மேற்கொள்ளப்பட்டது. Hcy-AF இன் ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்பெக்ட்ரமில் இருந்து, ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலின் போது, ​​தூண்டுதலுக்கான உகந்த அலைநீளம் 462 nm, மற்றும் ஃப்ளோரசன்ஸுக்கு, 504 nm.

monobimane மற்றும் fluorescein வழித்தோன்றல்கள் இரண்டையும் அடையாளம் காண ஒரே டிடெக்டரைப் பயன்படுத்துவதற்கான அடிப்படை சாத்தியத்தை தீர்மானிப்பதற்கும் சரிபார்க்கவும் முறைகளை ஒருங்கிணைக்க, 390 nm அலைநீளத்தில் தூண்டுதலின் திறன் ஆய்வு செய்யப்பட்டது. இதன் விளைவாக ஃப்ளோரசன்ஸின் தீவிரம் அதிகபட்சம், மற்றும் அதன் விளைவாக, கண்டறிதல் உணர்திறன் என்பது 462 nm அலைநீளத்தில் கதிர்வீச்சைப் பயன்படுத்துவதைக் காட்டிலும் குறைவான அளவின் வரிசையாகும்.

தனிப்பட்ட மோனோபிரோமோபிமேன் (எம்பி) மற்றும் அசெட்டமிடோபுளோரெசின் (ஏஎஃப்) ஏடி டெரிவேடிவ்கள் மற்றும் அவற்றின் மாதிரி கலவைகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. தனிப்பட்ட monobromobimane வழித்தோன்றல்கள் Cys, Hcy மற்றும் GSH ஆகியவை முறையே 6.01 ±0.19, 10.76 ±0.17 மற்றும் 11.89 ±0.11 (படம். 5)1 ஆகியவற்றின் தக்கவைப்பு நேரங்களுடன் (நிமிடம்) நீக்கப்பட்டது.

அறியப்பட்ட கலவையின் அமினோதியால்களின் கலவைகளைப் பயன்படுத்தும் போது அதே தக்கவைப்பு நேரம் பராமரிக்கப்படுகிறது. பெறப்பட்ட சோதனை தரவு மாற்றியமைக்கும் எதிர்வினையின் விளைச்சலைக் கணக்கிடுவதை சாத்தியமாக்கியது. இது 97% க்கும் குறைவாக இல்லை, இது அறியப்பட்ட தரவுகளுடன் நல்ல உடன்பாட்டில் உள்ளது, ஆனால் மிகவும் கடுமையான மாதிரி தயாரிப்பு நிலைமைகளின் கீழ் பெறப்பட்டது. இதன் விளைவாக வரும் வழித்தோன்றல்கள் கலவையிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டு மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரியால் வகைப்படுத்தப்பட்டன.

Fluorescein derivatives Cys, Hcy மற்றும் GSH ஆகியவை 8.49 ± 0.12 தக்கவைப்பு நேரங்களுடன் (நிமிடம்) நீக்கப்பட்டன; முறையே 10.46 ± 0.15 மற்றும் 12.96 ± 0.14 (படம் 6).

குரோமடோகிராஃபிக் பகுப்பாய்வு உள்நாட்டு உயர் செயல்திறன் திரவ குரோமடோகிராஃப் "மிலிக்ரோம் ஏ-02" (எகோநோவா, நோவோசிபிர்ஸ்க்) படம். 5. மோனோபிரோமோபிமானுடன் மாற்றியமைக்கப்பட்ட அமினோதியால்களின் மாதிரி கலவையின் RP HPLC. Cys-MB-50.0 µM, Hcy-MB-25.0 µM, GS-MB-25.0 µM.

ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதல் (exc = 390 nm, exp = 478 nm) படம். 6. 5-iodoacetamidofluorescein உடன் மாற்றியமைக்கப்பட்ட அமினோதியால்களின் மாதிரி கலவையின் RP HPLC. Cys-AF-100.0 µM, Hcy-AF-150.0 µM, GS-AFµM. ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதல் (abs = 390 nm, esp = 478 nm) 5-IAF ஐ லேபிளாகப் பயன்படுத்தும் போது, ​​thiol-monobimane இணைப்புகளுடன் ஒப்பிடும்போது thiol-fluorescent conjugates சிகரங்களின் சிறந்த தெளிவுத்திறன் அடையப்படுகிறது. ஃப்ளோரசன்ட் லேபிள் உச்சத்தின் தீவிரத்தை குறைப்பதன் மூலம் சோதனை ரீதியாக தீர்மானிக்கப்பட்ட AT மாற்றியமைத்தல் எதிர்வினை 5-IAF இன் விளைச்சல் 95% ஆகும். இதன் விளைவாக வரும் அனைத்து வழித்தோன்றல்களும் கலவையிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டு மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரியால் வகைப்படுத்தப்பட்டன.

பெறப்பட்ட தரவு ஹோமோசைஸ்டீனின் அளவு நிர்ணயத்திற்கான ஒரு முறையின் வளர்ச்சிக்கு அடிப்படையாக செயல்பட்டது. அளவுத்திருத்த வளைவை உருவாக்க, அதன் உள்ளடக்கம் 2.5 முதல் 100 μM வரையிலான கலவைகளின் மாதிரிகள் பயன்படுத்தப்பட்டன. தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட இடைவெளியில் Hcy (5-50 μM) உடலியல் செறிவுகளின் வரம்பு அடங்கும். mBrB ஒரு லேபிளாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. கலவையில் உள்ள ஹோமோசைஸ்டீன் உள்ளடக்கத்தின் குரோமடோகிராஃபிக் உச்சப் பகுதியின் விளைவான அளவுத்திருத்த சார்பு ஆய்வு செய்யப்பட்ட செறிவு வரம்பு முழுவதும் நேரியல் மற்றும் சமன்பாட்டால் விவரிக்கப்படுகிறது:

உச்சப் பகுதியின் முடிவுகளின் ஒப்பீட்டு நிலையான விலகல் 0.083 ஐ விட அதிகமாக இல்லை, மற்றும் மீட்பு நேரம் - 0.026. MB வழித்தோன்றல்களின் ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலின் கண்டறிதல் வரம்பு 1 μM (படம் 7) ஆகும்.

அரிசி. 7. Hcy இன் செறிவைப் பொறுத்து குரோமடோகிராஃபிக் உச்சத்தின் பரப்பளவை மாற்றுதல். தனிப்பட்ட பொருட்களுக்காகப் பெறப்பட்ட குரோமடோகிராம்கள் மற்றும் முன்மொழியப்பட்ட முறையைப் பயன்படுத்தி தயாரிக்கப்பட்ட இரத்த பிளாஸ்மா மாதிரிகளை ஒப்பிடுவதன் மூலம் முறையின் செயல்திறன் உறுதிப்படுத்தப்படுகிறது. நிகழ்த்தப்பட்ட ஆய்வுகள் இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீன், சிஸ்டைன் மற்றும் குளுதாதயோன் ஆகியவற்றின் அளவை நிர்ணயிப்பதற்கான ஒரு முறையை உருவாக்குவதை சாத்தியமாக்கியது மற்றும் மேற்கூறிய ஆன்டிபாடிகளை அவற்றின் எம்பி வழித்தோன்றல்களின் வடிவத்தில் வழக்கமான பகுப்பாய்வுக்கு வெற்றிகரமாகப் பயன்படுத்துகிறது (படம் 8) . முறையை உருவாக்கும் போது, ​​"உள்ளீடு-கண்டுபிடிக்கப்பட்ட" முறையைப் பயன்படுத்தி கூடுதல் கட்டுப்பாடு மேற்கொள்ளப்பட்டது (அட்டவணை 2).

அரிசி. 8. ஆரோக்கியமான நன்கொடையாளரிடமிருந்து இரத்த பிளாஸ்மாவின் RP HPLC. Cys-MB-192.4 µM, HcyMB-10.1 µM, GS-MB-15.7 µM. ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதல் மைக்ரோகாலம் HPLC ஐப் பயன்படுத்தி MB வழித்தோன்றல்கள் வடிவில் Hcy ஐ நிர்ணயித்தல், வளர்ந்த முறையைப் பயன்படுத்தி, ஆரோக்கியமான நோயாளிகள் மற்றும் பல்வேறு தீவிரத்தன்மை கொண்ட இருதய நோய்களால் பாதிக்கப்பட்டவர்களிடமிருந்து 50 க்கும் மேற்பட்ட இரத்த பிளாஸ்மா மாதிரிகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. ஆரோக்கியமான நோயாளிகளுக்கு, காலையில் வெறும் வயிற்றில் நரம்பிலிருந்து பெறப்பட்ட இரத்த பிளாஸ்மாவில் AT இன் சராசரி உள்ளடக்கம் (μM):

Hcy 12.75 ±3.21, GSH 9.53 ±1.17 மற்றும் Cys 206.34 ±24.61. பெறப்பட்ட செறிவு மதிப்புகள் இலக்கியத்தில் கொடுக்கப்பட்ட குறிப்பு மதிப்புகளின் வரம்பிற்குள் அடங்கும். இருதய நோய்களால் பாதிக்கப்பட்ட நோயாளிகளுக்கு, இரத்த பிளாஸ்மாவில் காணப்படும் Hcy இன் செறிவு நோயின் தீவிரத்தைப் பொறுத்தது. முடிவுகள் நோயாளிகளின் மருத்துவ நிலையுடன் தொடர்புடையது.

ஃபோட்டோமெட்ரிக் போன்ற மலிவான மற்றும் மிகவும் பொதுவான கண்டறிதல் முறையைப் பயன்படுத்தி AT ஐ பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான சாத்தியக்கூறு ஆராயப்பட்டது. இரத்த பிளாஸ்மாவில் நோயியல் ரீதியாக அதிக அளவு AT ஐ தீர்மானிக்க அனுமதிக்கும் உணர்திறனை இது வழங்குகிறது என்று சோதனை காட்டுகிறது. ஃபோட்டோமெட்ரிக் கண்டறிதலைப் பயன்படுத்தும் போது, ​​5-IAF ஐ லேபிளாகப் பயன்படுத்துவது விரும்பத்தக்கது, ஏனெனில் இது உச்சநிலையை அடிப்படைக்கு (படம் 9) தீர்க்கிறது, இது அளவை அனுமதிக்கிறது.

அரிசி. 9. மோனோபிரோமோபிமேன் (a) மற்றும் 5-iodoacetamidofluorescein (b) உடன் மாற்றியமைக்கப்பட்ட அமினோதியால்களின் மாதிரி கலவைகளின் RP HPLC. A) Cys-MB-50.0 µM, HcyMB-25.0 µM, GS-MB-25.0 µM. B) Cys-AF-50.0 µM, Hcy-AF-75.0 µM, GS-AF- 25.0 µM. ஃபோட்டோமெட்ரிக் கண்டறிதல் (a = 234 nm, b = 250 மற்றும் 300 nm) எனவே, பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட கூறுகளின் உத்தரவாதமான அளவு விளைச்சலுடன் "லேசான நிலைமைகளில்" அதைச் செயல்படுத்தும் பணியானது மாதிரி தயாரிப்பு நிலையை மேம்படுத்துவதை சாத்தியமாக்கியது. அதன் அடிப்படையில், ஆரோக்கியமான மற்றும் நோய்வாய்ப்பட்ட நோயாளிகளின் இரத்த பிளாஸ்மாவில் குறைந்த மூலக்கூறு-எடை ஆன்டிபாடிகளின் உள்ளடக்கத்தை விரைவாகவும் நம்பகத்தன்மையுடனும் தீர்மானிக்க அனுமதிக்கும் ஒரு முறை உருவாக்கப்பட்டுள்ளது. அளவீட்டு பிழை 8.5% ஐ விட அதிகமாக இல்லை. அளவிடப்பட்ட செறிவுகளின் வரம்பின் குறைந்த வரம்பு (2.5 μM) இரத்த பிளாஸ்மாவில் Hcy இன் குறைக்கப்பட்ட உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிக்க இந்த நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துவதற்கான அடிப்படை சாத்தியத்தை குறிக்கிறது. விவரிக்கப்பட்ட முறையின் கண்டறிதல் வரம்பு 1 µM ஆகும். நோயாளியின் இரத்த பிளாஸ்மாவின் உண்மையான மாதிரிகளில் உருவாக்கப்பட்ட முறை சோதிக்கப்பட்டது மற்றும் வழக்கமான பயன்பாட்டிற்கு பயன்படுத்தப்படலாம்.

பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீன் மற்றும் பிற குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்களை தீர்மானித்தல் படம். 10. AT மாதிரி கலவையின் CZE, இடம்பெயர்வு நேரம் 6.18 ± 0.16; சிஸ்டைன் மாற்றியமைக்கப்பட்ட mBrB Hcy-MB-700.0 µM, Cys-MB-300.0 µM 6.83 ± 0.20 மற்றும் குளுதாதயோன் - 8.54 ± 0.17 நிமிடம், முறையே (படம் 10). GS-MB- 700.0 µM உடன் ஒப்பிடும்போது. (உறிஞ்சுதல் = 234 nm).

நுண்குழாய்கள்: உள் விட்டம் 50 µm, முழு HPLC CZE முறை பயன்படுத்தப்பட்டது, நீளம் 82 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் 62 செ.மீ.

தாங்கல்: 50 mM சோடியம் டெட்ராபோரேட் pH=11.0. AT பகுப்பாய்வு நேரத்தை 2-3 நிமிடங்கள் குறைக்கவும்.

மின்னழுத்தம்: 25 கி.வி. தற்போதைய: 58 µA.

(வெற்றிடம்) நேரடி UV கண்டறிதல் இரத்த பிளாஸ்மாவில் சிறிய அளவு Hcy ஐ தீர்மானிக்க போதுமானதாக இல்லை. 10 µM இன் ஹோமோசைஸ்டன் உள்ளடக்கத்தில், சிக்னல்/பின்னணி விகிதம் 2.5-3 மற்றும் தொடர்புடைய நிலையான விலகல் 0.3-0.5 வரம்பில் உள்ளது. நோயியல் ரீதியாக அதிக அளவு (25 µM) உள்ள நோயாளிகளின் இரத்த பிளாஸ்மாவில் Hcy இன் உள்ளடக்கத்தைக் கட்டுப்படுத்த இந்த முறை பொருந்தும். இந்த செறிவுகளை நிர்ணயிக்கும் போது தொடர்புடைய நிலையான விலகல் MB-Cys க்கு 0.12, MB-Hcy க்கு 0.18 மற்றும் MB-GS க்கு 0.17 ஆகும்.

ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் கூடிய தந்துகி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் ஒரு தந்துகி அயன் பகுப்பாய்வி "நானோஃபோர் 02" (INP RAS, செயின்ட் பீட்டர்ஸ்பர்க்) இல் Hcy இன் பகுப்பாய்வு MV வழித்தோன்றல்கள் வடிவில் RP HPLC ஐப் பயன்படுத்தி புளோரிமெட்ரிக் மற்றும் CZE உடன் ஃபோட்டோமெட்ரிக் கண்டறிதல் (n = 5 கண்டறிதல்; P = 0.95 ) AF வழித்தோன்றல்களின் மாதிரி கலவைகள் CZE முறையின் மூலம் நேரடி ஃபோட்டோமெட்ரிக் (படம் 11) மற்றும் ஃப்ளோரிமெட்ரிக் (படம் 12) கண்டறிதல் (அட்டவணை 3) மூலம் ஆய்வு செய்யப்பட்டது. ஃபோட்டோமெட்ரிக் கண்டறிதல் 492 nm அலைநீளத்தில் செய்யப்பட்டது, இது 5-IAF இன் தூண்டுதல் அலைநீளத்திற்கு ஒத்திருக்கிறது. புளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுக்கு, தூண்டுதல் அலைநீளம் 473 nm ஆகவும், உமிழ்வு அலைநீளம் 514 nm ஆகவும் இருந்தது. 5-ஐஏபியின் பயன்பாடு, ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் CZE முறையால் Hcy நிர்ணயத்தின் உணர்திறனை அதிகரிப்பதை சாத்தியமாக்குகிறது என்று நிறுவப்பட்டுள்ளது.

உறிஞ்சுதல், 492 nm படம். படம் 11. AT இன் மாதிரி கலவையின் CZE, mo- படம். 12. 5-iodoacetamido-மாற்றியமைக்கப்பட்ட 5-iodoacetamidofluorescein உடன் ஃப்ளோரிமெட்ரிக் Hcy-AF-100.0 µM, Cys-AF-300.0 µM-AF-300.0 µF-1, GS-AF-5 µM, Cys-AF-15.0 µM, GS-AFµM. (abs = 473 nm, exp = 514 nm) 700.0 µM. (உறிஞ்சும் = 492 nm).

தந்துகி: உள் விட்டம் 50 µm, மொத்த தந்துகி: உள் விட்டம் 50 µm, மொத்த நீளம் 68 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் 53 செ.மீ. நீளம் 65 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் 57 செ.மீ.

தாங்கல்: 25 mM சோடியம் டெட்ராபோரேட், 25 mM பாஸ்பேட் தாங்கல்: 25 mM சோடியம் டெட்ராபோரேட், 25 mM சோடியம் பாஸ்பேட் pH = 11.2. மின்னழுத்தம்: 20 கி.வி. தற்போதைய வலிமை: சோடியம் pH = 11.2. மின்னழுத்தம்: 20 கி.வி. தற்போதைய வலிமை:

22 μA. வெப்பநிலை: 25.0 oC. உள்ளீடு நேரம் 18 µA ஆகும். வெப்பநிலை: 25.0 oC. மாதிரி ஊசி நேரம்: 5 வி (எலக்ட்ரோகினெடிக், மின்னழுத்தம்: 5 வி (எலக்ட்ரோகினெடிக், மின்னழுத்தம் மணிக்கு) RP HPLC மற்றும் கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பயன்படுத்தி இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீன் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிக்க உருவாக்கப்பட்ட முறைகள் JSC ஆல் பயோமெடிக்கல் பகுப்பாய்வு நடைமுறையில் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டுள்ளன. மெடிக்கல் டெக்னாலஜிஸ், லிமிடெட்.

கேபிலரி ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பயன்படுத்துதல், உடலியல் திரவங்களில் மூலக்கூறு குறிப்பான்களின் உள்ளடக்கத்தில் ஏற்படும் மாற்றங்கள் ஒரு குறிப்பிட்ட நோய்க்கான நோயாளியின் மரபணு முன்கணிப்பு காரணமாகவும் இருக்கலாம். எனவே ஆய்வின் கீழ் நோய்க்கான காரணத்தை தீர்மானிப்பதற்கான நம்பகத்தன்மையை அதிகரிப்பதற்கும் அதன் சிகிச்சையை மிகவும் பயனுள்ளதாக்குவதற்கும் டிஎன்ஏ துண்டுகளின் ஒப்பீட்டு பகுப்பாய்வு நடத்த வேண்டிய அவசியம் உள்ளது.

இந்த வேலையில், அலீல்-குறிப்பிட்ட PCR ஐப் பயன்படுத்தி, சிரை இரத்த உறைவுக்கான பிறழ்ந்த மரபணுவின் துண்டுகளின் உதாரணத்தைப் பயன்படுத்தி, DNA மூலக்கூறுகளில் உள்ள பிறழ்வுகளைத் தீர்மானிக்க, கிடைக்கக்கூடிய உள்நாட்டு CE உபகரணங்களைப் பயன்படுத்துவதற்கான சாத்தியக்கூறுகளை நாங்கள் ஆராய்ந்தோம். 25 முதல் 100 மைக்ரான் விட்டம் கொண்ட மாற்றப்படாத குவார்ட்ஸ் கண்ணாடி நுண்குழாய்களைப் பயன்படுத்தி நியூக்ளியோடைடுகள் கேபிலரி ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (சிஜிஇ) மூலம் பிரிக்கப்பட்டன. உள்நாட்டு உற்பத்தியின் லீனியர் பாலி-என்,என்-டைமெதிலாக்ரிலாமைடு (pDMA) பிரிப்பு மேட்ரிக்ஸாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. இந்த பாலிமரின் தேர்வு CGE இன் சிப் பதிப்பில் அதன் பயன்பாட்டின் சாத்தியத்துடன் தொடர்புடையது. தீவிர பாலிமரைசேஷன் மூலம் டைமெதிலாக்ரிலாமைடு மோனோமரில் இருந்து சின்தோல் ஜேஎஸ்சியில் pDMA ஒருங்கிணைக்கப்பட்டது. சங்கிலி நீளம் வெப்பநிலையை மாற்றுவதன் மூலம் அல்லது தீவிர தோட்டிகளைச் சேர்ப்பதன் மூலம் கட்டுப்படுத்தப்பட்டது. 5-8% pDMA மோனோமர் கொண்ட பாலிமர்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன. 0.1 M TBE (0.1 M TRIS, 0.1 M போரிக் அமிலம், மற்றும் 2.5 mM EDTA; pH = 8.3) மற்றும் 0.1 M TAPS (N-tris(ஹைட்ராக்ஸிமெதில்) மெத்தில்) பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டுகளாகப் பயன்படுத்தப்பட்டன. 3-அமினோபுரோபனேசல்போனிக் அமிலம்; pH = 8 ஆய்வு செய்யப்பட்ட அனைத்து பாலிமர்களும் குறைந்த அளவிலான நேட்டிவ் ஃப்ளோரசன்ஸை (0.5 AU) கொண்டிருந்தன. 0.1M TAPS ஐப் பயன்படுத்தி தயாரிக்கப்பட்ட பாலிமர்கள் தந்துகியை ஜெல் மூலம் நிரப்பாமல் 5 பிரிப்புகளை அனுமதிக்கின்றன, அதே நேரத்தில் TBE உள்ளவை 3 க்கு மேல் அனுமதிக்கப்படவில்லை. இந்த பாலிமர்கள் அவற்றுடன் தொடர்புடைய மேற்கத்திய சகாக்களுடன் ஒப்பிடக்கூடிய தெளிவுத்திறனை வழங்குகின்றன, ஆனால் அவை மலிவானவை.

5-15 நியூக்ளியோடைடுகள் நீளம் கொண்ட ஃப்ளோரசன்ட் லேபிளிடப்பட்ட பாலிநியூக்ளியோடைடுகளின் கலவை பற்றிய ஆய்வுகள். முறையே, அவை ஒவ்வொன்றிலும் 10-9 M உள்ளடக்கத்துடன், ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகளை 100 nt வரை சங்கிலி நீளத்துடன் பிரிப்பதற்கான உகந்த பாலிமர் கலவையை தீர்மானிக்க முடிந்தது. (படம் 13). இது 6% மோனோமர், 7M யூரியா மற்றும் 0.1M TAPS ஆகியவற்றைக் கொண்ட pDMA அடிப்படையிலான ஜெல் ஆகும்.

அரிசி. 13. தந்துகி நீளம் கொண்ட பாலிநியூக்ளியோடைடுகளின் கலவையைப் பிரித்தல்: உள் விட்டம் - 50 µm, மொத்த நீளம் - 45 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் - 38.5 செ.மீ. பாலிமர்: 6% pDMA மோனோமர், 0.1M TAPS, 7M யூரியா. வேலை செய்யும் எலக்ட்ரோலைட்: 0.1M TAPS. மின்னழுத்தம்:

10 கே.வி. தற்போதைய: 4.3 μA. வெப்பநிலை: 25.0 oC. மாதிரி ஊசி நேரம் 10 வினாடிகள் (எலக்ட்ரோகினெடிக், மாதிரி சேகரிப்பு மின்னழுத்தம் 10 கேவி).

பிரிப்பு நிலைகளை மேம்படுத்துதல் (மின்னழுத்தம், மின்னோட்டம், பயனுள்ள நீளம் மற்றும் தந்துகி விட்டம்) மொத்த நீளம் 100 nt க்கும் குறைவான ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகளின் அடிப்படைக்கு பிரிப்பதை சாத்தியமாக்கியது. மற்றும் 1 n.o நீளத்தில் வேறுபாடு. (படம் 14.).

அரிசி. 14. 1 பிபி நீளம் கொண்ட பாலிநியூக்ளியோடைடுகளின் கலவையைப் பிரித்தல்.

தந்துகி: உள் விட்டம் - 50 µm, மொத்த நீளம் - 65 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் - 57.5 செ.மீ. பாலிமர்: 6% pDMA மோனோமர், 0.1M TAPS, 7M யூரியா. வேலை செய்யும் எலக்ட்ரோலைட்: 0.1M TAPS. மின்னழுத்தம்:

11 கே.வி. தற்போதைய: 5.1 µA. வெப்பநிலை: 25.0 oC. மாதிரி ஊசி நேரம் 10 வினாடிகள் (எலக்ட்ரோகினெடிக், மாதிரி சேகரிப்பு மின்னழுத்தம் 10 கேவி).

பெறப்பட்ட தரவு சிரை இரத்த உறைவு (மனித இரத்த உறைதல் அமைப்பின் காரணி V இன் லைடன் மரபணு) விகாரமான மரபணுவின் விரைவான மற்றும் பயனுள்ள நோயறிதலுக்கான அமைப்பின் வளர்ச்சிக்கு அடிப்படையாக செயல்பட்டது.

காட்டு மற்றும் பிறழ்ந்த வகை தயாரிப்புகளின் (வேறுபாடு 5 பிபி) கூட்டுத் தீர்மானத்தின் சாத்தியத்தை நிரூபிக்க, பின்வரும் பிசிஆர்கள் செய்யப்பட்டன: 1.

காட்டு வகை டிஎன்ஏ (பிறழ்வு இல்லை) + காட்டு வகை ப்ரைமர்; 2. காட்டு வகை டிஎன்ஏ (பிறழ்வு இல்லாமல்) + ப்ரைமர் எஃப்வி லைடன்; 3. ஹெட்டோரோசைகஸ் பிறழ்வு FV லைடன் + ப்ரைமர் FV லைடன் கொண்ட DNA; 4. டிஎன்ஏ இல்லாத எஃப்வி லைடன் ப்ரைமர். எதிர்வினை தயாரிப்புகள், ஃபார்மைமைடு சிகிச்சை மற்றும் தண்ணீரில் நீர்த்த பிறகு, ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் CGE ஆல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது. 1 மற்றும் 3 மாதிரிகளின் பகுப்பாய்வு PCR க்குப் பிறகு கலவையில் தயாரிப்பு இருப்பதைக் காட்டியது, மேலும் 2 மற்றும் 4 மாதிரிகள் அதன் இல்லாததைக் காட்டியது. இந்த வடிவத்தை உறுதிப்படுத்த, 1:1 விகிதத்தில் பிறழ்ந்த ப்ரைமர்/பிறழ்ந்த தயாரிப்பு மற்றும் வைல்ட்-டைப் ப்ரைமர்/வைல்ட் வகை தயாரிப்பு மாதிரிகளின் கலவையை நாங்கள் பகுப்பாய்வு செய்தோம் (படம் 15).

அரிசி. 15. பிறழ்ந்த மற்றும் பிறழ்வு அல்லாத PCR தயாரிப்புகளின் கூட்டுத் தீர்மானம் தந்துகி: உள் விட்டம் - 50 µm, மொத்த நீளம் - 45 செ.மீ., பயனுள்ள நீளம் - 38.5 செ.மீ. பாலிமர் 6% pDMA மோனோமர், 0.1 M TAPS, 7 M யூரியா. வேலை செய்யும் எலக்ட்ரோலைட்: 0.1M TAPS. மின்னழுத்தம்: 12 கி.வி.

தற்போதைய: 6.5 μA. வெப்பநிலை: 25.0 oC. மாதிரி சேகரிப்பு நேரம்: 10 வி (எலக்ட்ரோகினெடிக், மாதிரி சேகரிப்பு மின்னழுத்தம் - 10 kV).

பெறப்பட்ட தரவு FV லைடன் பிறழ்வு மற்றும் காட்டு வகையின் அல்லீல்-குறிப்பிட்ட PCR தயாரிப்புகளின் கூட்டு நிர்ணயத்தின் சாத்தியத்தைக் காட்டுகிறது. முன்மொழியப்பட்ட அணுகுமுறை, அதாவது வெவ்வேறு நீளங்களின் அலீல்-குறிப்பிட்ட ப்ரைமர்களின் தேர்வு மற்றும் தொகுப்பு மற்றும் ஒரு பொதுவான கவுண்டர் ப்ரைமர், அதைத் தொடர்ந்து ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் CGE இன் பகுப்பாய்வு, பிற மரபணு ரீதியாக தீர்மானிக்கப்பட்ட நோய்களைக் கண்டறிய நீட்டிக்கப்படலாம். அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் குறுகிய பெப்டைட்களின் பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்தப்படும் நிலையான உள்நாட்டு உபகரணங்களைப் பயன்படுத்தி ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகளை பகுப்பாய்வு செய்ய முடியும் என்பதையும் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும்.

1. மைக்கேலர் எலக்ட்ரோகினெடிக் குரோமடோகிராபி மற்றும் கேபிலரி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மற்றும் ரிஃப்ராக்டோமெட்ரிக் மற்றும் நேரடி புற ஊதாக் கண்டறிதலைப் பயன்படுத்தி மரபணு குறியிடப்பட்ட அமினோ அமிலங்களை அவற்றின் ஆரம்ப வழித்தோன்றல் இல்லாமல் பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான முறைகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன. பின்னணி எலக்ட்ரோலைட்டின் கலவை மற்றும் pH மதிப்பின் தாக்கம், அத்துடன் கரிம கரைப்பான்களின் சேர்க்கை, பிரிப்பு செயல்திறனில் ஆய்வு செய்யப்பட்டது.

2. நேரடி UV கண்டறிதலுடன் மைக்கேலர் எலக்ட்ரோகினெடிக் குரோமடோகிராஃபி முறையைப் பயன்படுத்தி, 14 மரபணு குறியிடப்பட்ட இலவச அமினோ அமிலங்களின் மாதிரி கலவையின் அளவு நிர்ணயம் செய்யப்பட்டது.

3. ஆரோக்கியமான மற்றும் நோய்வாய்ப்பட்ட நோயாளிகளின் இரத்த பிளாஸ்மாவில் குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியோல்களின் உள்ளடக்கத்தை விரைவாகவும் நம்பகத்தன்மையுடனும் தீர்மானிப்பதற்கான ஒரு முறை ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் தலைகீழ்-கட்ட HPLC ஐப் பயன்படுத்துகிறது. இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீனின் குறைந்த அளவைக் கண்டறிய இந்த நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துவதற்கான அடிப்படை சாத்தியம் காட்டப்பட்டுள்ளது. நோயாளியின் இரத்த பிளாஸ்மாவின் உண்மையான மாதிரிகளில் உருவாக்கப்பட்ட முறை சோதிக்கப்பட்டது.

4. ஃபோட்டோமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் தந்துகி மண்டல எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மூலம் இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீனின் நோயியல் ரீதியாக அதிக செறிவுகளை தீர்மானிக்கும் சாத்தியம் நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது. நோயாளியின் இரத்த பிளாஸ்மாவின் உண்மையான மாதிரிகளில் உருவாக்கப்பட்ட முறை சோதிக்கப்பட்டது. 5-iodoacetamidofluorescein ஐ உறிஞ்சும் மற்றும் ஃப்ளோரோஜெனிக் லேபிளாகப் பயன்படுத்துவதற்கான சாத்தியக்கூறு ஆய்வு செய்யப்பட்டது.

5. ஃப்ளோரிமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் கூடிய தந்துகி ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மூலம் சிரை இரத்த உறைவுக்கான (FV லைடன் பிறழ்வு) பிறழ்ந்த மரபணுவின் துண்டுகளைத் தேர்ந்தெடுத்து தீர்மானிக்க ஒரு முறை உருவாக்கப்பட்டுள்ளது. 100 நியூக்ளியோடைடுகள் வரை சங்கிலி நீளம் கொண்ட நியூக்ளியோடைடுகளை பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான சாத்தியம் நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது. மற்றும் 1 n.o நீளம் வித்தியாசத்துடன்.

ஆய்வறிக்கையின் முக்கிய பொருட்கள் பின்வரும் படைப்புகளில் வழங்கப்படுகின்றன:

1. Melnikov I.O., Nazimov I.V., Stukacheva E.A., Glubokov Yu.M. இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீன் மற்றும் பிற குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்களின் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானித்தல். // ஜே. அனல். செம். -2006. -டி. 61. -எண் 11. -எஸ். 1185-1191.

2. மெல்னிகோவ் ஐ.ஓ., குளுபோகோவ் யு.எம்., நாசிமோவ் ஐ.வி. ரிஃப்ராக்டோமெட்ரிக் மற்றும் நேரடி UV கண்டறிதலுடன் இலவச அமினோ அமிலங்களின் தந்துகி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ். // Inf.-குத. புல்லட்டின் "MITHT இன் அறிவியல் குறிப்புகள்." எம்.:

MITHT. -2004. தொகுதி. 11. -எஸ். 54-57.

3. மெல்னிகோவ் ஐ.ஓ., குளுபோகோவ் யு.எம்., நாசிமோவ் ஐ.வி. ஃப்ளோரசன்ட் மற்றும் நேரடி UV கண்டறிதலுடன் கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மற்றும் RP HPLC மூலம் குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியோல்களின் பகுப்பாய்வு. // ஜே. "நவீன உயர் தொழில்நுட்ப தொழில்நுட்பங்கள்." எம்.: அகாடமி ஆஃப் நேச்சுரல் சயின்சஸ், -2005. -எண் 3. -ப.40-41.

4. Melnikov I.O., Nazimov I.V., Stukacheva E.A., Glubokov Yu.M. வாஸ்குலர்களின் அளவுகோலாக ஹோமோசைஸ்டீனின் HPLC மற்றும் HPCE நிர்ணயம்நோய் ஆபத்து காரணி. // FEBS ஜே. -2006. -வி. 273. -எஸ்.1. -பி. 256.

5. மெல்னிகோவ் ஐ.ஓ., நாசிமோவ் ஐ.வி., லோபசோவ் ஏ.எஃப்., பாப்கோவிச் ஜி.வி. மாற்றப்படாத அமினோ அமிலங்களின் தந்துகி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ். // சுருக்கம். அறிக்கை மூலக்கூறு திரவ குரோமடோகிராபி மற்றும் கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பற்றிய 8வது அனைத்து ரஷ்ய சிம்போசியம், மாஸ்கோ, அக்டோபர் 2001, பி. 23.

6. மெல்னிகோவ் ஐ.ஓ., நாசிமோவ் ஐ.வி., லோபசோவ் ஏ.எஃப்., பாப்கோவிச் ஜி.பி. ரிஃப்ராக்டோமெட்ரிக் உடன் குறியிடப்பட்ட மாற்றப்படாத அமினோ அமிலங்களின் தந்துகி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்கண்டறிதல். // 3வது சர்வதேச கருத்தரங்கம் உயிரியலில் பிரிவினைகள், மாஸ்கோ, மே 2003, பி. 263.

7. Melnikov I.O., Stukacheva E.A., Glubokov Yu.M., Nazimov I.V. CEF மற்றும் RP HPLC முறைகள் மூலம் இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீன் மற்றும் பிற குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்களை தீர்மானித்தல். // அடிப்படை அறிவியலில் மாணவர்கள் மற்றும் முதுகலை மாணவர்களின் சர்வதேச மாநாட்டின் பொருட்கள் "லோமோனோசோவ்-2005".

எம்.: MSU, 2005. வேதியியல் பிரிவு. -டி. 1. -எஸ். 31.

8. நாசிமோவ் ஐ.வி., மெல்னிகோவ் ஐ.ஓ., குளுபோகோவ் யு.எம்., சிவோப்லியாசோவா ஈ.ஏ. கார்டியோவாஸ்குலர் நோய்களுக்கான ஆபத்து காரணியாக ஹோமோசைஸ்டீனை தீர்மானிப்பதற்கான கருவி மைக்ரோமெத்தடுகள். // 2 வது அறிவியல் மற்றும் நடைமுறை மாநாட்டின் பொருட்கள் "மருத்துவ உயிரி தொழில்நுட்பத்தின் தற்போதைய சிக்கல்கள்", அனபா, செப்டம்பர் 2005, -எஸ். 15-16.

9. மெல்னிகோவ் ஐ.ஓ., நாசிமோவ் ஐ.வி., சிவோப்லியாசோவா ஈ.ஏ., குளுபோகோவ் யு.எம். இரத்த பிளாஸ்மாவில் ஹோமோசைஸ்டீனின் அளவு நிர்ணயம் செய்வதற்கான மைக்ரோமெத்தடுகள். // ரஷ்யாவின் பயோடெக்னாலஜிஸ்ட்ஸ் சங்கத்தின் 3 வது காங்கிரஸின் பொருட்கள் பெயரிடப்பட்டுள்ளன. யு.ஏ. ஓவ்சினிகோவா, மாஸ்கோ, அக்டோபர் 2005, -எஸ். 61.

10. Melnikov I.O., Sivoplyasova E.A., Glubokov Yu.M., Nazimov I.V. குரோமடோகிராஃபிக் பகுப்பாய்வு முறைகளைப் பயன்படுத்தி இருதய நோய்களுக்கான ஆபத்து காரணிகளைத் தீர்மானித்தல். // இளம் விஞ்ஞானிகளின் 1வது மாநாட்டின் பொருட்கள் MITHT im. எம்.வி. லோமோனோசோவ், மாஸ்கோ, அக்டோபர் 2005, -எஸ். 31.

11. Melnikov I.O., Nazimov I.V., Stukacheva E.A., Glubokov Yu.M. இரத்தத்தில் குறைந்த மூலக்கூறு எடை அமினோதியால்களைப் பிரித்தல் மற்றும் அடையாளம் காணுதல்தலைகீழ் நிலை உயர் செயல்திறன் திரவ நிறமூர்த்தம் மற்றும் தந்துகி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ். // பகுப்பாய்வு அறிவியலில் சர்வதேச காங்கிரஸ் ICAS-2006, மாஸ்கோ, ஜூன் 2006, -P. 204.

12. Melnikov I.O., Nazimov I.V., Patrushev L.I., Alekseev Ya.I., Glubokov Yu.M., Mosina A.G. மனித லைடன் மரபணு மாற்றத்தை தீர்மானித்தல்உயர் செயல்திறன் தந்துகி ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ். // புரதங்கள், பெப்டைடுகள் மற்றும் பாலிநியூக்ளியோடைடுகள், LMP, இன்ஸ்ப்ரூக், ஆஸ்திரியா, அக்டோபர் 2006, -P. 24.

இதே போன்ற படைப்புகள்:

"டிமிட்ரி செர்ஜீவிச் கோப்சுக் 5-ARYL-2,2'-பைபிரிடைன்கள் மற்றும் அவற்றின் ஒளிரும் கலவைகள் லாந்தனைடு (III) 02.00.03. – கரிம வேதியியல் ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம் எகடெரின்பர்க் 2010 வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் அறிவியல் பட்டத்திற்கான ஆய்வு, ரஷ்யாவின் முதல் ஜனாதிபதியின் பெயரிடப்பட்ட உயர் தொழில்முறை கல்வி USTU-UPI இன் மாநிலக் கல்வி நிறுவனத்தின் கரிம வேதியியல் துறையில் மேற்கொள்ளப்பட்டது. யெல்ட்சின் ஆராய்ச்சி மேற்பார்வையாளர்: வேதியியல் அறிவியல் மருத்துவர் கோசெவ்னிகோவ் டிமிட்ரி நிகோலாவிச் அதிகாரப்பூர்வ எதிர்ப்பாளர்கள்: வேதியியல் அறிவியல் மருத்துவர்...”

"Venv Sergey Valerievich e, மின்னியல் தொடர்புகளின் தாக்கம் மற்றும் மேக்ரோமொலிகுல்களின் முதன்மை அமைப்பு அவற்றின் சுய-அமைப்பில் 02.00.06 - உயர்-மூலக்கூறு கலவைகள் இயற்பியல் மற்றும் கணித அறிவியலின் வேட்பாளர் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம் மாஸ்கோ - 2011 எம்.வி பெயரிடப்பட்ட மாஸ்கோ மாநில பல்கலைக்கழகத்தின் இயற்பியல் பீடத்தின் பாலிமர்கள் மற்றும் படிகங்களின் இயற்பியல் துறையில் பணிகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. லோமோனோசோவ். அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: மருத்துவர்...”

"NIKOLAEV ANDREY ALEXANDROVICH 6 மற்றும் 1 0 G R U PY S D A L K I LF O S F I TAM I 02.00.00.00.000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000. வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் கசானின் அறிவியல் பட்டம் - 2008 பணி மேற்கொள்ளப்பட்டது பெயரிடப்பட்ட வேதியியல் நிறுவனத்தின் உயர்-மூலக்கூறு மற்றும் உறுப்பு கலவைகள் துறையில். ஏ.எம். பட்லெரோவ் மாநிலம்..."

"Vilesov Alexander Sergeevich கதிர்வீச்சு-வெவ்வேறு சூழல்களில் பாஸ்பரஸின் பாலிமர் வடிவங்களின் வேதியியல் தொகுப்பு 02.00.01. - கனிம வேதியியல் மாஸ்கோ 2009 வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் அறிவியல் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம் D.I இன் பெயரிடப்பட்ட ரஷ்ய இரசாயன-தொழில்நுட்ப பல்கலைக்கழகத்தின் வேதியியல் மற்றும் நிலையான மேம்பாட்டு சிக்கல்கள் நிறுவனத்தில் பணி மேற்கொள்ளப்பட்டது. மெண்டலீவா அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: ரஷ்ய அறிவியல் அகாடமியின் தொடர்புடைய உறுப்பினர், வேதியியல் அறிவியல் மருத்துவர், பேராசிரியர் நடாலியா பாவ்லோவ்னா தாராசோவா அதிகாரி..."

"ஸ்லோவோகோடோவ் யூரி லியோனிடோவிச் அணு அமைப்பு மற்றும் புதிய ஃபுல்லரன்ஸ் டெரிவேடிவ்களின் படிக வேதியியல் அம்சங்கள் நிறுவனத்தில் பணிகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன ஏ.என். நெஸ்மேயனோவ் ரஷ்ய அகாடமி அறிவியல் டாக்டர் ஆஃப் கெமிக்கல் சயின்சஸ் பெயரிடப்பட்ட ஆர்கானோலெமென்ட் கலவைகள், அதிகாரப்பூர்வ..."

“Varnavskaya Olga Alekseevna நியோடைமியம் (III) மற்றும் யூரோபியம் (III) ஆகியவற்றின் கலவையின் இயற்பியல்-வேதியியல் சிறப்பியல்புகள் 2,2-டிபிரிடிலைன் இன் ஆர்கானிக் சூழல்களில் - 4.0 இயற்பியல் வேதியியல். வேட்பாளர் வேதியியல் அறிவியலின் அறிவியல் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரை டாம்ஸ்க் - 2010 அல்டாய் ஸ்டேட் யுனிவர்சிட்டி, பர்னாலில் மேற்கொள்ளப்பட்ட பணிகள் அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர், இணை பேராசிரியர் ஸ்மாகின் விளாடிமிர் பெட்ரோவிச் அதிகாரப்பூர்வ எதிரிகள்: மருத்துவர்...”

பாலிசல்போனிக், பாலிகார்பாக்சிலிக் அமிலங்கள் மற்றும் நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகளின் ஒலிகோமர்களை அடையாளம் கண்டு நிர்ணயிப்பதில் மேட்ரிக்ஸ் (மேற்பரப்பு) கொண்ட க்ராஸ்னோவா டாட்டியானா அலெக்ஸாண்ட்ரோவ்னா மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி 02.00.02 - 02.00.02 - அறிவியல் ஆய்வுப் பட்டப்படிப்புக்கான ஆய்வுப் பட்டப்படிப்புக்கான ஆய்வுப் பட்டம். s சரடோவ் - 2013 அலெக்சாண்டர் கிரிகோரிவிச் மற்றும் நிகோலாய் கிரிகோரிவிச் பெயரிடப்பட்ட விளாடிமிர் ஸ்டேட் யுனிவர்சிட்டியின் வேதியியல் துறையில் பணி மேற்கொள்ளப்பட்டது.

"பகுப்பாய்வு சிறப்பு 02.00.02 - ரசாயன அறிவியல் வேட்பாளர் பட்டத்திற்கான ஆய்வு வேதியியல் சுருக்கம் டாம்ஸ்க் - 2012 www.sp-department.ru உயர் தொழில்முறை கல்வி தேசிய ஆராய்ச்சியின் மத்திய மாநில பட்ஜெட் கல்வி நிறுவனத்தில் பணி மேற்கொள்ளப்பட்டது. .."

“ஸ்மிர்னோவ் அலெக்ஸி அலெக்ஸாண்ட்ரோவிச் இயற்பியல் மற்றும் வேதியியல் செயல்முறைகள் குறைந்த வெப்பநிலையில் பிளாஸ்மா HBr மற்றும் அதன் கலவைகள் ஆர்கான், ஹீலியம் மற்றும் ஹைட்ரஜன் வேதியியலுக்கான அறிவியல் 04.02. இவனோவோ 2010 இயற்பியல் மற்றும் கணித அறிவியலின் வேட்பாளர் பட்டம் உயர் நிபுணத்துவ கல்விக்கான மாநில கல்வி நிறுவனம் இவானோவோ மாநில இரசாயன தொழில்நுட்ப பல்கலைக்கழகம். அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: வேதியியல் அறிவியல் மருத்துவர், பேராசிரியர் எஃப்ரெமோவ் அலெக்சாண்டர் மிகைலோவிச் அதிகாரப்பூர்வ எதிரிகள்:..."

"FERROSPINEL இன் உறிஞ்சுதல் பண்புகள் மற்றும் மேற்பரப்பு பண்புகள் ஆகியவற்றில் சின்தசிஸ் நிபந்தனைகளின் செல்வாக்கு பற்றிய VASYUTIN Oleg Alekseevich ஆராய்ச்சி. 0.11 – கூழ் வேதியியல் செயின்ட் வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் அறிவியல் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம் . பீட்டர்ஸ்பர்க் 2012 செயின்ட் பீட்டர்ஸ்பர்க் மாநில வேதியியல் பீடத்தின் கொலாய்டு வேதியியல் துறையில் பணி மேற்கொள்ளப்பட்டது..."

"Melnikova Tatyana Igorevna பிஸ்மத் போரேட்ஸ் மற்றும் sillenites இன் கலவை மற்றும் கட்டமைப்பு அம்சங்களை நிர்ணயிப்பதற்கான தத்துவார்த்த மற்றும் பரிசோதனை கட்டமைப்புகளின் மேம்பாடு. வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளரின் அறிவியல் பட்டம் மாஸ்கோ 2011 வேலை முடிந்தது மற்றும் துறையில் சாலிட் ஸ்டேட் இயற்பியல் மற்றும் வேதியியல், மாஸ்கோ மாநில நுண் அறிவியல் பல்கலைக்கழக வேதியியல் தொழில்நுட்பங்கள் எம்.வி. லோமோனோசோவ் அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: டாக்டர்...”

"ஸ்டாரோஸ்டினா இரினா அலெக்ஸீவ்னா 02.00.06 பிசின் கலவைகளில் பாலிமர்கள் மற்றும் உலோகங்களின் அமில-அடிப்படை தொடர்புகள் 02.00.06 - உயர்-மூலக்கூறு சேர்மங்கள் ரசாயன அறிவியல் டாக்டர் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம். www.2011-வது பகுதி கசான் வேலை. உயர் நிபுணத்துவ கல்வி ஆராய்ச்சி தொழில்நுட்ப பல்கலைக்கழகத்தின் கசான் நேஷனல் ஃபெடரல் ஸ்டேட் பட்ஜெட் கல்வி நிறுவனத்தில் அறிவியல் ஆலோசகர் தொழில்நுட்ப அறிவியல் டாக்டர், பேராசிரியர் ஒலெக் விளாடிஸ்லாவோவிச் ஸ்டோயனோவ் அதிகாரப்பூர்வ எதிரிகள் டாக்டர்...”

“வாசிலீவ் விளாடிமிர் பெட்ரோவிச் ஸ்பெக்ட்ரல் - 02.00.04 தீர்வுகளில் உள்ள மெட்டாலோசீன் காம்ப்ளக்ஸ் Zr மற்றும் Hf ஐ இன்டர்மோலிகுலர் தொடர்புகளின் ஒளிர்வு ஆய்வு. - இயற்பியல் வேதியியல் வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம் செர்னோகோலோவ்கா - 2008 ரஷ்ய அறிவியல் அகாடமியின் இரசாயன இயற்பியல் சிக்கல்கள் நிறுவனம் மற்றும் தெற்கு ஃபெடரல் பல்கலைக்கழக அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: வேட்பாளர் வேதியியல் அறிவியலின் லுகோவா கலினா விக்டோரோவ்னா அதிகாரி..."

"SPENCHENKO Olga Valerievna 02.00.10 டிரான்ஸ்போர்ட் மேட்டர் ஆர்என்ஏ 02.00.10 செயல்பாட்டு இடவியல் - உயிர்வேதியியல் வேதியியல் அறிவியல் டாக்டர் பட்டத்திற்கான ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம் - 2010 - 2010 2 இயற்கை வேதியியல் துறையின் இயற்பியல் வேதியியல் துறையின் வேலைகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. மாஸ்கோ மாநிலத்தின்..."

“KOSHELEV Ekaterina Valentinovna SOLID ELECTROLYTES IN CaY2S4-Yb2S3 மற்றும் CaYb2S4-Y2S3 சிஸ்டம்ஸ் சிறப்பு: 02.00.05 – எலக்ட்ரோ கெமிஸ்ட்ரியின் சுருக்கம் 02.00.05 20 பர்க்கில் வேதியியல் துறையின் அறிவியல் பட்டப்படிப்புக்கான ஆய்வுக் கட்டுரையை முடித்தார். கனிம மற்றும் உடல் V PA Vyatka மாநில பல்கலைக்கழகத்தின் ஃபெடரல் ஸ்டேட் பட்ஜெட் கல்வி நிறுவனத்தின் வேதியியல், Kirov Kalinina லியுட்மிலா Alekseevna, அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: வேதியியல் அறிவியல் வேட்பாளர், Vyatka மாநில பல்கலைக்கழகத்தின் இணை பேராசிரியர்,...

பாலிமர்-கலவை சோர்பென்ட்கள் மற்றும் பிளாட்டினம் எலக்ட்ரோகேடலிஸ்ட்களின் பண்புகளை கட்டுப்படுத்துவதற்கான ஒரு முறையாக களிமண் கொண்ட அமைப்புகளில் எகடெரினா கான்ஸ்டான்டினோவ்னா லாவ்ரென்டியேவா டெம்ப்ளேட்டிங் இயற்பியல் மற்றும் கணித அறிவியல் மாஸ்கோ – 2009 இயற்பியல் துறையில் மேற்கொள்ளப்பட்ட பணிகள்...”

"எவ்ஜீனியா விக்டோரோவ்னா கோர்ச்சகினா சிட்டோசனின் ஒருங்கிணைப்பு மற்றும் அதன் வழித்தோன்றல்கள் நீர்த்த நீர் தீர்வுகள் 02.00.06 - உயர் மூலக்கூறு கலவைகள், இயற்பியல் மற்றும் கணித அறிவியல் மற்றும் மாஸ்கோவின் இயற்பியல் மற்றும் கணித அறிவியல் ஆய்வுக் கட்டுரையின் சுருக்கம் 2. இயற்பியல் பீடத்தின் பாலிமர்கள் மற்றும் படிகங்களின் இயற்பியல் துறை மற்றும் மாஸ்கோ மாநில பல்கலைக்கழகத்தில் ...

இயற்கை மோனோடெர்பெனாய்டுகளின் நைட்ரஜன் கொண்ட வழித்தோன்றல்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட பல்லேடியத்தின் வோரோபெவா எகடெரினா ஜார்ஜீவ்னா சிரல் வளாகங்கள் 02.00.03 - கரிம வேதியியல் ஆய்வுக் கட்டுரையின் ஆய்வுப் பட்டப்படிப்பு 1. ரஷ்ய நிறுவனத்தில் வெளியே ரஷியன் அகாடமி ஆஃப் சயின்ஸின் யூரல் கிளையின் கோமி அறிவியல் மையத்தின் வேதியியல் அகாடமி சயின்சஸ் இன்ஸ்டிடியூட் மற்றும் வேதியியல் துறை FSBEI HPE Syktyvkar மாநில பல்கலைக்கழகத்தில். அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: ஓல்கா ஜலேவ்ஸ்கயா...”

“ரைகுனோவ் அலெக்ஸி அலெக்ஸாண்ட்ரோவிச், மாற்று ஹைட்ரோபிரிமிடின்ஸ் வரம்பில் உள்ள குவாண்டம்-டோபோலாஜிக்கல் அணு மற்றும் பத்திர விவரிப்பாளர்களின் போர்ட்டபிலிட்டி 02.00.04 - மாஸ்கோ இயற்பியல் வேதியியல் பட்டப்படிப்புக்கான இயற்பியல் வேதியியல் பட்டப்படிப்புக்கான அறிவியல் பட்டப்படிப்பு. - 2011 திணைக்களத்தில் பணிகள் நிறைவடைந்தன குவாண்டம் ஆஃப் வேதியியல், இயற்கை அறிவியல் பீடம், ரஷ்ய இரசாயன-தொழில்நுட்ப பல்கலைக்கழகம். DI. மெண்டலீவ் அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: இயற்பியல் மற்றும் கணித அறிவியல் டாக்டர், பேராசிரியர்..."

“கோர்ஷுன் விளாடிமிர் ஆர்கடிவிச், ஒலிகோனுக்ளியோடைட் கான்ஜுகேட்ஸின் தொகுப்பில் பைரிமிடின் நியூக்ளியோசைடுகள் மற்றும் நியூக்ளியோசைடு அல்லாத உதிரிபாகங்களை மாற்றியமைத்தார், அவற்றின் பண்புகள் மற்றும் இருவேதியியல் 1020. மருத்துவர் இரசாயன அறிவியல் மாஸ்கோ - 2012 இன் அறிவியல் பட்டத்திற்கான சீர்திருத்தம் பணி மேற்கொள்ளப்பட்டது இன்டர்லூகின் ஜெனடிக் இன்ஜினியரிங் குரூப், ஜீன் எக்ஸ்பிரஷன் மெக்கானிசம்ஸ் ஆய்வகம், நியூக்ளிக் ஆசிட் கெமிஸ்ட்ரி ஆய்வகம், ஆர்கானிக் சின்தசிஸ் ஆய்வகம் மற்றும் குழு...”

தமிழாக்கம்

1 NOVOSIBIRSK ஸ்டேட் யுனிவர்சிட்டி ஃபேக்கல்டி ஆஃப் நேச்சுரல் சயின்சஸ் டிபார்ட்மெண்ட் ஆஃப் அனலிட்டிகல் கெமிஸ்ட்ரி கோர்ஸ் வேலை ரிவர்ஸ் பேஸ் ஹெச்பிஎல்சியில் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு தொகுதிகள் மற்றும் UV ஸ்பெக்ட்ராவின் கணிப்பு: குச்சினா ஏ.யு., gr. 147 அறிவியல் மேற்பார்வையாளர்: Ph.D. அசரோவா ஐ.என். நோவோசிபிர்ஸ்க்-2005

2 உள்ளடக்கங்கள் 1. அறிமுக இலக்கிய ஆய்வு 2.1. பெப்டைடுகள். HPLC பெப்டைட்களின் அமினோ அமிலங்கள் RP HPLC இல் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு தொகுதிகள் மற்றும் UV ஸ்பெக்ட்ராவின் கணிப்பு சோதனை பகுதி முடிவுகள் மற்றும் அவற்றின் விவாதம் 4.1. குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பின் ஸ்திரத்தன்மையை கண்காணித்தல்

3 1. அறிமுகம் ஜீனோமின் அமைப்பு, புரோட்டியோமிக்ஸ் பற்றிய அறியப்பட்ட தகவல்களின் அடிப்படையில் வாழும் உயிரணுக்களில் செயல்படும் புரதங்களை அடையாளம் காண்பது நவீன மூலக்கூறு உயிரியலின் மிக முக்கியமான பணிகளில் ஒன்றாக கருதப்படுகிறது. கடந்த சில ஆண்டுகளில் சில உயிரினங்களின் மரபணுக்களை முழுமையாகப் புரிந்துகொண்ட பிறகு இந்தப் பிரச்சனை எழுந்துள்ளது. உடல் உற்பத்தி செய்வதை விட மரபணுக்கள் பல புரதங்களை குறியாக்கம் செய்கின்றன. அனைத்து புரதங்களின் கூட்டுத்தொகையில் ஆர்வமுள்ள புரதத்தை அடையாளம் காண்பது ஒரு சிக்கலான வழிமுறை பணியாகும், இது ஒரு விதியாக, நேரடி முறையால் தீர்க்கப்பட முடியாது. பெப்டிடோமிக்ஸ் என்று அழைக்கப்படும் இந்த வகையான சிக்கலைத் தீர்ப்பதற்கான அணுகுமுறைகளில் ஒன்று, புரதங்களின் கூட்டுத்தொகை ஒரு குறிப்பிட்ட புரோட்டீஸுடன் நீராற்பகுப்பு செய்யப்படுகிறது, மேலும் இதன் விளைவாக வரும் பெப்டைட்களின் கூட்டுத்தொகை தந்துகி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் அல்லது உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC) மூலம் பிரிக்கப்படுகிறது. அறியப்பட்ட கட்டமைப்பின் பெப்டைடை (பெப்டைடுகள்) கண்டறிவதே இறுதி இலக்காகும், இது (அதாவது) ஆய்வின் கீழ் உள்ள உயிரினத்தின் மரபணுவால் குறியிடப்பட்ட புரதத்தின் ஒரு பகுதி ஆகும். அத்தகைய பெப்டைட் (கள்) மாதிரியில் கண்டறியப்பட்டால், புரதம் உடலால் உற்பத்தி செய்யப்படுகிறது என்று முடிவு செய்யப்படுகிறது. இந்த வகையான சிக்கல்களைத் தீர்க்கும் போது எழும் முறைசார் சிக்கல்களை 2 குழுக்களாகப் பிரிக்கலாம். பொதுவாக பல ஆயிரம் பெப்டைட்களைக் கொண்ட கலவையைப் பிரிப்பதே முதல் பிரச்சனை. இரண்டாவது தனிமைப்படுத்தப்பட்ட தனிப்பட்ட பெப்டைட்களின் கட்டமைப்பை தீர்மானித்தல். முதன்மைக் கலவையைப் பிரிப்பதன் மூலம் பிரிக்கப்பட்ட பின்னங்களை தனித்தனி கூறுகளாகப் பிரிப்பதன் மூலம் பிரித்தல் சிக்கல் தீர்க்கப்படுகிறது. இரண்டாவது சிக்கல் முக்கியமாக மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரிக் முறைகளால் தீர்க்கப்படுகிறது, இது இறுதியில் தனிப்பட்ட கூறுகளின் (பெப்டைடுகள்) மூலக்கூறு வெகுஜனங்களை தீர்மானிக்க உதவுகிறது. ஒரு பெப்டைட் மிகவும் "தனித்துவமான" அமைப்பைக் கொண்டிருந்தால் (அமினோ அமிலங்களின் தொகுப்பு) - இவை பொதுவாக நீண்ட (அமினோ அமில எச்சங்களை விட) பெப்டைட்களை உள்ளடக்கியது - அதன் மூலக்கூறு எடையும் "தனித்துவமானது", மேலும் தவறான அடையாளத்தின் நிகழ்தகவு மிகக் குறைவு. . பெப்டைட் பிரிப்பு செயல்முறையானது அறியப்பட்ட அமினோ அமிலங்களுடன் பெப்டைடை தனிமைப்படுத்துவதை நோக்கமாகக் கொண்டிருப்பதால், கேள்வி எழுகிறது: HPLC நெடுவரிசையில் இருந்து அத்தகைய பெப்டைடை வெளியிடும் நேரத்தை, அதன் அமினோ அமில கலவையை அறிந்து கணிக்க முடியுமா? இந்த அணுகுமுறை முதன்முதலில் 80 களின் முற்பகுதியில் நிரூபிக்கப்பட்டது. மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமீட்டரில் நேரடியாக உட்செலுத்துவதற்கு ஏற்ற மொபைல் கட்டத்தைப் பயன்படுத்தி, தலைகீழ்-கட்ட HPLC (RP HPLC) முறையில் Milichrom A-02 குரோமடோகிராப்பில் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவைக் கணிக்கும் முறையை உருவாக்குவதே இந்த ஆய்வின் குறிக்கோளாகும். 3

4 2. இலக்கிய விமர்சனம் 2.1. பெப்டைடுகள். அமினோ அமிலங்கள் பெப்டைடுகள் பெப்டைட் பிணைப்புகள் (-NH-CO-) மூலம் ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட α-அமினோ அமில எச்சங்களிலிருந்து கட்டப்பட்ட பயோபாலிமர்கள் ஆகும். பெப்டைட்டின் பொதுவான சூத்திரம் பின்வருமாறு வழங்கப்படலாம்: NH 2 CH CO NH CH CO... NH CH R 1 R 2 Rn புரதங்கள் மற்றும் பெப்டைடுகளுக்கு இடையே தெளிவான எல்லை இல்லை; ஒரு விதியாக, பெப்டைட்களில் பயோபாலிமர்கள் அடங்கும். 100 அமினோ அமில எச்சங்கள். அமினோ அமிலங்கள் கரிம அமிலங்கள் ஆகும், அதன் மூலக்கூறுகள் அமினோ குழுவை உள்ளடக்கியது; இந்த பெயர் பெரும்பாலும் α-அமினோ அமிலங்கள் என்று பொருள்படும். அவை முக்கியமான உயிரியல் முக்கியத்துவம் வாய்ந்தவை. புரதங்களை உருவாக்கும் பெரும்பாலான இயற்கையான அமினோ அமிலங்களின் மூலக்கூறுகள் H 2 NCH R என்ற பொதுவான சூத்திரத்தைக் கொண்டிருக்கின்றன, கட்டமைப்பு சூத்திரத்தில் இருந்து பார்க்க முடியும், அமினோ அமிலங்கள் (புரோலைனைத் தவிர) பக்கச் சங்கிலி R இன் கட்டமைப்பில் மட்டுமே ஒருவருக்கொருவர் வேறுபடுகின்றன. அமினோ அமிலங்கள் ஆம்போடெரிக் சேர்மங்களாகும், ஏனெனில் அவற்றின் மூலக்கூறுகள் அமில கார்பாக்சைல் குழு மற்றும் அடிப்படை அமினோ குழு இரண்டையும் கொண்டிருக்கின்றன. ஒரு வலுவான அமில சூழலில், கார்பாக்சைல் குழு முக்கியமாக பிரிக்கப்படாதது, மேலும் அமினோ குழு புரோட்டானேட் ஆகும். ஒரு வலுவான கார சூழலில், அமினோ குழு ஒரு இலவச அடித்தள வடிவில் உள்ளது, மற்றும் கார்பாக்சைல் குழு ஒரு கார்பாக்சிலேட் அயனி வடிவில் உள்ளது. படிக நிலையில், அமினோ அமிலங்கள் ஒரு ஸ்விட்டேரியன் வடிவத்தில் உள்ளன, அங்கு கார்பாக்சில் குழுவிலிருந்து ஒரு புரோட்டான் அமினோ குழுவிற்கு மாற்றப்படுகிறது. இயற்கையான பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களின் உயிரியக்கத்தில் 20 அமினோ அமிலங்கள் மட்டுமே ஈடுபட்டுள்ளன. அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் அவற்றின் பண்புகள் அட்டவணை 1 இல் கொடுக்கப்பட்டுள்ளன. அட்டவணை 1. அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் அவற்றின் பண்புகள். அமினோ அமிலம் பெயர் குறியீடு அமைப்பு p a - -NH 2 -R கிளைசின் G H 2.35 9.78 அலனைன் A H 3 C 2.35 9.87 Valine V H 3 C CH CH 3 2.29 9.74 4

5 அமினோ அமிலக் குறியீடு கட்டமைப்பின் பெயர் p a --nh 2 -r லுசின் l h 3 c ch 3 2.33 9.74 ஐசோலூசின் i h 3 c * ch ch 3 2.32 9.76 H 2 C Proline P HC NH 1.95 10.64 FYNILALANINE F 2.20 9.31 டிரிப்டோபான் w n H CH NH 2 2.46 9.41 டைரோசின் Y HO CH NH 2 2.20 9.21 10.46 செரின் S HO 2.19 9.21 Threonine T HO * CH CH 3 2.09 9.10 Cysteine ​​C HS 1.92 90 Aspart 8. 7. 90 Aspart 81 3.36 குளுடாமிக் அமிலம் E HOOC 2.10 10.47 4.07 அஸ்பாரகின் N H 2 N C O 2.14 8.72 Glutamine Q H 2 N C O 2.17 9.13 Lysine K H 2 N 2.16 9.06 10.54 Arginine R H 2 N C NH 1.82 8.99 12.48 NH Histidine M310, H3 NH60 எஸ் 2.13 9.28 5

6 பக்க சங்கிலிகளின் தன்மையைப் பொறுத்து, அமினோ அமிலங்கள் இரண்டு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்படுகின்றன: துருவமற்ற (ஹைட்ரோபோபிக்) அலிபாடிக் அல்லது நறுமண R-குழுக்கள் கொண்ட அமினோ அமிலங்கள்; துருவ (ஹைட்ரோஃபிலிக்) ஆர்-குழுக்கள் கொண்ட அமினோ அமிலங்கள். முதல் குழுவில் 8 அமினோ அமிலங்கள் உள்ளன: அலனைன், வாலின், லியூசின், ஐசோலூசின், மெத்தியோனைன், புரோலின், ஃபைனிலாலனைன், டிரிப்டோபன். ஏழு அமினோ அமிலங்கள் பக்கச் சங்கிலியில் உள்ள குழுக்களைக் கொண்டிருக்கின்றன, அவை எதிர்மறை அல்லது நேர்மறை மின்னூட்டத்தைக் கொண்டு செல்லலாம்: அஸ்பார்டிக் மற்றும் குளுடாமிக் அமிலங்கள் pH 7.0 இல் எதிர்மறையாக சார்ஜ் செய்யப்படுகின்றன; லைசின், அர்ஜினைன், ஹிஸ்டைடின் ஆகியவை அடிப்படை அமினோ அமிலங்கள், அதன் பக்க சங்கிலிகள் நேர்மறையாக சார்ஜ் செய்யப்படலாம்; கார நிலைமைகளின் கீழ், HPLC பெப்டைடுகளின் டைரோசின் மற்றும் சிஸ்டைன் பக்க குழுக்கள் எதிர்மறையாக சார்ஜ் செய்யப்படலாம்.பெப்டைட்களின் கலவைகளை பிரிப்பது மிகவும் கடினமான பணியாகும். தற்போது, ​​RP HPLC என்பது பெப்டைட்களைப் பிரிப்பதற்கான மிக முக்கியமான முறையாகும். பெப்டைடுகள் துருவப் பொருட்கள் ஆகும், இது நிலையான கட்டத்தின் ஹைட்ரோபோபிக் மேற்பரப்புடன் அவற்றின் தொடர்புகளைத் தடுக்கிறது மற்றும் எஞ்சிய சிலானால் குழுக்களுடன் தொடர்பு கொள்ள வழிவகுக்கிறது. சிலானோல் குழுக்களுடனான தொடர்புகளை குறைப்பதற்காக, வலுவான அமிலங்கள் அல்லது உப்புகள் எலுவெண்டில் சேர்க்கப்படுகின்றன. பெப்டைட்களின் துருவமுனைப்பைக் குறைக்க, குரோமடோகிராபி குறைந்த pH மதிப்புகளில் (3க்குக் கீழே) செய்யப்பட வேண்டும். இந்தக் கொள்கைகளைப் பின்பற்றினால், பெப்டைட்களைப் பிரிப்பதற்கு HPLC மிகவும் நெகிழ்வான முறையாகும். இந்த முறையானது அதிக பிரிப்பு வேகம், முடிவுகளின் மறுஉருவாக்கம் மற்றும் மைக்ரோகிராம் அளவு பொருட்களை பகுப்பாய்வு செய்யும் திறன் ஆகியவற்றால் வகைப்படுத்தப்படுகிறது என்பதே இதற்குக் காரணம். RP HPLC இன் மற்றொரு நன்மை, சிறிய அளவிலான ஆவியாகும் கரைப்பான்களில் பின்னங்களைச் சேகரிக்கும் திறன் ஆகும், இது மேலும் வெகுஜன நிறமாலை பகுப்பாய்வை எளிதாக்குகிறது. ஒரு விதியாக, 0.1% ட்ரைஃப்ளூரோஅசெடிக் மற்றும் ஃபார்மிக் அமிலங்கள் ஆவியாகும் கரைப்பான்களாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. டிரிஃப்ளூரோஅசெட்டிக் அமிலம் UV பகுதியில் 205 nm வரை வெளிப்படையானது, இது சிக்கலான கலவைகளின் குரோமடோகிராபியின் போது ஒரு சிறந்த நன்மையாகும். கூடுதலாக, பெப்டைடுகள் ட்ரைஃப்ளூரோஅசெடிக் அமிலத்தில் மிகவும் கரையக்கூடியவை. தலைகீழ் நிலைகளில் இருந்து பெப்டைட்களை நீக்குவது பொதுவாக ஒரு கரிம மாற்றியமைப்புடன் ஒரு சாய்வு முறையில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. மிகவும் பொதுவான கரிம மாற்றியானது அசிட்டோனிட்ரைல் ஆகும். இது 200 nm வரை UV பகுதியில் வெளிப்படையானது மற்றும் நல்ல தேர்வுத்திறன் கொண்டது. 6

7 பெப்டைட்களின் பகுப்பாய்விற்கு RP HPLC இன் பரவலான பயன்பாட்டிற்கு உந்துவிக்கும் மற்றொரு காரணி, அவற்றின் குரோமடோகிராஃபிக் நடத்தையை கணிக்கும் திறன் ஆகும். அமினோ அமில கலவையை அறிந்து கொள்வதன் மூலம் கணிக்க முடியும், முதலில் ஜே. மீக் கூறினார். தலைகீழ் கட்டத்தில் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அவற்றின் கலவையில் சேர்க்கப்பட்டுள்ள அமினோ அமில எச்சங்களின் ஹைட்ரோபோபிசிட்டியால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. நறுமண அல்லது பெரிய அலிபாடிக் சங்கிலிகளைக் கொண்ட அமினோ அமிலங்கள் தக்கவைக்க முக்கிய பங்களிப்பாகும். மேற்கூறியவற்றின் அடிப்படையில், பெப்டைடை உருவாக்கும் அமினோ அமில எச்சங்களின் பங்களிப்புகளின் கூட்டுத்தொகையாக, தலைகீழ் கட்டத்தில் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவைக் கணக்கிட மீக் முன்மொழிந்தார். அவர் ஒரு நேரியல் (சேர்க்கை) “கலவை தக்கவைப்பு” மாதிரியை முன்மொழிந்தார்: V R = V 0 + Z N* + Z C* + Z i (1) V R பெப்டைட் தக்கவைப்பு தொகுதி; v 0 என்பது நிரலின் இலவச தொகுதி; Z N* மற்றும் Z C* ஆகியவை முறையே இலவச -NH 2 மற்றும் - அல்லது பெப்டைட்டின் மாற்றியமைக்கப்பட்ட முனையக் குழுக்களின் பங்களிப்புகள் ஆகும்; Z i என்பது i-th அமினோ அமிலத்தின் (தக்க நிலைமாறி) பங்களிப்பாகும். மீக் 25 பெப்டைட்களை சாய்வு RP HPLC நிலைமைகளின் கீழ் குரோமடோகிராஃப் செய்து, தலைகீழ் சிக்கலைத் தீர்த்து, அமினோ அமிலம் தக்கவைப்பு மாறிலிகளைக் கணக்கிட்டார். சார்பு V R (calc.)=f(v R (exp.)) இன் தொடர்பு குணகங்கள் 0.997 (ph 2.1 இல்) மற்றும் 0.999 (ph 7.4 இல்). உயர் தொடர்பு குணகங்கள் இருந்தபோதிலும், இந்த மாதிரியானது இயற்பியல் அர்த்தத்துடன் முரண்படுகிறது, ஏனெனில் இந்த வழியில் பெறப்பட்ட அமினோ அமிலம் தக்கவைப்பு மாறிலிகள் அவற்றின் ஹைட்ரோபோபிசிட்டியில் உண்மையான வேறுபாடுகளை பிரதிபலிக்காது மற்றும் சில பங்களிப்புகள் எதிர்மறை மதிப்புகளைக் கொண்டுள்ளன. கூடுதலாக, பல உண்மைகள் உள்ளன, இதன்படி பெப்டைடில் உள்ள அமினோ அமில எச்சங்களின் எண்ணிக்கையில் அதிகரிப்புடன், தக்கவைப்பை தீர்மானிக்கும் தலைகீழ் கட்டத்துடன் அதன் ஹைட்ரோபோபிக் தொடர்பின் மேற்பரப்பு நேரியல் இல்லாமல் அதிகரிக்கிறது. பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவுகள் அமினோ அமில எச்சங்களின் பங்களிப்புகளின் கூட்டுத்தொகையிலிருந்து கணக்கிடப்படுகின்றன என்ற அனுமானத்தையும் படைப்பின் ஆசிரியர்கள் செய்தனர். பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவைக் கணக்கிட, அவர்கள் பின்வரும் மாதிரியை முன்மொழிந்தனர்: V R = A* ln (1+ Z j * n j) + B (2) 7

8 Z j என்பது அனுபவத் தக்கவைப்பு அளவுரு ஆகும், இது அமினோ அமிலங்களின் ஹைட்ரோபோபிசிட்டியின் அடிப்படையில் கணக்கிடப்படுகிறது; A மற்றும் B மாறிலிகள்; n j என்பது பெப்டைடில் உள்ள j அமினோ அமில எச்சங்களின் எண்ணிக்கை. இந்த மாதிரி கணக்கிடப்பட்ட மற்றும் சோதனை பெப்டைட் தக்கவைப்பு தொகுதிகளுக்கு இடையே ஒரு நல்ல தொடர்பை வழங்குகிறது. மாதிரியின் தீமை என்னவென்றால், இது ஒரு குறிப்பிட்ட குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்புக்கு மட்டுமே செல்லுபடியாகும் (கொடுக்கப்பட்ட சாய்வு, நிலையான ஓட்ட விகிதம், மொபைல் மற்றும் நிலையான கட்டங்கள் கொண்ட நேரியல் சாய்வு). எனவே, இந்த மாதிரியின் பயன்பாடு மிகவும் குறைவாக உள்ளது. எனவே, மதிப்பாய்வின் கீழ் உள்ள படைப்பின் ஆசிரியர்கள் சாய்வு நீக்குதல் கோட்பாட்டின் அடிப்படையில் மற்றொரு மாதிரியை முன்மொழிந்தனர், இது ஒரு பரந்த அளவிலான குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்புகளுக்கு பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவைக் கணக்கிட அனுமதிக்கிறது. நிலையான கட்டத்துடன் பெப்டைட்டின் ஹைட்ரோபோபிக் தொடர்புகளின் கிடைக்கக்கூடிய பகுதி அதன் மூலக்கூறு எடையின் 2/3 சக்தியின் விகிதத்தில் மாறுபடும் என்பதைக் கருத்தில் கொண்டு, ஆசிரியர்கள் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவைக் கணக்கிடுவதற்கான ஒரு செயல்பாட்டைத் தேர்ந்தெடுத்தனர்: V R = f (3 ) ஒரு குறிப்பிட்ட குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்புகளின் பண்புகளைப் பொறுத்து a, b, c ஆகியவை மாறிலிகளாகும், இதற்காகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட 15 பெப்டைட்களின் குரோமடோகிராஃபி தரவுகளிலிருந்து சோதனை முறையில் தீர்மானிக்கப்பட்டது. சார்பு V R (calc.)=f(v R (exp.)) இன் தொடர்பு குணகம் 0.98 ஆகும். இந்த முறையின் பயன்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்தும் ஒரு குறிப்பிடத்தக்க குறைபாடானது, ஒரு குறிப்பிட்ட நிறமூர்த்த அமைப்புக்கான மாறிலிகள் a, b மற்றும் c ஆகியவற்றை மாதிரி பெப்டைட்களுடன் பூர்வாங்க சோதனைகளில் இருந்து கணக்கிட வேண்டும், இது மிகவும் உழைப்பு மிகுந்த செயல்முறையாகும். மேலே உள்ள அளவுருக்களுக்கு அமினோ அமிலங்களின் பங்களிப்பை முன்னர் நிர்ணயித்து, அறியப்பட்ட அமினோ அமில வரிசையுடன் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு தொகுதிகள் மற்றும் புற ஊதா நிறமாலை ஆகியவற்றை இந்த வேலை கணக்கிட்டது. இந்த பங்களிப்புகளின் மதிப்புகள் பெப்டைடுகள் குரோமடோகிராஃப் செய்யப்பட்ட அதே நிலைமைகளின் கீழ் பல அலைநீள ஒளிக்கதிர் கண்டறிதல் மூலம் பெறப்பட்ட தனிப்பட்ட அமினோ அமிலங்களின் தீர்வுகளின் குரோமடோகிராம்களில் இருந்து சோதனை முறையில் கண்டறியப்பட்டது. படைப்பின் ஆசிரியர்கள் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு தொகுதிகளை கணக்கிடுவதற்கு பின்வரும் சமன்பாட்டை முன்மொழிந்தனர்: V R = 209 [(Z i) + Z C*+N* + V 0 ] 1/3 990 (4) Z i என்பது இதன் தக்கவைப்பு குணகம் அமினோ அமிலம் "நான்"; நெடுவரிசையின் V 0 இலவச தொகுதி; Z C*+N* என்பது பெப்டைட்டின் முனையக் குழுக்களின் மொத்த தக்கவைப்பு மாறிலி ஆகும். பெப்டைட்களின் புற ஊதா நிறமாலையை கணக்கிடும் போது, ​​பெப்டைட்டின் ஸ்பெக்ட்ரம் அதன் அனைத்து கட்டமைப்பு கூறுகளின் நிறமாலையின் கூட்டுத்தொகையாக கருதப்பட்டது. முன்மொழியப்பட்ட முறையை சோதிக்க 8 இருந்தன

9, 30 பெப்டைடுகள் குரோமடோகிராஃப் செய்யப்பட்டன, மேலும் கணக்கிடப்பட்ட மற்றும் சோதனை ரீதியாக கண்டறியப்பட்ட தக்கவைப்பு தொகுதிகளுக்கு இடையிலான தொடர்பு குணகம் 0.95 ஆகும். பெப்டைட்களின் புற ஊதா நிறமாலையைக் கணக்கிடுவதற்கான முன்மொழியப்பட்ட முறையும் திருப்திகரமான முன்கணிப்பு ஆற்றலைக் கொண்டுள்ளது. இந்த வேலையில், அசிட்டோனிட்ரைல் மற்றும் லித்தியம் பெர்குளோரேட்டின் (0.2 M LiCLO M HClO 4) நீர்நிலை கரைசல், இது ஒரு ஆவியாகாத பொருளாகும், இது பெப்டைட்களின் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரிக் அடையாளத்தை மிகவும் கடினமாக்குகிறது. எனவே, அசிட்டோனிட்ரைல் - ட்ரைஃப்ளூரோஅசெட்டிக் அமிலம் என்ற கலவையின் மொபைல் கட்டத்தைப் பயன்படுத்தி ஒரு முறையை உருவாக்குவது எங்களுக்கு பொருத்தமானதாகத் தோன்றியது, இதன் அனைத்து கூறுகளும் ஆவியாகும் பொருட்கள் மற்றும் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரிக் பகுப்பாய்வில் தலையிடாது. 9

10 3. பரிசோதனை HPLC ஆனது மிலிக்ரோம் A-02 குரோமடோகிராஃபில் 2x75 மிமீ நெடுவரிசையில் ProntoSIL C 18 AQ கட்டத்துடன் (Bischoff Analysentechnik und Geräte GmbH, Germany) பின்வரும் நிபந்தனைகளின் கீழ் மேற்கொள்ளப்பட்டது: eluent A: 0.0.01 M; எலுயன்ட் பி: அசிட்டோனிட்ரைல்; நேரியல் சாய்வு: 40 நிமிடம் 5 முதல் 100% B வரை; ஓட்ட விகிதம்: 100 µl/min; நெடுவரிசை வெப்பநிலை: 40 சி; கண்டறிதல்: 210, 220, 230, 240, 250, 260, 280 மற்றும் 300 nm, τ = 0.18 s; மாதிரி அளவு: 4 μl. குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பைச் சோதிப்பதற்கான தீர்வு: KBr - 0.2 mg/ml; யூரிடின் - 0.2 மிகி / மிலி; காஃபின்-1 மி.கி/மிலி; m-nitroaniline - 0.1 mg/ml; o-nitroaniline-0.1 mg/ml; தண்ணீரில் 2% அசிட்டோனிட்ரைல் கரைப்பான். குறைந்தபட்சம் 98% முக்கிய பொருளின் நிறை பகுதியைக் கொண்ட அனைத்து எதிர்வினைகளும். அமினோ அமிலங்கள் (சர்வா, ஜெர்மனி), அசிட்டோனிட்ரைல் "கிரேடு 0" (NPF "கிரியோக்ரோம்", செயின்ட் பீட்டர்ஸ்பர்க்), மற்றும் அன்ஹைட்ரஸ் ட்ரைஃப்ளூரோஅசெடிக் அமிலம் (ஐசிஎன் பயோமெடிக்கல்ஸ், அமெரிக்கா) ஆகியவை வேலையில் பயன்படுத்தப்பட்டன. பெப்டைட் மாதிரிகள் வி.வி. சாமுகோவ் (NPO "வெக்டர்", நோவோசிபிர்ஸ்க்) மற்றும் ஐ.வி. நாசிமோவ் (IBch RAS, மாஸ்கோ). குரோமடோகிராஃப்ட் கரைசல்களில் உள்ள அமினோ அமிலங்களின் செறிவு 0.2 1 mg/ml, பெப்டைடுகள் 0.1 2 mg/ml. மல்டிகிரோம் நிரலைப் பயன்படுத்தி குரோமடோகிராம்கள் செயலாக்கப்பட்டன (ஆம்பர்சென்ட் ஜேஎஸ்சி, மாஸ்கோ). VR ஐக் கணக்கிட, 8 அலைநீளங்கள் (S λ) மற்றும் பெப்டைட் குரோமடோகிராம்களின் வரைகலை பிரதிநிதித்துவத்தில் கண்டறியப்படும் போது நிறமூர்த்த சிகரங்களின் பகுதிகள், "CHROM P" நிரல் (ZAO இன்ஸ்டிடியூட் ஆஃப் குரோமடோகிராபி "எகோநோவா", நோவோசிபிர்ஸ்க்) பயன்படுத்தப்பட்டது. படம் 1 இல் காட்டப்பட்டுள்ள வளைவின் நேர்கோட்டு மைக்ரோசாஃப்ட் எக்செல் நிரலைப் (மைக்ரோசாப்ட் கார்ப்பரேஷன்) பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்பட்டது. 10

11 4. முடிவுகள் மற்றும் அவற்றின் கலந்துரையாடல் 4.1. குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பின் ஸ்திரத்தன்மையை கண்காணித்தல் முறையினால் ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட ஒரு செயல்முறையைப் பயன்படுத்தி குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பின் நிலைத்தன்மை கண்காணிக்கப்பட்டது. சோதனைத் தீர்வு குரோமடோகிராஃப் செய்யப்பட்டது மற்றும் 14 அளவுருக்கள் அதன் விளைவாக வரும் குரோமடோகிராம்களில் இருந்து கணக்கிடப்பட்டன, ஒவ்வொன்றும் குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பின் ஒரு குறிப்பிட்ட குறிகாட்டியைக் கட்டுப்படுத்துகிறது: VR புரோமைடு அயன் நெடுவரிசையின் இலவச அளவு; யூரிடின் நிறமாலை விகிதம் S 280/S 250; 250 முதல் 280 nm வரையிலான டிடெக்டர் டியூனிங் துல்லியம்; ஸ்பெக்ட்ரல் விகிதம் S 260 /S 280 காஃபின் லீனியர் வரம்பு கண்டறிதல்; நிறமாலை விகிதம் S 260/S 230 m - எலுவென்ட் A இன் நைட்ரோஅனிலின் பொருத்தம் உச்சநிலையின் சமச்சீரற்ற தன்மை A 10% மீறல் நெடுவரிசை பேக்கிங்கில் , S 210 மாதிரி வீரியம் துல்லியம். மாதிரி கரைசலின் நிறமாலை மற்றும் நிறமாலை அளவுருக்களின் கால அளவீடுகள், பயன்படுத்தப்படும் நிறமூர்த்த அமைப்பின் செயல்பாட்டின் மறுஉருவாக்கம் சரிபார்க்க எங்களுக்கு அனுமதித்தது. சோதனை முடிவுகள் அட்டவணை 2 இல் காட்டப்பட்டுள்ளன. அட்டவணை 2. குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பைச் சோதிப்பதன் முடிவுகள், n = 8. பொருள் அளவுரு 11 அளவுருவின் சராசரி மதிப்பு S r (%) Bromide V R, µl 148 1.0 Uridine S 280 /S 250 0.53 1. S 260 /S 280 0.73 0.6 m-nitroaniline S 260 /S 230 0.80 1.0 o-nitroaniline V R, µl,6 S 220 /S 210 1.71 0.5 S 230 /S 210 /S 210 1.720 1.720 260 /எஸ் 210 0.58 0.9 S 250 /S 210 0.40 1.4 S 280 /S 210 0.59 0.9 S 300 /S 210 0.32 1.2 A 10% 1.05 1.1 வெளியீடு சமிக்ஞை (உச்ச பகுதி. 210) எஸ். µl 25.00 1.4

12 S r இன் பெறப்பட்ட மதிப்புகள், விவரிக்கப்பட்ட நிறமூர்த்த அமைப்பின் நிலைத்தன்மையைப் பற்றி ஒரு முடிவுக்கு வர அனுமதிக்கிறது. peptides GG மற்றும் GGG பிரிவு 3 இல் குறிப்பிடப்பட்டுள்ள நிபந்தனைகளின் கீழ். சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்படும் அமினோ அமிலம் தக்கவைப்பு குணகங்கள்: Z i = V Ri V 0 Z C*+N* (5) V Ri என்பது "i" என்ற அமினோ அமிலத்தின் தக்கவைப்பு அளவு; நெடுவரிசையின் V 0 இலவச தொகுதி (திருப்பு தொகுதி Br -, இந்த குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பில் இது 148 µl ஆகும்); Z C+N என்பது பெப்டைட்டின் முனையக் குழுக்களின் மொத்த தக்கவைப்பு மாறிலி ஆகும். Z C+N சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டது: Z C*+N* = V R (G) V 0 ((6) இதில் V R (G) என்பது கிளைசின், μL; V R (GGG) மற்றும் v R (GG) GGG மற்றும் GG பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு தொகுதிகள் , µl இறுதிக் குழுக்களின் தக்கவைப்பு குணகங்களின் கூட்டுத்தொகை [(-NH 2) + (-CONH 2)] குழுக்களின் தக்கவைப்பு குணகங்களின் கூட்டுத்தொகைக்கு சமமாக கருதப்படுகிறது [(- NH 2) + (-)]. பெப்டைட்களின் கட்டமைப்பு கூறுகளின் குரோமடோகிராஃபிக் தரவு மற்றும் கணக்கிடப்பட்ட தக்கவைப்பு மாறிலிகள் அட்டவணை 3 இல் கொடுக்கப்பட்டுள்ளன. அட்டவணை 3. அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு தொகுதிகள் GG மற்றும் GGG பெப்டைட்களின் கட்டமைப்பு கூறுகளின் தக்கவைப்பு மாறிலிகள் குறியீடு V R , μl Z i, μl குறியீடு V R, μl Z i, μl N P S V G M Q Y D I H L T F E W K GG C GGG A (C*+N*) முடிவு - 25 R

13 நேரியல் மாதிரி "கலவை தக்கவைப்பு" வேலையில் முன்மொழியப்பட்ட நேரியல் மாதிரியின் கட்டமைப்பிற்குள் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவைக் கணிக்க, நாங்கள் 28 பெப்டைட்களின் (அட்டவணை 4) தக்கவைப்பு தொகுதிகளைக் கணக்கிட்டு, பெறப்பட்ட தரவை சோதனை ரீதியாகக் கண்டறியப்பட்ட தரவுகளுடன் ஒப்பிட்டோம் (படம் 1) அட்டவணை 4. பெப்டைட் தக்கவைப்பு தொகுதிகள் (நேரியல் மாதிரி) பரிசோதனை முறையில் கண்டுபிடிக்கப்பட்டு கணக்கிடப்பட்டது. பெப்டைட் V R (exp.), µl V R (calc.), µl 1 GG GGG AS GRGDS TKPR WAGGDASGE GL MY KPVGKKRRPVKVYP W-D-YGGDASGE W-D-AGGDA NCMLDY SYGFGDY RPPGFSPFR MEHFRWG RVYIHPF YGGFLRRIRP KLK YGGFM DRVYIHPF QATVGDINTERPGMLDFTGK ELYENKRPRRPYIL DRVYIHPFHL Y-D-AGFL RPKPQQFFGLM -NH PQQFFGLM-NH GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ-NH

14 V VR R(calc.), µl VR(exp.), R µl படம். 1. சோதனை ரீதியாக கண்டறியப்பட்ட மற்றும் கணக்கிடப்பட்ட பெப்டைட் தக்கவைப்பு தொகுதிகளின் ஒப்பீடு. விஆர் மதிப்புகளின் கணக்கீடு சமன்பாடு (1) படி மேற்கொள்ளப்பட்டது. பெறப்பட்ட தரவுகளிலிருந்து பார்க்க முடியும், நேரியல் மாதிரியானது ஒப்பீட்டளவில் ஹைட்ரோஃபிலிக் பெப்டைட்களுக்கு மட்டுமே திருப்திகரமான முடிவுகளை அளிக்கிறது; ஹைட்ரோபோபிக் பெப்டைட்களுக்கு, கணக்கிடப்பட்ட மதிப்புகள் சோதனை மதிப்புகளை விட அதிகமாக இருக்கும். இதே போன்ற முடிவுகள் படத்தில் காட்டப்பட்டுள்ள வளைவின் நேர்கோட்டு மாதிரியான நேரியல் அல்லாத "கலவை தக்கவைப்பு" மாதிரியில் பெறப்பட்டன. 1 சமன்பாட்டை அளிக்கிறது: V R = 173 [(n Z i) + V 0 ] 1/3 785 (7) கணக்கிடப்பட்ட மதிப்புகள் மற்றும் 28 பெப்டைட்களுக்கான சோதனை ரீதியாக கண்டறியப்பட்ட தக்கவைப்பு தொகுதிகளின் ஒப்பீடு அட்டவணை 5 மற்றும் படம்.

15 V R (calc.), µl VR VR (exp.), µl V R படம். 2. சோதனை முறையில் கண்டறியப்பட்ட மற்றும் கணக்கிடப்பட்ட பெப்டைட் தக்கவைப்பு தொகுதிகளின் ஒப்பீடு. விஆர் மதிப்புகளின் கணக்கீடு சமன்பாடு (7) படி மேற்கொள்ளப்பட்டது. 15

16 அட்டவணை 5. பெப்டைட் தக்கவைப்பு தொகுதிகள் (நேரியல் அல்லாத மாதிரி) சோதனை முறையில் கண்டறியப்பட்டு கணக்கிடப்பட்டது. பெப்டைட் V R (exp.), µl V R (calc.), µl 1 GG GGG AS GRGDS TKPR WAGGDASGE GL MY KPVGKKRRPVKVYP W-D-YGGDASGE W-D-AGGDA NCMLDY SYGFGDY RPPGFSPFR MEHFRWG RVYIHPF YGGFLRRIRP KLK YGGFM DRVYIHPF QATVGDINTERPGMLDFTGK ELYENKRPRRPYIL DRVYIHPFHL Y-D-AGFL RPKPQQFFGLM -NH PQQFFGLM-NH GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ-NH சார்பு V R (calc.)=f(v R (exp.)) இன் தொடர்பு குணகம் 0.96. பின் இணைப்பு 11 பெப்டைட்களின் மாதிரி கலவையின் சோதனை மற்றும் கணக்கிடப்பட்ட குரோமடோகிராம்களைக் காட்டுகிறது. 16

17 4.3. பெப்டைட்களின் UV ஸ்பெக்ட்ராவின் கணக்கீடு பெப்டைட்களின் கட்டமைப்பு கூறுகளின் குறிப்பிட்ட நிறமாலை குணகங்கள் வேலையில் இருந்து எடுக்கப்பட்டன, ஏனெனில் நாம் பயன்படுத்தும் குரோமடோகிராஃபிக் அமைப்பில், ஸ்பெக்ட்ரல் விகிதங்களின் சரியான கணக்கீடு முறையான சிகரங்களால் தடைபடுகிறது, அத்துடன் ஹைட்ரோஃபிலிக் அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் குறுகிய பெப்டைட்களின் மோசமான தக்கவைப்பு. குறிப்பிட்ட நிறமாலை குணகங்களின் மதிப்புகள் அட்டவணை 6 இல் கொடுக்கப்பட்டுள்ளன. அட்டவணை 6. பெப்டைட்களின் UV-உறிஞ்சும் கட்டமைப்பு கூறுகளின் ஸ்பெக்ட்ரல் குணகங்கள் C = 1 mm இல் உள்ள குரோமடோகிராஃபிக் சிகரங்களின் பரப்பளவு மற்றும் 4 μl மாதிரி அளவு, ( e.o.p. μl). λ, nm W F Y H C M R Q N E D N*+C* PS, இதில் S C*+N* ஸ்பெக்ட்ரல் குணகங்களின் கூட்டுத்தொகை (-NH+ -) பெப்டைட், S PS பெப்டைட் பிணைப்பை உறிஞ்சுதல். பெப்டைட்களின் நிறமாலை பண்புகள் C = 1 mM இல் அவற்றின் நிறமூர்த்த சிகரங்களின் பரப்பளவு மற்றும் 4 μl மாதிரி அளவு சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டது: a λ பெப்டைட் = a λ N*+C* + (m-1) a λ λ PS + a i (9) இதில் m என்பது பெப்டைடில் உள்ள அமினோ அமில எச்சங்களின் மொத்த எண்ணிக்கை, a λ N*+C* என்பது பெப்டைட்டின் முனையக் குழுக்களின் நிபந்தனை உச்சப் பகுதி மற்றும் λ PS என்பது குறிப்பிட்டது. அலைநீளம் λ λ இல் பெப்டைட் பிணைப்பை உறிஞ்சுதல், மற்றும் i அலைநீளம் λ க்கான அமினோ அமில எச்சங்களின் நிறமாலை பண்புகள் ஆகும். சமன்பாடு (9) இல் சேர்க்கப்பட்டுள்ள அளவுகள் பின்வருமாறு பெறப்பட்டன. அலைநீளம் λ=210 nm (a 210 i) இல் உள்ள பெப்டைட்களின் கட்டமைப்பு கூறுகளின் குறிப்பிட்ட நிறமாலை பண்புகள், 1 mM செறிவு மற்றும் 4 μl மாதிரி அளவு கொண்ட தீர்வுக்கான அவற்றின் நிறமூர்த்த சிகரங்களின் பரப்பளவாக கணக்கிடப்பட்டது. சமன்பாட்டிற்கு: a 210 i = a 210 AA a 210 N*+C *, (10) இதில் 210 AA என்பது அமினோ அமிலத்தின் உச்சப் பகுதி; a 210 N*+C* என்பது பெப்டைட்டின் முனையக் குழுக்களின் வழக்கமான உச்சப் பகுதி. 210 N*+C* இன் மதிப்பு 210 Leu க்கு சமமாக எடுக்கப்பட்டது, ஏனெனில் NH 2 குழுக்கள் மட்டுமே nm அலைநீள வரம்பில் உள்ள Leu குரோமோபோர்களாகும். 17

18 பெப்டைட் பிணைப்பின் குறிப்பிட்ட உறிஞ்சுதல் (ஒரு 210 பிஎஸ்) GGG மற்றும் GG பெப்டைட்களின் குறிப்பிட்ட உறிஞ்சுதல்களுக்கு இடையேயான வித்தியாசமாக கணக்கிடப்பட்டது: a 210 PS = a GGG a GG (11) அலைநீளத்திற்கான நிறமாலை பண்புகள் λ சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டது. : a λ i = a 210 i (S λ /S 210), (12) இதில் S λ /S 210 என்பது அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பெப்டைடுகள் GG மற்றும் GGG ஆகியவற்றின் நிறமாலை விகிதங்கள் ஆகும், இவை அலைநீளங்கள் λ க்கு உச்ச பகுதிகளின் விகிதங்கள் ஆகும். λ = 210 nm இல் உச்ச பகுதி. 28 பெப்டைட்களுக்கான கணக்கிடப்பட்ட நிறமாலை விகிதங்கள் S λ /S 210 மற்றும் சோதனை முறையில் பெறப்பட்டவற்றுடன் ஒப்பிடுவதை அட்டவணை 7 காட்டுகிறது. பெப்டைட்களின் சோதனை ரீதியாக பெறப்பட்ட மற்றும் கணக்கிடப்பட்ட நிறமாலை விகிதங்கள் ஒருவருக்கொருவர் நல்ல உடன்பாட்டில் உள்ளன. பெரும்பாலான சந்தர்ப்பங்களில், வேறுபாடுகள் 0.06 க்கு மேல் இல்லை. சில பெப்டைட்களுக்கு (5, 9, 12, 16, 18, 22, 23, 26, 27), கணிக்கப்பட்ட மற்றும் சோதனை நிறமாலை விகிதங்களில் குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் காணப்படுகின்றன. இந்த வேறுபாடுகளுக்கான காரணங்கள் கூடுதல் ஆராய்ச்சி தேவை. அட்டவணை 7. பெப்டைட்களின் நிறமாலை விகிதங்களின் சோதனை மற்றும் கணக்கிடப்பட்ட மதிப்புகளின் ஒப்பீடு. அலைநீளங்களுக்கான பெப்டைட் மதிப்பு நிறமாலை விகிதங்கள் S λ /S 210 λ(nm): Vych Exp Vych Exp Vych Exp Vych Exp வைச்

19 பெப்டைட் மதிப்பு நிறமாலை விகிதங்கள் S λ /S 210 அலைநீளங்களுக்கான λ(nm): Vych Exp Vych Exp Vych Exp

20 பெப்டைட் மதிப்பு ஸ்பெக்ட்ரல் விகிதங்கள் S λ /S 210 அலைநீளங்களுக்கான λ(nm): Vt Exp V V Exp பெறப்பட்ட தரவுகளிலிருந்து, அறியப்பட்ட கலவையின் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவையும் சாய்வு நிலைமைகளின் கீழ் அவற்றின் UV நிறமாலையையும் கணக்கிடுவதற்கான விவரிக்கப்பட்ட முறை தெளிவாகிறது. RP HPLC திருப்திகரமான முன்கணிப்பு சக்தியைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் பெப்டைட்களின் கலவைகளைப் பிரிப்பது தொடர்பான ஆய்வுகளில் பயனுள்ளதாக இருக்கும். 20

21 5. முடிவுரைகள் 1. தனிமைப்படுத்தப்பட்ட பின்னங்களை நேரடியாக அறிமுகப்படுத்துவதற்கு ஏற்ற ஒரு ஆவியாகும் மொபைல் கட்டத்தைப் பயன்படுத்தி ஒரு Milichrome A-02 குரோமடோகிராஃபில் கிரேடியன்ட் RP HPLC பயன்முறையில் அறியப்பட்ட கலவையின் பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு அளவைக் கணிக்க ஒரு முறை உருவாக்கப்பட்டுள்ளது. ஒரு மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமீட்டர். 2. பெப்டைட்களைப் பிரிக்கப் பயன்படுத்தப்படும் மொபைல் கட்டத்தில் நேரடியாக 210, 220, 230, 240, 250, 260, 280 மற்றும் 300 nm அலைநீளங்களில் பெப்டைட்களின் ஒளியியல் உறிஞ்சுதலைக் கணக்கிடுவதற்கான ஒரு முறை உருவாக்கப்பட்டுள்ளது. 3. வளர்ந்த முறைகள் 28 மாதிரி பெப்டைட்களுக்கு சோதிக்கப்பட்டன. தொடர்புடைய சோதனை மதிப்புகளுடன் கணக்கிடப்பட்ட தக்கவைப்பு தொகுதிகளின் தொடர்பு குணகம் 0.96 ஆகும். கணக்கிடப்பட்ட மற்றும் சோதனை ரீதியாக பெறப்பட்ட நிறமாலை விகிதங்கள் S λ / S 210 க்கு இடையே உள்ள முரண்பாடு 0 க்கு மேல் இல்லை, குறிப்புகள் 1. ரெஸ்னிகோவ் வி.ஏ., ஷ்டீங்கார்ட்ஸ் வி.டி. அமினோ அமிலங்கள். நோவோசிபிர்ஸ்க்: NSU, S. Dawson R., Elliott D., Elliott W., Jones K. கையேடு ஆஃப் எ உயிர் வேதியியலாளர். மாஸ்கோ: மிர், ப. 3. ஓவ்சின்னிகோவ் யு.ஏ. உயிரியல் வேதியியல். மாஸ்கோ: அறிவொளி, ப. 4. உயிர் வேதியியலில் உயர்-செயல்திறன் திரவ நிறமூர்த்தம் (ஹென்ஷென் ஏ. திருத்தியது). மாஸ்கோ: மிர், ப. 5. மீக் ஜே.எல். //புராக். நாட்ல். அகாட். அறிவியல் அமெரிக்கா. 1980, வி. 77. எண்.3. பி சகாமோடோ ஒய்., கவாகாமி என்., சசகாவா டி. // ஜே. குரோமடோக்ர் வி பி சசகாவா டி., ஒகுயாமா டி., டெல்லர் டி.சி. // ஜே. குரோமடோக்ர் வி பி பிரவுன் சி.ஏ., பென்னட் எச்.பி.ஜே., சாலமன் எஸ். // அனல். பயோகெம் வி.124. பி மீக் ஜே.எல்., ரோசெட்டி இசட்.எல். // ஜே. குரோமடோக்ர் வி பி அசரோவா ஐ.என்., பாரம் ஜி.ஐ., கோல்ட்பர்க் இ.எல். // பயோஆர்கானிக் கெமிஸ்ட்ரி. பத்திரிகையில். 11. UV உறிஞ்சும் பொருட்களின் வெகுஜன செறிவு. உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ நிறமூர்த்தத்தைப் பயன்படுத்தி அளவீடுகளைச் செய்வதற்கான முறை. FR இர்குட்ஸ்க்

22 7. 11 பெப்டைட்களின் கலவையின் பின் இணைப்பு பரிசோதனை (A) மற்றும் கணக்கிடப்பட்ட (B) குரோமடோகிராம்கள். அட்டவணை A 0.5 e.o.p nm B nm தொகுதிக்கு ஏற்ப பெப்டைட் எண்கள், µl

கல்விக்கான ரஷ்ய கூட்டமைப்பு ஃபெடரல் ஏஜென்சியின் கல்வி மற்றும் அறிவியல் அமைச்சகம் நோவோசிபிர்ஸ்க் மாநிலப் பல்கலைக்கழக இயற்கை அறிவியல் துறை: பகுப்பாய்வு வேதியியல் ஆய்வறிக்கை

விரிவுரை 1: புரதங்களின் முதன்மை அமைப்பு - அமினோ அமிலங்கள் 1 புரதங்களின் பன்முகத்தன்மை உடலின் பல உயிரியல் செயல்பாடுகள் புரதங்களால் மேற்கொள்ளப்படுகின்றன. இந்த செயல்பாடுகளில் ஆக்ஸிஜனின் போக்குவரத்து மற்றும் சேமிப்பு ஆகியவை அடங்கும் (ஹீமோகுளோபின்

273 UDC 543. 544 உயர் செயல்திறன் திரவம் லோ முறை மூலம் அமினோ அமிலங்களின் அமினோ அமிலங்களின் டெரிவேட்டிவ் என்ன்டியோமர்களைப் பிரித்தல். லோ.

1. புரதங்கள் மற்றும் என்சைம்களில் கோவலன்ட் பிணைப்புகள். உதாரணங்கள் கொடுங்கள். டிக்கெட் 1 2. வெவ்வேறு உப்பு செறிவுகளின் முன்னிலையில் பின்னம் மூலம் புரதங்களைப் பிரிப்பதற்கான அடிப்படை என்ன? இந்த முறை என்ன அசுத்தங்களை நீக்குகிறது?

தலைப்பு 23. அமின்கள். அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பெப்டைடுகள் தலைப்பு உள்ளடக்கம்: அமின்கள், அவற்றின் வகைப்பாடு மற்றும் பெயரிடல். அமின்களின் தயாரிப்பு மற்றும் இரசாயன பண்புகள் முறைகள். அனிலின், அதன் மின்னணு அமைப்பு. அடிப்படை பண்புகளின் சார்பு

டி.பி. வவிலோவா ஏ.இ. மெட்வெடேவ் உயிரியல் வேதியியல் வாய்வழி குழியின் உயிர்வேதியியல் ரஷ்ய கூட்டமைப்பின் கல்வி மற்றும் அறிவியல் அமைச்சகம் பாடநூல் உயர் தொழில்முறை கல்விக்கான மாநில பட்ஜெட் கல்வி நிறுவனத்தால் பரிந்துரைக்கப்பட்டது "முதல் மாஸ்கோ மாநில மருத்துவ பல்கலைக்கழகம் பெயரிடப்பட்டது

மாஸ்கோ இயற்பியல் மற்றும் தொழில்நுட்ப நிறுவனம் (மாநில பல்கலைக்கழகம்) மூலக்கூறு மற்றும் உயிரியல் இயற்பியல் துறை இயற்பியல் ஆராய்ச்சி முறைகள் விரிவுரை 9 திரவ நிறமூர்த்தம் முறைகள் மற்றும் தொழில்நுட்பம்

ரஷ்ய கூட்டமைப்பின் சுகாதார அமைச்சகம் மருந்தகக் கட்டுரை Indapamide FS.2.1.0017.15 Indapamide Indapamidum FS 42-0303-08 N-[(2RS)-2-Methyl-1-1-Methyl-2, 3-சல்பாமாயில் -4-குளோரோபென்சாமைடு

அமினோ அமிலங்கள். பெப்டைட்ஸ். புரதங்கள் அமினோ அமிலங்கள் கார்பாக்சிலிக் அமிலங்கள் ஆகும், இதில் ஒன்று அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட ஹைட்ரஜன் அணுக்கள் ஹைட்ரோகார்பன் ரேடிக்கலில் உள்ள அமினோ குழுக்களால் மாற்றப்படுகின்றன. உறவினர் நிலையைப் பொறுத்து

உயிர் வேதியியல் ரஷ்ய அறிவியல் அகாடமியின் தொடர்புடைய உறுப்பினரால் திருத்தப்பட்டது, பேராசிரியர் E.S. SEVERINA 5வது பதிப்பு, திருத்தப்பட்ட மற்றும் விரிவுபடுத்தப்பட்ட பாடநூல் மருத்துவம் மற்றும் மருந்துக்கான கல்வி மற்றும் முறையியல் சங்கத்தால் பரிந்துரைக்கப்பட்டது

1 அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் புரதங்கள் கட்டமைப்பு, பண்புகள் சுருள்கள் பல பகுதிகளில் காணப்படுகின்றன: கட்டிடக்கலையில், புரதங்களின் மேக்ரோமோலிகுல்கள், நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மற்றும் பாலிசாக்கரைடுகளில் கூட (லோரெட்டோ ஹேப்பல், சாண்டா ஃபே, என்எம்/ சர்போ)

உயர் கல்விக்கான ரஷ்ய கூட்டாட்சி மாநில தன்னாட்சி கல்வி நிறுவனம் "நோவோசிபிர்ஸ்க் தேசிய ஆராய்ச்சி மாநில பல்கலைக்கழகம்" இயற்கை அறிவியல் பீடத்தின் கல்வி மற்றும் அறிவியல் அமைச்சகம்

APP குறிப்பு-16/2016LC ஹைட்ரோலைசேட்டில் அமினோ அமிலங்களைக் கண்டறிவதற்கான உதாரணத்தைப் பயன்படுத்தி, குறைந்த-வெப்பநிலை ஆவியாதல் ஒளி சிதறல் டிடெக்டர் MAESTRO ELSD உடன் MaestroHPLC திரவ நிறமூர்த்தத்தின் பகுப்பாய்வு திறன்கள்

8. கேள்விகள் 1. குரோமடோகிராபியை வரையறுக்கவும். 2. குரோமடோகிராஃபியின் என்ன அம்சங்கள் மற்ற பிரிப்பு முறைகளுடன் ஒப்பிடும்போது ஒத்த பண்புகளைக் கொண்ட பொருட்களை சிறப்பாக பிரிப்பதை சாத்தியமாக்குகின்றன. 3. பட்டியல்

RF ஃபெடரல் ஸ்டேட் பட்ஜெட் கல்வி மற்றும் அறிவியல் அமைச்சகம் உயர் நிபுணத்துவ கல்விக்கான கல்வி நிறுவனம் "நிஜ்னி நோவ்கோரோட் மாநில தொழில்நுட்ப பல்கலைக்கழகத்தின் பெயரிடப்பட்டது.

1 கட்டமைப்பு, வினைத்திறன் மற்றும் அமினோ அமிலங்களின் தொகுப்பு முறைகளின் அம்சங்கள். புரதங்கள் ஒரு அமில செயல்பாட்டுக் குழு மற்றும் ஒரு அமினோ குழு இரண்டையும் கொண்டிருக்கும் ஒரு கலவை ஒரு அமினோ அமிலமாகும். அமில-அடிப்படை

அஜிலன்ட் அட்வான்ஸ் பயோ எஸ்இசி அளவு விலக்கு குரோமடோகிராபி பத்திகள் பயோஃபார்மாசூட்டிகல் பகுப்பாய்வின் பலன்கள் மேம்படுத்தப்பட்ட தரவு தர தொழில்நுட்ப கண்ணோட்டத்திற்காக பல உற்பத்தியாளர்களின் நெடுவரிசைகளை ஒப்பிடுக

"தொழிற்சாலை ஆய்வகம். பொருட்களின் கண்டறிதல்" 4. 2007. தொகுதி 73 23 UDC 543.544 ஆம்பிரோமெட்ரிக் கண்டறிதலுடன் தலைகீழ் நிலை HPLC மூலம் மருந்துகளில் அமினோ அமிலங்களை நிர்ணயித்தல் எம். ஜி.

யுடிசி 615.22.074: 543.544.5.068.7.062 டிரைமெட்டாசிடின் டைஹைட்ரோகுளோரைட்டின் அளவு நிர்ணயம் செய்வதற்கான முறைகளின் சரிபார்ப்பு 0.02 கிராம் மாத்திரைகள், மார்யாட் ஜி. இகோர்ஸ்க் மாநிலம்

நவீன தயாரிப்பு ஃப்ளாஷ் குரோமடோகிராபி பகுதி 2* A. அபோலின், Ph.D., "கலாகிம்" [மின்னஞ்சல் பாதுகாக்கப்பட்டது]பி.-எஃப். Icarus, Interchim (பிரான்ஸ்) நவீன தயாரிப்பு முறைகள் குறித்த பொருட்களை நாங்கள் தொடர்ந்து வெளியிடுகிறோம்

சான்றிதழின் பின் இணைப்பு 44071 தாள் 1 அளவிடும் கருவிகளின் வகையின் ஒப்புதலுக்கான அளவீட்டு கருவிகளின் வகை விளக்கம் உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராஃப்கள் "மிலிக்ரோம் ஏ-02", "ஆல்ஃபாக்ரோம் ஏ-02" ("ஆல்ஃபாக்ரோம் ஏ-02)

ரஷ்யாவின் மாநிலத் தரநிலை கிழக்கு சைபீரியன் ஆராய்ச்சி நிறுவனம் இயற்பியல்-தொழில்நுட்ப மற்றும் வானொலி-தொழில்நுட்ப அளவீடுகளின் சான்றிதழ் சான்றிதழ் MVI 02-2002 வெகுஜன செறிவு அளவீடுகளுக்கான முறை

பிரிவு 1 பரிணாம தூரங்களை தீர்மானித்தல் மற்றும் அமினோ அமில வரிசைகளின் பரிணாம விகிதங்கள் 1.1. கோட்பாட்டு அடிப்படைகள் அமினோ அமில வரிசைகளுக்கு இடையிலான பரிணாம தூரம் (p, d) சராசரி

01/2016:20255 2.2.55. பெப்டைட் மேப்பிங் பெப்டைட் மேப்பிங் என்பது புரதங்களை அடையாளம் காண்பதற்கான ஒரு முறையாகும், குறிப்பாக மறுசீரமைப்பு டிஎன்ஏ மூலம் உற்பத்தி செய்யப்படுகிறது. முறை இரசாயன அல்லது நொதியை உள்ளடக்கியது

ரஷ்ய கூட்டமைப்பின் கல்வி மற்றும் அறிவியல் அமைச்சகம் ஃபெடரல் ஸ்டேட் பட்ஜெட் உயர் கல்விக்கான கல்வி நிறுவனம் "சரடோவ் தேசிய ஆராய்ச்சி மாநில பல்கலைக்கழகம்"

புரதங்களின் இணக்கம்: உருவாக்கத்தின் கோட்பாடுகள் 1. புரத மூலக்கூறுகளின் கோவலன்ட் பிணைப்புகளின் இணக்கத்தை தீர்மானிக்கும் பிணைப்புகள்: பெப்டைட் டைசல்பைட் கோவலன்ட் அல்லாத இடைவினைகள்: அயனி இடைவினைகள் ஹைட்ரஜன் பிணைப்பு

கல்விக்கான ஃபெடரல் ஏஜென்சி உயர் தொழில்முறை கல்விக்கான மாநில கல்வி நிறுவனம் "யூரல் மாநில பல்கலைக்கழகம் பெயரிடப்பட்டது. நான். கோர்க்கி" IONC "சூழலியல் மற்றும் இயற்கை மேலாண்மை"

ரஷ்ய கூட்டமைப்பின் சுகாதார அமைச்சகம் மருந்துக் கட்டுரை Ketorolac trometamol FS.2.1.0022.15 Ketorolac trometamol Ketorolacum trometamolum ஆனது GF XII, பகுதி 1, FS 420-7-2016-2013 -1H- பைரோலிசின்-1 -கார்பாக்சிலேட்

மாஸ்கோ இயற்பியல் மற்றும் தொழில்நுட்ப நிறுவனம் (மாநில பல்கலைக்கழகம்) மூலக்கூறு மற்றும் உயிரியல் இயற்பியல் துறை இயற்பியல் ஆராய்ச்சி முறைகள் விரிவுரை 8 குரோமடோகிராஃபி திரவ நிறமூர்த்தத்தில் கண்டறிதல்

ரஷ்ய கூட்டமைப்பின் சுகாதார அமைச்சகம் மருந்தியல் கட்டுரை Meloxicam FS.2.1.0025.15 GF XII க்கு பதிலாக Meloxicam Meloxicamum, பகுதி 1, FS 42-0254-07 4-thylxy-2-Azdylxy-2-5 -2- yl)-1,1-dioxo-1λ

பெலாரஸின் தேசிய அறிவியல் அகாடமி RUE "உணவுக்கான பெலாரஸின் தேசிய அறிவியல் அகாடமியின் ஆராய்ச்சி மற்றும் நடைமுறை மையம்" உணவு மற்றும் சர்வதேச உணவுத் தொழில்துறையில் புதுமையான தொழில்நுட்பங்கள்

பணியின் பொதுவான குணாதிசயங்கள் பணியின் பொருத்தம் தற்போது, ​​சிக்கலான கரிமப் பொருட்களின் உள்ளடக்கத்தை அடையாளம் காணவும் தீர்மானிக்கவும் அதிக செயல்திறன் கொண்ட திரவ நிறமூர்த்தத்தின் (HPLC) முறை பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.

பகுப்பாய்வு முறைகளின் சரிபார்ப்பு: நடைமுறை பயன்பாடு. பிசரேவ் வி.வி., பிஎச்.டி., எம்பிஏ, ஃபெடரல் ஸ்டேட் யூனிட்டரி எண்டர்பிரைஸின் துணை பொது இயக்குனர் "ஆண்டிபயாடிக்குகளுக்கான மாநில அறிவியல் மையம்", மாஸ்கோ (www.pisarev.ru) அறிமுகம்

2.2.29 உயர் செயல்திறன் திரவ நிறமூர்த்தம் உயர் செயல்திறன் திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC) என்பது இரண்டு கலப்பில்லாத பொருட்களின் வேறுபட்ட விநியோகத்தின் அடிப்படையில் பிரிக்கும் முறையாகும்.

ரஷ்ய தேசிய ஆராய்ச்சியின் கல்வி மற்றும் அறிவியல் அமைச்சகம் டோம்ஸ்க் மாநிலப் பல்கலைக்கழக வேதியியல் பீடத்தின் குரோமடோகிராஃபிக் முறைகள் பகுப்பாய்வுக்கான விளக்கப்பட்ட வேலைத் திட்டம் பயிற்சியின் திசை

அஜிலன்ட் பாண்ட் எலுட் ப்ளெக்ஸா தயாரிப்புகளை பயன்படுத்தி அயன் ஒடுக்கத்தை குறைக்கவும் மற்றும் லிக்விட் குரோமடோகிராபி-மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி (எல்சி-எம்எஸ்) உணர்திறன் வழிகாட்டுதல்கள் மருந்துகளை மேம்படுத்தவும்

ரஷ்ய கூட்டமைப்பின் சுகாதார அமைச்சகம் மருந்தகக் கட்டுரை கார்பமாசெபைன் FS.2.1.0020.15 கார்பமாசெபைன் FS 42-2803-96 ஐ மாற்றுகிறது; GF XII க்கு பதிலாக கார்பமாசெபினம், பகுதி 1, FS 42-0240-07 5H-Dibenzazepine-5-carboxamide

விரிவுரை 22 அமினோ அமிலங்கள். அணில் வேலை வாழ்க்கையை அனுபவிக்க சிறந்த வழி. I. காண்ட் அமினோ அமிலங்களின் பெயரிடல். இயற்கை அமினோ அமிலங்கள். புரதங்களை உருவாக்கும் அமினோ அமிலங்களின் சிராலிட்டி. அமில-அடிப்படை பண்புகள்,

APP குறிப்பு-10/2016LC மாஸ்ட்ரோஹெச்பிஎல்சி திரவ குரோமடோகிராஃபின் பகுப்பாய்வு திறன்கள், டயோட் அரே டிடெக்டர் மற்றும் ஃபோட்டோமெட்ரிக் டிடெக்டருடன் நிலையான அலைநீளங்களைக் கொண்ட (எல்இடி) தீர்மானத்தின் உதாரணத்தைப் பயன்படுத்தி

வேதியியல் விரிவுரை 3 α-அமினோ அமிலங்கள், பெப்டைடுகள், புரதங்கள். விரிவுரையை பேராசிரியர். பெலாவின் இவான் யூரிவிச் 2. α-அமினோ அமிலங்கள், பெப்டைடுகள், புரதங்கள் α-அமினோ அமிலங்கள் புரதங்கள் உயிரியக்கக் கட்டுப்படுத்திகள் ஆற்றல் மூல α-அமினோ அமிலங்கள் ஹீட்டோரோஃபங்க்ஸ்னல்

ஆய்வகப் பணி 11. அடிப்படை மூலக்கூறு மரபணு செயல்முறைகளின் வழிமுறைகள் பாடத்தின் நோக்கம்: டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏவின் கலவையைப் பற்றி நன்கு தெரிந்துகொள்வது, நகலெடுக்கும் செயல்முறைகள், டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் மற்றும் மொழிபெயர்ப்பு ஆகியவற்றைத் தீர்ப்பதற்கான உதாரணத்தைப் பயன்படுத்தி.

APP NOTE-34/2018LC காக்னாக்ஸில் உள்ள பினோலிக் மற்றும் ஃபுரான் சேர்மங்களின் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிப்பதற்கான எடுத்துக்காட்டைப் பயன்படுத்தி, டையோட் அரே டிடெக்டருடன் கூடிய மேஸ்ட்ரோ HPLC திரவ நிறமூர்த்தத்தின் பகுப்பாய்வு திறன்கள்

அஜிலன்ட் 129 இன்ஃபினிட்டி II HDR-DAD இம்ப்யூரிட்டி அனலைசர் தீர்வைப் பயன்படுத்தி அசுத்தங்களுக்கான நிலையான-டோஸ் கலவை மருந்துகளை சோதிக்கவும்

APP குறிப்பு-18/2017LC இரத்த பிளாஸ்மாவில் கேடகோலமைன்களை தீர்மானிப்பதற்கான உதாரணத்தைப் பயன்படுத்தி ஒரு ஆம்பிரோமெட்ரிக் டிடெக்டருடன் கூடிய MaestroHPLC திரவ நிறமூர்த்தத்தின் பகுப்பாய்வு திறன்கள் யாஷின் ஏ.யா. எஸ்சி., முன்னணி பொறியாளர்

GOST R 51435-99 ஆப்பிள் சாறு, செறிவூட்டப்பட்ட ஆப்பிள் சாறு மற்றும் ஆப்பிள் சாறு கொண்ட பானங்கள். உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ நிறமூர்த்தத்தைப் பயன்படுத்தி பாட்டூலின் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிக்கும் முறை. OKS 67.160.20

போட்டிக்கான மைக்கேல் வாடிமோவிச் ஷாஷ்கோவின் ஆய்வுக் கட்டுரை பற்றிய அதிகாரப்பூர்வ எதிர்ப்பாளரின் மதிப்பாய்வு "தந்துகி வாயு நிறமூர்த்தத்திற்கான அயனி திரவங்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட உயர் துருவ நிலை திரவ நிலைகளின் ஆய்வு"

பெப்டைட்ஸ், இயற்கை அல்லது செயற்கை. சேர்மங்கள், பெப்டைட் (அமைடு) பிணைப்புகள் C(O) NH மூலம் ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட அ-அமினோ அமில எச்சங்களிலிருந்து மூலக்கூறுகள் உருவாக்கப்படுகின்றன. மூலக்கூறில் அமினோ அமிலம் அல்லாத கூறுகளும் இருக்கலாம் (உதாரணமாக, கார்போஹைட்ரேட் எச்சம்). பெப்டைட் மூலக்கூறுகளில் உள்ள அமினோ அமில எச்சங்களின் எண்ணிக்கையின் அடிப்படையில், டி-பெப்டைடுகள், டிரிபெப்டைடுகள், டெட்ராபெப்டைடுகள் போன்றவை வேறுபடுகின்றன. 10 அமினோ அமில எச்சங்கள் வரை கொண்ட பெப்டைடுகள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. 10 க்கும் மேற்பட்ட அமினோ அமில எச்சங்களைக் கொண்ட ஒலிகோபெப்டைடுகள் பாலிபெப்டைடுகள் ப்ரி பாலிபெப்டைடுகள் மோல் உடன். மீ. 6 ஆயிரத்துக்கும் மேற்பட்ட பெயர்கள். புரதங்கள்

வரலாற்றுக் குறிப்பு.முதல் முறையாக, பெப்டைடுகள் நொதி புரத ஹைட்ரோலைசேட்டுகளிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டன. "பெப்டைட்ஸ்" என்ற சொல் ஈ. பிஷ்ஷரால் முன்மொழியப்பட்டது. முதல் செயற்கை பெப்டைடை 1881 இல் டி. கர்டியஸ் பெற்றார். 1905 இல் ஈ. பிஷ்ஷர் பெப்டைட்களின் தொகுப்புக்கான முதல் பொது முறையை உருவாக்கி பல ஒலிகோபெப்டைட்களை ஒருங்கிணைத்தார். கட்டிடங்கள். உயிரினங்கள் பெப்டைட் வேதியியலின் வளர்ச்சிக்கு ஈ.பிஷரின் மாணவர்களான இ.அப்டர்கால்டன், ஜி.லீக் மற்றும் எம்.பெர்க்மேன் ஆகியோர் பங்களித்தனர். 1932 ஆம் ஆண்டில், எம். பெர்க்மேன் மற்றும் எல். ஜெர்வாஸ் பெப்டைட்களின் தொகுப்பில் பென்சைலாக்சிகார்போனைல் குழுவை (கார்போபென்சாக்ஸி குழு) பயன்படுத்தி அமினோ அமிலங்களின் ஏ-அமினோ குழுக்களைப் பாதுகாத்தனர், இது பெப்டைட் தொகுப்பின் வளர்ச்சியில் ஒரு புதிய கட்டத்தைக் குறித்தது. இதன் விளைவாக N-பாதுகாக்கப்பட்ட அமினோ அமிலங்கள் (N-carbobenzoxyamino அமிலங்கள்) பல்வேறு பெப்டைட்களைப் பெற பரவலாகப் பயன்படுத்தப்பட்டன, இந்த B-B இன் வேதியியல் மற்றும் உயிர் வேதியியலில் உள்ள பல முக்கிய பிரச்சனைகளை ஆய்வு செய்ய வெற்றிகரமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டன, எடுத்துக்காட்டாக, அடி மூலக்கூறு விவரக்குறிப்பை ஆய்வு செய்ய. புரோட்டியோலிடிக். நொதிகள். இயற்கையான பெப்டைடுகள் (குளுதாதயோன், கார்னோசின், முதலியன) முதலில் N-கார்போபென்சோக்யாமினோ அமிலங்களைப் பயன்படுத்தி ஒருங்கிணைக்கப்பட்டன. இந்த பகுதியில் ஒரு முக்கியமான சாதனை ஆரம்பத்தில் உருவாக்கப்பட்டது. 50கள் P. Vaughan மற்றும் பலர். கலப்பு அன்ஹைட்ரைடு முறையைப் பயன்படுத்தி பெப்டைட்களின் தொகுப்பு (பெப்டைட் தொகுப்புக்கான முறைகள் கீழே விரிவாக விவாதிக்கப்பட்டுள்ளன). 1953 ஆம் ஆண்டில், வி. டு விக்னோல்ட் முதல் பெப்டைட் ஹார்மோனான ஆக்ஸிடாஸை ஒருங்கிணைத்தார். 1963 இல் P. மெர்ரிஃபீல்ட் உருவாக்கிய திட-கட்ட பெப்டைட் தொகுப்பு என்ற கருத்தின் அடிப்படையில், தானியங்கு ஒன்று உருவாக்கப்பட்டது. பெப்டைட் சின்தசைசர்கள். பெப்டைட்களின் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட நொதித் தொகுப்புக்கான முறைகள் தீவிர வளர்ச்சியைப் பெற்றுள்ளன. புதிய முறைகளின் பயன்பாடு இன்சுலின் ஹார்மோனை ஒருங்கிணைப்பதை சாத்தியமாக்கியது.

செயற்கையின் வெற்றிகள் பெப்டைட் வேதியியல், பெப்டைடுகளைப் பிரித்தல், சுத்திகரிப்பு மற்றும் பகுப்பாய்வு செய்தல், அயன் பரிமாற்ற நிறமூர்த்தம், சிதைவு எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் போன்ற முறைகளின் வளர்ச்சியின் முன்னேற்றத்தால் தயாரிக்கப்பட்டது. ஊடகம், ஜெல் வடிகட்டுதல், உயர் செயல்திறன் திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC), இம்யூனோகெமிக்கல். பகுப்பாய்வு, முதலியன. இறுதிக் குழுக்களை பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான முறைகள் மற்றும் பெப்டைட்களை படிப்படியாக பிளவுபடுத்துவதற்கான முறைகளும் சிறந்த வளர்ச்சியைப் பெற்றுள்ளன. குறிப்பாக, தானியங்கி அமைப்புகள் உருவாக்கப்பட்டன. அமினோ அமில பகுப்பாய்விகள் மற்றும் தானியங்கி பெப்டைட்களின் முதன்மை கட்டமைப்பை நிர்ணயிப்பதற்கான சாதனங்கள் - என்று அழைக்கப்படும். வரிசைப்படுத்துபவர்கள்.

பெப்டைட் பெயரிடல்.பெப்டைட்களின் அமினோ அமில எச்சம் இலவசம். a-amino group, அழைக்கப்படுகிறது N-டெர்மினல், மற்றும் கேரியர் இலவசம். a-கார்பாக்சில் குழு - சி-முனையம். பெப்டைட் பெயர் படம்பெயரில் இருந்து வருகிறது. அதன் கலவையில் சேர்க்கப்பட்டுள்ள அமினோ அமில எச்சங்கள், N- முனையத்திலிருந்து தொடங்கி தொடர்ச்சியாக பட்டியலிடப்பட்டுள்ளன. இந்த வழக்கில், அற்பமான பெயர்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. அமினோ அமிலங்கள், இதில் "இன்" முடிவு "சில்" ஆல் மாற்றப்படுகிறது; சி-டெர்மினல் எச்சத்தை விலக்குதல், என்று அழைக்கப்படுகிறது பெயருடன் ஒத்துப்போகிறது. தொடர்புடைய அமினோ அமிலம். பெப்டைட்களில் சேர்க்கப்பட்டுள்ள அனைத்து அமினோ அமில எச்சங்களும் N-டெர்மினஸில் இருந்து எண்ணப்படுகின்றன. பெப்டைட்களின் (அமினோ அமில வரிசை) முதன்மைக் கட்டமைப்பைப் பதிவு செய்ய, அமினோ அமில எச்சங்களுக்கான மூன்றெழுத்து மற்றும் ஒரு எழுத்துப் பெயர்கள் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன (உதாரணமாக, Ala Ser -Asp Phe -GIy அலனில்-செரில்-அஸ்பாரகில்-ஃபெனிலாலனைல்-கிளைசின்).

கட்டமைப்பு.பெப்டைட் பிணைப்பு பகுதி இரட்டைப் பிணைப்பின் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளது. இது ஒரு எளிய C N பிணைப்பின் (0.147 nm) நீளத்துடன் ஒப்பிடும்போது இந்தப் பிணைப்பின் நீளம் (0.132 nm) குறைவதில் வெளிப்படுகிறது. பெப்டைட் பிணைப்பின் பகுதியளவு இரட்டிப்பு-இணைக்கப்பட்ட தன்மையானது அதை சுதந்திரமாக செய்ய இயலாது அதைச் சுற்றி மாற்றுப் பொருட்களின் சுழற்சி. எனவே, பெப்டைட் குழுவானது பிளானர் மற்றும் பொதுவாக ஒரு டிரான்ஸ் உள்ளமைவைக் கொண்டுள்ளது (f-la I). இவ்வாறு, பெப்டைட் சங்கிலியின் முதுகெலும்பு என்பது சமச்சீரற்ற பாகங்கள் அமைந்துள்ள இடத்தில் நகரக்கூடிய ("கீல்") கூட்டுடன் கூடிய கடினமான விமானங்களின் தொடர் ஆகும். C அணுக்கள் (கட்டம் I இல் ஒரு நட்சத்திரக் குறியால் குறிக்கப்படுகிறது).

பெப்டைட் கரைசல்களில், சில கன்ஃபார்மர்களின் முன்னுரிமை உருவாக்கம் காணப்படுகிறது. சங்கிலி நீளமாகும்போது, ​​இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்பின் வரிசைப்படுத்தப்பட்ட கூறுகள் (ஏ-ஹெலிக்ஸ் மற்றும் பி-கட்டமைப்பு) அதிக உச்சரிக்கப்படும் நிலைத்தன்மையைப் பெறுகின்றன (புரதங்களைப் போன்றது). இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்பின் உருவாக்கம் குறிப்பாக வழக்கமான பெப்டைட்களின் சிறப்பியல்பு, குறிப்பாக பாலிமினோ அமிலங்கள்.

பண்புகள். ஒலிகோபெப்டைடுகள் அமினோ அமிலங்களின் பண்புகளில் ஒத்தவை; பாலிபெப்டைடுகள் புரதங்களுக்கு ஒத்தவை. ஒலிகோபெப்டைடுகள் பொதுவாக படிகமாக இருக்கும். வெப்பமடையும் போது சிதைக்கும் பொருட்கள். 200 300 0 C. வரை அவை நன்கு கரையக்கூடியவை. தண்ணீரில், தில். to-takh மற்றும் காரங்கள், கிட்டத்தட்ட எந்த சோல். org இல். ஆர்-சில்லறை விற்பனையாளர்கள். விதிவிலக்கு: ஹைட்ரோபோபிக் அமினோ அமில எச்சங்களிலிருந்து உருவாக்கப்பட்ட ஒலிகோபெப்டைடுகள்.

ஒலிகோபெப்டைடுகள் ஆம்போடெரிக் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளன, மேலும் சுற்றுச்சூழலின் அமிலத்தன்மையைப் பொறுத்து, கேஷன்கள், அயனிகள் அல்லது ஸ்விட்டரியன்கள் வடிவில் இருக்கலாம். அடிப்படை NH குழுவிற்கான IR ஸ்பெக்ட்ரமில் உள்ள உறிஞ்சுதல் பட்டைகள் 3300 மற்றும் 3080 cm -1, C=O குழுவிற்கு 1660 cm -1. UV ஸ்பெக்ட்ரமில், பெப்டைட் குழுவின் உறிஞ்சுதல் பட்டை 180-230 nm பகுதியில் உள்ளது. ஐசோ எலக்ட்ரிக் பெப்டைட்களின் புள்ளி (pI) பரவலாக மாறுபடுகிறது மற்றும் மூலக்கூறில் உள்ள அமினோ அமில எச்சங்களின் கலவையைப் பொறுத்தது. பெப்டைட்களின் pK a மதிப்புகள் தோராயமாக இருக்கும். 3, a -N H 2 தோராயமாக. 8.

செம். ஒலிகோபெப்டைட்களின் பண்புகள் அவை கொண்டிருக்கும் செயல்பாடுகளால் தீர்மானிக்கப்படுகின்றன. குழுக்கள், அத்துடன் பெப்டைட் பிணைப்பின் அம்சங்கள். அவர்களின் வேதியியல். வழிமுறையாக மாற்றம். குறைந்தபட்சம் தொடர்புடைய அமினோ அமில விகிதங்களுடன் ஒத்திருக்கும். என்னிடம் கொடுக்கிறார்கள். பையூரெட் எதிர்வினை மற்றும் நின்ஹைட்ரின் எதிர்வினை. டிபெப்டைடுகள் மற்றும் அவற்றின் வழித்தோன்றல்கள் (குறிப்பாக எஸ்டர்கள்) டைகெட்டோபிபெராசைன்களை உருவாக்க உடனடியாக சுழற்சி செய்கின்றன. 5.7 என் செல்வாக்கின் கீழ்.

ஹைட்ரோகுளோரிக் அமில பெப்டைடுகள் 105 0 C வெப்பநிலையில் 24 மணி நேரத்திற்குள் அமினோ அமிலங்களாக ஹைட்ரோலைஸ் செய்யப்படுகின்றன.

தொகுப்பு.செம். பெப்டைட் தொகுப்பு என்பது ஒரு அமினோ அமிலத்தின் COOH குழுவிற்கும் மற்றொரு அமினோ அமிலம் அல்லது பெப்டைட்டின் NH 2 க்கும் இடையே ஒரு பெப்டைட் பிணைப்பை உருவாக்குவதை உள்ளடக்குகிறது. இதற்கு இணங்க, பெப்டைட் தொகுப்பு செயல்முறையின் கார்பாக்சைல் மற்றும் அமீன் கூறுகள் வேறுபடுகின்றன. பெப்டைட்களின் இலக்கு, கட்டுப்படுத்தப்பட்ட தொகுப்பை மேற்கொள்ள, இது பூர்வாங்கமாக அவசியம். அனைத்து (அல்லது சில) செயல்பாடுகளின் தற்காலிக பாதுகாப்பு. ஒரு பெப்டைட் பிணைப்பை உருவாக்குவதில் பங்கேற்காத குழுக்கள், மேலும் பூர்வாங்கமாக. பெப்டைட் தொகுப்பின் கூறுகளில் ஒன்றை செயல்படுத்துதல். தொகுப்பு முடிந்ததும், பாதுகாக்கும் குழுக்கள் அகற்றப்படுகின்றன. உயிரியல் ரீதியாக செயலில் உள்ள பெப்டைட்களைப் பெறும்போது, ​​பெப்டைட் தொகுப்பின் அனைத்து நிலைகளிலும் அமினோ அமிலங்களின் ரேஸ்மைசேஷனைத் தடுப்பது அவசியமான நிபந்தனையாகும்.

நைப். r-re-முறைகளில் r-tion செயல்படுத்தும் போது பெப்டைட் பிணைப்பை உருவாக்கும் முக்கியமான வழிகள். ஈதர்கள், கார்போடைமைடு, கலப்பு அன்ஹைட்ரைடுகள் மற்றும் அசைட் முறை.

செயல்படுத்தப்பட்ட எஸ்டர்களின் முறை முன்-பின் அடிப்படையிலானது கார்பாக்சைல் கூறுகளின் எஸ்டர் வழித்தோன்றலை உருவாக்குவது, அதில் ஒரு வலுவான எலக்ட்ரான்-திரும்பப் பெறும் மாற்றீட்டைக் கொண்ட ஆல்கஹால் எச்சத்தை அறிமுகப்படுத்துகிறது. இதன் விளைவாக, அதிக எதிர்வினை எஸ்டர் உருவாகிறது, இது பெப்டைட் தொகுப்பின் அமினோ கூறுகளின் செயல்பாட்டின் கீழ் அமினோலிசிஸுக்கு எளிதில் உட்பட்டது. ஆக்டிவேட்டராக பெப்டைடுகள், பென்டா-புளோரோ-, பென்டாக்ளோர்-, ட்ரைக்ளோரோ- மற்றும் என்-நைட்ரோபெனைல் ஆகியவற்றின் தொகுப்பில் உள்ள எஸ்டர்கள் மற்றும் பாதுகாக்கப்பட்ட அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பெப்டைட்களின் பல எஸ்டர்கள் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

பெப்டைட் பிணைப்பு உருவாக்கத்தின் கார்போடைமைடு முறையானது டிகம்ப் பயன்பாட்டை உள்ளடக்கியது. மாற்று கார்போடைமைடுகள். Dicyclohexyl-carbodiimide குறிப்பாக பெப்டைட்களின் தொகுப்பில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது:

எக்ஸ் மற்றும் ஒய்-ரெஸ்ப். N- மற்றும் C-பாதுகாப்பு குழுக்கள் இந்த மின்தேக்கி மறுஉருவாக்கத்துடன், நீர்நிலை ஊடகங்களில் பெப்டைட்களை ஒருங்கிணைக்க முடியும், ஏனெனில் இடைநிலையாக உருவாக்கப்பட்ட O-acyl isourea (II) இன் நீராற்பகுப்பு மற்றும் அமினோலிசிஸ் விகிதங்கள் கணிசமாக வேறுபடுகின்றன. பெப்டைட்களின் தொகுப்பிலும் பல்வேறு சேர்மங்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. நீரில் கரையக்கூடிய கார்போடைமைடுகள் (உதாரணமாக, N-dimethylaminopropyl-N"-ethylcarbodiimide).

கலப்பு அன்ஹைட்ரைடு முறையானது முன் சிகிச்சையை அடிப்படையாகக் கொண்டது. கார்பாக்சிலிக் அல்லது இனார்க் உடன் கலப்பு அன்ஹைட்ரைடை உருவாக்குவதன் மூலம் பெப்டைட் தொகுப்பின் கார்பாக்சிலிக் கூறுகளை செயல்படுத்துதல். WHO. நைப். குளோரோஃபார்மிக் (கார்போனிக் குளோரைடு) சேர்மங்களின் அல்கைல் எஸ்டர்கள் பெரும்பாலும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, குறிப்பாக எத்தில் மற்றும் ஐசோபியூட்டில் ஈதர்கள், எடுத்துக்காட்டாக:

பி - மூன்றாம் நிலை அமீன்

இந்த முறையைப் பயன்படுத்தி பெப்டைட்களை ஒருங்கிணைக்கும் போது, ​​என்-அசில் அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பிவாலிக் (ட்ரைமெதிலாசெடிக்) அமிலங்களின் கலப்பு அன்ஹைட்ரைடுகள் மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும். வலுவான போட்டதற்கு நன்றி. டெர்ட்-பியூட்டில் குழுவின் தூண்டல் விளைவு காரணமாக, பிவலின் அமில எச்சத்தில் உள்ள கார்பாக்சைல் அணு C இன் எலக்ட்ரோபிலிசிட்டி கணிசமாகக் குறைக்கப்படுகிறது, மேலும் இது ஸ்டெரிக் உடன் சேர்ந்து. தடைகள், தேவையற்றதை அடக்குகிறது யூரேதேன் மற்றும் இலவசத்தின் இணை உருவாக்கம். N- அசைலமினோ அமிலங்கள், விளிம்புகள் திட்டத்தின் படி மேற்கொள்ளப்படுகின்றன:

கலப்பு அன்ஹைட்ரைடு முறையின் ஒரு மாறுபாட்டில், 1-எத்தாக்சிகார்போனைல்-2-எத்தாக்சி-1,2-டைஹைட்ரோகுவினோலின் ஒரு ஒடுக்கப் பொருளாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. இதுதான் இணைப்பு. பெப்டைட் தொகுப்பின் கார்பாக்சைல் கூறுகளுடன் எளிதாக ஒரு இடைநிலையை உருவாக்குகிறது. கலப்பு அன்ஹைட்ரைடு, இது விரைவாக ஒடுக்க கரைசலில் நுழைகிறது, மேலும் தேவையற்ற பொருட்கள் முற்றிலும் அகற்றப்படுகின்றன. பக்க விநியோகம்.

கலப்பு அன்ஹைட்ரைடு முறையின் ஒரு சிறப்பு வழக்கு சமச்சீர் முறை ஆகும். அன்ஹைட்ரைடுகள், இதில் அமினோ அமிலம் அன்ஹைட்ரைடுகள் 2 O பயன்படுத்தப்படுகின்றன, அவற்றின் பயன்பாடு ஏற்றத்தாழ்வு அல்லது முறையற்ற அமினோலிசிஸ் சாத்தியத்தை நீக்குகிறது.

அசைடு தொகுப்பு முறையானது கார்பாக்சில் கூறுகளை N-பதிலீடு செய்யப்பட்ட அமினோ அமிலம் அல்லது பெப்டைட்டின் அசைடாக மாற்றுவதன் மூலம் செயல்படுத்துவதை உள்ளடக்கியது:

அசைடுகளின் உறுதியற்ற தன்மை காரணமாக, அவை இலவசம். தீர்வு இருந்து வடிவம், ஒரு விதியாக, தனிமைப்படுத்தப்படவில்லை. கார உலோக நைட்ரைட்டுகளுக்குப் பதிலாக, நைட்ரஜன் சேர்மங்களின் அல்கைல் ஈதர்கள் (உதாரணமாக, டெர்ட்-பியூட்டில் நைட்ரைட்) ஹைட்ராசைடுடன் கரைசலுக்குப் பயன்படுத்தப்பட்டால், அசைட் ஒடுக்கம் org இல் மேற்கொள்ளப்படலாம். ஆர்-ரைட்டேல்; இதன் விளைவாக வரும் HN 3 மூன்றாம் நிலை அமின்களுடன் பிணைக்கப்பட்டுள்ளது. Azide ஒடுக்கம் பெரும்பாலும் தேவையற்ற சிக்கல்களால் சிக்கலாகிறது. பக்க எதிர்வினைகள் (ஹைட்ராசைடை அசைடாக மாற்றாமல், அமைடாக மாற்றுதல்; தீர்வு1,2-டயசில்-ஹைட்ராசைன் உருவாவதற்கு வழிவகுத்து, அசைடுடன் ஹைட்ராசைடு; இடைப்பட்ட ஐசோசயனேட்டின் உருவாக்கம், இது கர்டியஸ் மறுசீரமைப்பின் விளைவாக யூரியா வழித்தோன்றல் அல்லது அதனுடன் தொடர்புடைய யூரேத்தேன் போன்றவற்றுக்கு வழிவகுக்கும்). அசைட் முறையின் நன்மைகள் குறைந்த அளவிலான ரேஸ்மைசேஷன், ஹைட்ராக்சில் குழுக்களைப் பாதுகாக்காமல் செரின் மற்றும் த்ரோயோனைனைப் பயன்படுத்துவதற்கான வாய்ப்பு.

மாற்றுவதற்கு பாதுகாக்கப்பட்ட பெப்டைடுகள் சிறப்புப் பயன்படுத்தி இலவச பெப்டைடுகளாக மாற்றப்படுகின்றன தடுப்பு முறைகள், அவை சிதைவின் பற்றின்மையை உறுதி செய்யும் தீர்வுகளை அடிப்படையாகக் கொண்டவை. மூலக்கூறில் உள்ள அனைத்து பெப்டைட் பிணைப்புகளின் பாதுகாப்பிற்கு உத்தரவாதம் அளிக்கும் பாதுகாப்பு குழுக்கள். தடை நீக்குவதற்கான எடுத்துக்காட்டுகள்: வினையூக்கியின் பென்சைல் ஆக்ஸிகார்போனைல் குழுவை அகற்றுதல். atm இல் ஹைட்ரோஜெனோலிசிஸ். அழுத்தம் மற்றும் அறை வெப்பநிலை, டெர்ட்-பியூட்டிலாக்ஸிகார்போனைல் குழுவை மிதமான அமிலமாதலால் நீக்குதல், அத்துடன் ஹைட்ரோலைடிக். நீர்த்த நடவடிக்கையின் கீழ் ட்ரைஃப்ளூரோஅசெடைல் குழுவின் பிளவு. அடித்தள தீர்வுகள்.

உயிரியல் ரீதியாக செயலில் உள்ள பெப்டைட்களை ஒருங்கிணைக்கும் போது, ​​ரேஸ்மைசேஷன் ஏற்படாமல் இருப்பது முக்கியம்; N-அசில் அமினோ அமிலம் அல்லது பெப்டைட்டின் a-atom C இலிருந்து H + ஐ மாற்றியமைக்கும் வகையில் நீக்கப்பட்டதன் விளைவாக விளிம்புகள் ஏற்படலாம். அடிப்படைகள் மற்றும் சேர்மங்கள், உயர் வெப்பநிலை மற்றும் துருவ சேர்மங்களால் இனமயமாக்கல் ஊக்குவிக்கப்படுகிறது. ரேஸ்மைசேஷன் மூலம் தீர்க்கமான பங்கு வகிக்கப்படுகிறது, இது அடிப்படைகளால் வினையூக்கப்படுகிறது, இது அழைக்கப்படுபவற்றின் மூலம் நிகழலாம். அஸ்லாக்டோன் பொறிமுறை அல்லது பின்வரும் திட்டத்தின் படி எனோலைசேஷன் மூலம்:

நைப். ரேஸ்மைசேஷனைத் தவிர்ப்பதற்கான முக்கியமான வழிகள்: 1) சி-டெர்மினஸிலிருந்து என்-டெர்மினஸ் வரையிலான திசையில் பெப்டைட் சங்கிலியின் நீட்டிப்புROC(O) போன்ற N-பாதுகாக்கும் குழுக்களைப் பயன்படுத்துதல் 2) சி-டெர்மினல் புரோலைன் அல்லது கிளைசின் எச்சங்களுடன் N- பாதுகாக்கப்பட்ட பெப்டைட் துண்டுகளை செயல்படுத்துதல். 3) அசைட் முறையைப் பயன்படுத்துதல் (அதிகப்படியான மூன்றாம் நிலை அடிப்படை இல்லாத நிலையில் மற்றும் எதிர்வினை ஊடகத்தில் குறைந்த வெப்பநிலையை பராமரித்தல்). 4) பயன்பாடு செயலில் உள்ளது. அமினோ அமில எஸ்டர்கள், அமினோலிசிஸ் ஒரு நிலைமாற்ற நிலை, நிலைப்படுத்தி மூலம் தொடர்கிறது. ஹைட்ரஜன் பாலங்கள் (உதாரணமாக, எஸ்டர்கள் N-ஹைட்ராக்ஸிபிபெரிடைன் மற்றும் 8-ஹைட்ராக்ஸிகுவினோலின் மூலம் உருவாகின்றன). 5) N-ஹைட்ராக்ஸி கலவை சேர்க்கைகளுடன் கார்போடைமைடு முறையைப் பயன்படுத்துதல். அல்லது லூயிஸின் அலுவலகம்.

கரைசல்களில் பெப்டைட்களின் தொகுப்புடன், கரையாத கேரியர்களைப் பயன்படுத்தி பெப்டைட்களின் தொகுப்பு முக்கியமானது. இதில் திட-கட்ட பெப்டைட் தொகுப்பு (மேரிஃபீல்ட் முறை, அல்லது முறை) மற்றும் பாலிமர் ரியாஜெண்டுகளைப் பயன்படுத்தி பெப்டைட் தொகுப்பு ஆகியவை அடங்கும்.

திட-கட்ட பெப்டைட் தொகுப்பின் மூலோபாயம் ஒரு கரையாத பாலிமர் கேரியரில் தொகுக்கப்பட்ட பெப்டைட் சங்கிலியை தற்காலிகமாக சரிசெய்வதை உள்ளடக்கியது மற்றும் பின்வரும் திட்டத்தின் படி மேற்கொள்ளப்படுகிறது:

இந்த முறைக்கு நன்றி, இடைநிலைகளின் பிரிப்பு மற்றும் சுத்திகரிப்புக்கான மிகவும் சிக்கலான மற்றும் உழைப்பு-தீவிர நடைமுறைகளை மாற்றுவது சாத்தியமானது. எளிமையான சலவை மற்றும் வடிகட்டுதல் செயல்பாடுகள் மூலம் பெப்டைடுகள், அதே போல் பெப்டைட் தொகுப்பு செயல்முறையை அவ்வப்போது மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்படும் செயல்முறைகளின் நிலையான வரிசையாகக் குறைத்தல். மெர்ரிஃபீல்டின் முறை பெப்டைட் தொகுப்பு செயல்முறையை கணிசமாக விரைவுபடுத்தியது. இந்த முறையின் அடிப்படையில், பல்வேறு வகைகள் தானியங்கி வகைகள் பெப்டைட் சின்தசைசர்கள்.

இணைப்பு அதிக உற்பத்தித் திறன் கொண்டது. ஆயத்த HPLCயின் பிரிக்கும் திறன்களுடன் கூடிய பெப்டைட்களின் திட-கட்ட தொகுப்பு, தரமான புதிய அளவிலான வேதியியலுக்கான அணுகலை வழங்குகிறது. பெப்டைட்களின் தொகுப்பு, இதையொட்டி, பல்வேறு வளர்ச்சியில் ஒரு நன்மை விளைவைக் கொண்டிருக்கிறது. உயிர்வேதியியல் பகுதிகள், அவர்கள் கூறுகிறார்கள். உயிரியல், மரபணு பொறியியல், உயிரி தொழில்நுட்பம், மருந்தியல் மற்றும் மருத்துவம்.

பாலிமர் ரியாஜெண்டுகளைப் பயன்படுத்தி பெப்டைட்களின் தொகுப்புக்கான உத்தியானது அதிக மூலக்கூறு எடையுடன் தற்காலிக பிணைப்பை உள்ளடக்கியது. கேரியர் செயல்படுத்தப்பட்டது கார்பாக்சைல் கூறு அல்லது பெப்டைட் தொகுப்பின் மின்தேக்கி முகவர். இந்த முறையின் நன்மை என்னவென்றால், பாலிமருடன் இணைக்கப்பட்ட எதிர்வினைகள் அதிகமாக அறிமுகப்படுத்தப்படலாம், மேலும் கரையாத பாலிமர்களில் இருந்து தொகுக்கப்பட்ட பெப்டைட்களைப் பிரிப்பது கடினம் அல்ல.

கொடுக்கப்பட்ட வரிசையில் அமினோ கூறுகளை பல வழியாக அனுப்புவது அத்தகைய தொகுப்புக்கான ஒரு எடுத்துக்காட்டு. நெடுவரிசைகள், ஒவ்வொன்றும் ஒரு பாலிமர் பிணைப்பைக் கொண்டிருக்கும்

சுருக்கம்

பெப்டைட் அமைப்புடன் புதிய அசல் மருந்துகளை உருவாக்கும் போது மருந்தியக்கவியல் மற்றும் உயிர் கிடைக்கும் தன்மை பற்றிய ஆய்வுகளில் இந்த மதிப்பாய்வு கவனம் செலுத்துகிறது. பயோமெட்டீரியல்களில் பெப்டைட் சேர்மங்களின் அளவை நிர்ணயம் செய்வதற்கான முறைகள், அவற்றின் பார்மகோகினெடிக் பண்புகள், இந்த பொருட்களின் உயிர் கிடைக்கும் தன்மையை பாதிக்கும் காரணிகள் மற்றும் மருத்துவ நடைமுறையில் அறிமுகப்படுத்தப்பட்ட பெப்டைட் அமைப்புடன் கூடிய மருந்துகளின் சில பார்மகோகினெடிக் தரவுகள் ஆகியவற்றில் அதிக கவனம் செலுத்தப்படுகிறது.

முக்கிய வார்த்தைகள்: பார்மகோகினெடிக்ஸ், குறுகிய பெப்டைடுகள், உயிர் கிடைக்கும் தன்மை, துணை பொருட்கள்

அறிமுகம்

கவலைக் கோளாறுகள் பொதுவான தொடர்ச்சியான கவலை, நோயியல் பயம், பதற்றம் மற்றும் பதட்டம் ஆகியவற்றால் வகைப்படுத்தப்படும் மனநல கோளாறுகள் ஆகும். தற்போது, ​​கவலைக் கோளாறுகளுடன் தொடர்புடைய நோய்களின் பரவலானது மேற்கத்திய நாடுகளில் 13.6 முதல் 28.8% வரை உள்ளது மற்றும் வாழ்க்கையின் அதிக வேகம், சுற்றுச்சூழல் மற்றும் சமூக பதற்றம் காரணமாக தொடர்ந்து அதிகரித்து வருகிறது.

கவலை மற்றும் மனச்சோர்வுக் கோளாறுகளுடன் தொடர்புடைய நோய்களின் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு காரணமாக, புதிய ஆன்சியோலிடிக் மருந்துகளின் வளர்ச்சி மற்றும் செயல்படுத்தல் பொருத்தமானது. இன்று, அத்தகைய மருந்தியல் விளைவைக் கொண்ட மருந்துகள் முக்கியமாக பென்சோடியாசெபைன் கலவைகளால் குறிப்பிடப்படுகின்றன, அவை சோர்வு, தூக்கம், நினைவாற்றல் குறைபாடு, மன மற்றும் உடல் போதை மருந்து சார்பு மற்றும் திரும்பப் பெறுதல் நோய்க்குறி ஆகியவற்றால் வகைப்படுத்தப்படுகின்றன, இது நோயாளிகளின் வாழ்க்கைத் தரத்தை குறைக்கிறது. இந்த பக்கவிளைவுகள் இல்லாத, அத்தகைய ஒரு ஆன்சியோலிடிக் மருந்து அஃபோபசோல் ஆகும். பென்சோடியாசெபைன்களின் பாதகமான எதிர்விளைவுகள் இல்லாத மற்ற மிகவும் பயனுள்ள மருந்துகளைத் தேட வேண்டியதன் அவசியத்தை மேற்கூறியவை உறுதிப்படுத்துகின்றன. எண்டோஜெனஸ் பெப்டைட்களுக்கு அறிவியல் அதிக கவனம் செலுத்துகிறது. இன்றுவரை, கவலைக் கோளாறுகளின் நோய்க்கிரும வளர்ச்சியில் எண்டோஜெனஸ் நியூரோபெப்டைட் கோலிசிஸ்டோகினின் முக்கிய பங்கு நிறுவப்பட்டுள்ளது. மத்திய நரம்பு மண்டலத்தில் அமைந்துள்ள சிசிகே-பி ஏற்பிகளில் செயல்படும் கோலிசிஸ்டோகினின், ஆன்சியோஜெனிக் செயல்பாட்டை வெளிப்படுத்துகிறது - பீதி தாக்குதல்களைத் தூண்டுகிறது, ஓபியேட் அமைப்புடன் தொடர்பு கொள்கிறது, இதனால் வலி நிவாரணி எதிர்ப்பு விளைவை ஏற்படுத்தும். மனச்சோர்வு மற்றும் ஸ்கிசோஃப்ரினியாவின் நோய்க்கிரும வளர்ச்சியில் கோலிசிஸ்டோகினின் பங்கு வகிக்கிறது என்பதும் சாத்தியமாகும்.

எண்டோஜெனஸ் நியூரோபெப்டைடுகள் குறைந்த நொதி நிலைத்தன்மையைக் கொண்டிருப்பதால், இரைப்பைக் குழாயில் நீராற்பகுப்புக்கு உட்பட்டவை மற்றும் BBB வழியாக ஊடுருவிய பின்னரே செயல்படுகின்றன, மேலும் சுருக்கமான மற்றும் பாதுகாக்கப்பட்ட கட்டமைப்பைக் கொண்ட சாத்தியமான ஆன்சியோலிடிக்ஸ் (கோலிசிஸ்டோகினின் ஏற்பி எதிரிகள்) தேட வேண்டிய அவசியம் ஏற்பட்டது. முறையாக நிர்வகிக்கப்படும் போது பயனுள்ளதாக இருக்கும்.

குடாஷேவா டி.ஏ உருவாக்கிய கருதுகோளின் அடிப்படையில். 1985 ஆம் ஆண்டில், ஒரு குறிப்பிட்ட நியூரோட்ரோபிக் செயல்பாட்டுடன் பெப்டைட் அல்லாத முன்மாதிரியின் கட்டமைப்பை உருவகப்படுத்துவதற்கான சாத்தியக்கூறுகள், அதே போல் அசல் பெப்டைட்டின் செயலில் உள்ள அதே செயல்பாடு கொண்ட ஒரு புதிய டிபெப்டைட் ஆன்சியோலிடிக் GB-115 (N-phenyl-N -hexanoyl-L-glycyl-L amide) ஒருங்கிணைக்கப்பட்டது -டிரிப்டோபன்) கோலிசிஸ்டோகினின்-4 இன் ரெட்ரோஅனாலாக் ஆகும். கலவையின் மருந்தியல் செயல்பாடு நிறுவப்பட்டுள்ளது: ஜிபி -115 ஆன்சியோலிடிக், ஆல்கஹால் எதிர்ப்பு, மனச்சோர்வு மற்றும் வலி நிவாரணி பண்புகளை வெளிப்படுத்துகிறது என்பது சோதனை ரீதியாக நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது. வாய்வழியாக நிர்வகிக்கப்படும் போது, ​​GB-115 அதன் அதிகபட்ச ஆன்சியோலிடிக் செயல்பாட்டை 0.1 mg/kg என்ற அளவில் வெளிப்படுத்தியது. மருந்து 0.2 mg/kg, p.o என்ற அளவில் எத்தனால் திரும்பப் பெறுவதால் தூண்டப்பட்ட ஆன்சியோஜெனிக் எதிர்வினையை நிறுத்துகிறது. அதிகபட்ச வலி நிவாரணி செயல்பாடு 10 மி.கி / கி.கி அளவுகளில் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் 0.025-0.05 மி.கி / கி.கி, ஐ.பி.

ஒரு மருந்தின் பரிசோதனை பார்மகோகினெடிக் ஆய்வுகளை மேற்கொள்வது மருத்துவ நடைமுறையில் அதன் மேலும் முன்னேற்றத்திற்கு அவசியமான படியாகும். பார்மகோகினெடிக் அளவுருக்களை மேம்படுத்துவது உகந்த அளவு வடிவத்தை உருவாக்க அனுமதிக்கிறது, இது சரியான அளவு மற்றும் உறிஞ்சுதல் விகிதம், விநியோக பண்புகள், வளர்சிதை மாற்றம் மற்றும் வெளியேற்றத்தின் பாதைகள் ஆகியவற்றால் வேறுபடுகிறது. ஒப்பீட்டு உயிர் கிடைக்கும் தன்மையின் மதிப்பீடு, ஆய்வு செய்யப்படும் கலவைக்கான சிறந்த பார்மகோகினெடிக் அளவுருக்கள் கொண்ட மருந்தளவு படிவத்திற்கு ஆதரவாக ஒரு தேர்வு செய்ய அனுமதிக்கிறது.

பார்மகோகினெடிக்ஸ் என்பது ஒரு நவீன, வேகமாக வளர்ந்து வரும் அறிவியலாகும், இது உடலில் போதைப்பொருள் ஊடுருவல், விநியோகம், உயிர்மாற்றம் மற்றும் நீக்குதல் ஆகியவற்றின் பண்புகளை ஆய்வு செய்கிறது. இந்த செயல்முறைகளின் ஆய்வு, அவற்றின் அளவு மதிப்பீடு உட்பட, மருந்தியக்கவியலின் முக்கிய குறிக்கோள் ஆகும்.

பரிசோதனையில் புதிய மருந்தியல் செயலில் உள்ள பொருட்களின் பார்மகோகினெடிக் ஆய்வு, அவற்றை மருத்துவ நடைமுறையில் ஆராய்ச்சி, மேம்பாடு மற்றும் செயல்படுத்துவதில் ஒரு கட்டாய படியாகும். மருந்தின் செயல்திறன் நேரடியாக உறிஞ்சுதல், விநியோகம் மற்றும் உடலில் இருந்து மருந்துகளை வெளியேற்றும் செயல்முறைகளைப் பொறுத்தது.

மருந்தியக்கவியல் தரவு நிர்வாகத்தின் வழி மற்றும் முறை, மருந்தின் ஊடுருவல் தளம், தோராயமான அளவு விதிமுறை மற்றும் மருந்துகளை அகற்றுவதற்கான முக்கிய வழிகளை தீர்மானிக்க உதவுகிறது.

மருந்து கலவை உறிஞ்சுதல், விநியோகம், வளர்சிதை மாற்றம் மற்றும் வெளியேற்றம் ஆகியவை ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட செயல்முறைகள். அவை அனைத்தும் பல காரணிகளால் பாதிக்கப்படுகின்றன: உறிஞ்சுதல் விகிதம் மருந்தின் அளவு வடிவம், செயலில் உள்ள பொருளின் செறிவு, பொருள் கரைந்திருக்கும் ஊடகத்தின் pH, குடல் இயக்கம் மற்றும் உறிஞ்சும் மேற்பரப்பின் நிலை ஆகியவற்றைப் பொறுத்தது. பகுதி. மருந்தின் விநியோகம் மற்றும் உயிர் உருமாற்றத்தின் குறிகாட்டிகள் பாலினம், வயது, நோயாளியின் உடலின் சோமாடிக் நிலை மற்றும் உடலின் நொதி அமைப்புகளின் நிலை ஆகியவற்றால் பாதிக்கப்படுகின்றன, இது பெரும்பாலும் தனிப்பட்ட வேறுபாடுகளால் ஏற்படுகிறது. இவ்வாறு, சில சைக்கோட்ரோபிக் மருந்துகளின் வளர்சிதை மாற்ற விகிதம் வெவ்வேறு நோயாளிகளுக்கு 6 முதல் 30 மணிநேரம் வரை மாறுபடும். உடலில் இருந்து வளர்சிதை மாற்றங்களை அகற்றுவது இணைந்த நோய்களாலும், மற்ற மருந்துகளின் செல்வாக்காலும் பாதிக்கப்படலாம்.

விலங்குகள் மற்றும் மனிதர்களின் உடலில் உள்ள மருந்துகளின் பல்வேறு பார்மகோகினெடிக் செயல்முறைகளை மதிப்பிடுவதற்கு, அதனுடன் தொடர்புடைய பார்மகோகினெடிக் அளவுருக்கள் கணக்கிடப்படுகின்றன, இதில் உயிர் கிடைக்கும் தன்மை (F, %) அடங்கும் - மருந்து அளவின் ஒரு பகுதி, அதன் வெளிப்புற நிர்வாகத்திற்குப் பிறகு முறையான இரத்த ஓட்டத்தை அடையும்.

புதிய மருந்தியல் செயலில் உள்ள சேர்மங்களின் முன்கூட்டிய சோதனைகளில் பார்மகோகினெடிக் பரிசோதனைகளை நடத்துவதற்கான நிபந்தனைகளை கவனிக்க வேண்டியது அவசியம்.

ஆய்வு செய்யப்பட்ட மருந்தியல் முகவர்கள் ஆராய்ச்சியின் பொருளாகக் கருதப்படுகிறார்கள், இது முன்கூட்டிய நடைமுறையில் ஆரோக்கியமான விலங்குகளில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது: எலிகள், எலிகள், முயல்கள், நாய்கள், குரங்குகள் மற்றும் பிற, அவற்றின் எடை ஒவ்வொரு இனத்திற்கும் தரத்திலிருந்து வேறுபடக்கூடாது. 10% க்கும் அதிகமாக.

உயிரியல் பொருட்களின் முக்கிய வகைகள் இரத்த சீரம் பிளாஸ்மா, முழு இரத்தம், பல்வேறு உறுப்புகள் மற்றும் திசுக்கள், சிறுநீர், மலம்.

நிர்வாகத்தின் வழி மருந்தின் வடிவத்தால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது, மேலும் மருந்தியல் ஆய்வுக்கு மருந்தியல் ஆய்வுகளின் அடிப்படையில் பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. நிர்வாகத்தின் முறைகள் வேறுபட்டிருக்கலாம்: நரம்பு வழியாக, ஊடுருவி, உள் தசை, தோலடி, வாய்வழி, முதலியன. மருந்து உணவுடன் தொடர்பு கொள்வதைத் தவிர்ப்பதற்காக வெற்று வயிற்றில் தொண்டை அல்லது டூடெனனல் குழாயைப் பயன்படுத்தி விலங்குகளுக்கு வாய்வழியாக நிர்வகிக்கப்படுகிறது.

நிர்வாகம் மீண்டும் மீண்டும் அல்லது ஒற்றை. ஒரு ஒற்றை நிர்வாகத்துடன், குறைந்தபட்சம் மூன்று டோஸ் அளவுகளைப் பயன்படுத்தி செயலில் உள்ள பொருளின் மருந்தியக்கவியலைப் படிப்பது அவசியம். மருந்தியக்கவியலின் நேர்கோட்டுத்தன்மையை சரிபார்க்க இது அவசியம்.

பரிசோதனையின் காலம் அரை ஆயுளை விட 5 மடங்கு அதிகமாக இருக்க வேண்டும்.

மாதிரியிலிருந்து ஒவ்வொரு விலங்கிலிருந்தும் ஒரு மாதிரி மட்டுமே எடுக்கப்பட்டால், ஒரு புள்ளிக்கு விலங்குகளின் எண்ணிக்கை (தொடர்பான செறிவு மதிப்பு) குறைந்தபட்சம் 5 ஆக இருக்க வேண்டும் (தலை துண்டிக்கப்பட்ட விஷயத்தில் எலிகள் மீதான சோதனைகளில்: ஒரு விலங்கு - ஒரு புள்ளி).

ஒரு புதிய மருந்தியல் செயலில் உள்ள சேர்மத்தின் பார்மகோகினெடிக் மற்றும் உயிர்மருந்து ஆய்வின் முக்கியமான கட்டங்களில் ஒன்று அதன் முழுமையான மற்றும் தொடர்புடைய உயிர் கிடைக்கும் தன்மை பற்றிய ஆய்வு ஆகும் ("மருந்துகளின் உயிர் கிடைக்கும் தன்மை" என்ற பகுதியைப் பார்க்கவும்).

• பெப்டைடுகள் மற்றும் அவற்றின் வழித்தோன்றல்களை தீர்மானிப்பதற்கான பகுப்பாய்வு முறைகள்

அமினோ அமிலங்கள், பெப்டைடுகள் மற்றும் அவற்றின் வழித்தோன்றல்களின் தரம் மற்றும் அளவு தீர்மானத்திற்கு பல்வேறு முறைகள் உள்ளன. பெப்டைட் கட்டமைப்பைக் கொண்ட சாத்தியமான மருந்தை பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான உகந்த முறையை நியாயமான முறையில் தேர்ந்தெடுப்பது அவசியம். இது ஒரு குறிப்பிட்ட சேர்மத்தின் மருந்தியக்கவியலைக் காட்டும், உணர்திறன் பகுப்பாய்வை அடையவும் துல்லியமான மற்றும் மறுஉருவாக்கக்கூடிய முடிவுகளைப் பெறவும் அனுமதிக்கும்.

வகைப்பாடு:

• திரவ நிறமூர்த்த முறைகள்:

மெல்லிய அடுக்கு திரவ நிறமூர்த்தம்

உயர் செயல்திறனுள்ள திரவ குரோமேட்டோகிராஃபி

• வாயு குரோமடோகிராபி
• நோயெதிர்ப்பு வேதியியல் பகுப்பாய்வு முறைகள்
• கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்

1.2 அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பெப்டைட்களின் குரோமடோகிராபி

குரோமடோகிராபி என்பது ஒரு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட கலவையின் கூறுகளைப் பிரிப்பதற்கான ஒரு இயற்பியல் வேதியியல் முறையாகும், அவற்றின் விநியோக குணகங்களில் இரண்டு கட்டங்களுக்கு இடையில் உள்ள வேறுபாட்டின் அடிப்படையில்: நிலையான மற்றும் மொபைல். மிகவும் நம்பிக்கைக்குரிய நிறமூர்த்த முறைகள்: வாயு குரோமடோகிராபி (GC) மற்றும் உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ நிறமூர்த்தம் (HPLC) ஆகியவை மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரிக் டிடெக்டருடன் இணைந்து - GC-MS மற்றும் HPLC-MS. இந்த முறைகள் விரைவான வேகத்தில் வளர்ந்து வருகின்றன, இது சமீபத்திய ஆண்டுகளில் எழுந்த பணிகளின் வளர்ச்சியுடன் தொடர்புடையது: புரோட்டியோமிக்ஸ், வளர்சிதை மாற்றம், உயிரி எரிபொருட்களின் பகுப்பாய்வு, நோய்களின் உயிரியக்கவியல், மருந்துகளின் உருவாக்கம் மற்றும் தரக் கட்டுப்பாடு, தரக் கட்டுப்பாடு மற்றும் உணவுப் பாதுகாப்பு , அத்துடன் பயங்கரவாதம் (நச்சுப் பொருட்கள், தீங்கு விளைவிக்கும் பொருட்கள் மற்றும் போராளிகளை தீர்மானித்தல்) மற்றும் அவசரகால சூழ்நிலைகளின் விளைவுகளை விரைவாக தீர்மானித்தல்.

1.2.1 திரவ நிறமூர்த்த முறைகள்

1.2.1.1. உயர் செயல்திறனுள்ள திரவ குரோமேட்டோகிராஃபி

HPLC என்பது இரண்டு கலப்பில்லாத கட்டங்களுக்கு இடையில் அவற்றின் வெவ்வேறு விநியோகத்தின் அடிப்படையில் பொருட்களின் கலவையின் கூறுகளைப் பிரிப்பதற்கான ஒரு இயற்பியல் வேதியியல் முறையாகும், அவற்றில் ஒன்று மொபைல் மற்றும் மற்றொன்று அசையாது. மொபைல் மற்றும் நிலையான கட்டங்களின் துருவமுனைப்பைப் பொறுத்து, HPLC பொதுவாக சாதாரண கட்டம் (நிலையான கட்டம் மொபைலை விட துருவமானது) மற்றும் தலைகீழ் கட்டம் (நிலையான கட்டம் மொபைலை விட துருவமானது) என பிரிக்கப்படுகிறது.

அமினோ அமிலங்கள் மற்றும் பெப்டைட்களை பிரித்தெடுக்க தலைகீழ்-கட்ட HPLC பெரும்பாலும் பயன்படுத்தப்படுகிறது, ஏனெனில் பெரும்பாலான பகுப்பாய்வுகள் அக்வஸ் மொபைல் கட்டங்களில் மிகவும் கரையக்கூடியவை மற்றும் பெரும்பாலான துருவமற்ற கரைப்பான்களில் குறைந்த கரைதிறன் கொண்டவை. இருப்பினும், சாதாரண-கட்ட HPLC ஆனது குறுகிய-சங்கிலி அமினோ அமில வழித்தோன்றல்கள் மற்றும் குறைந்த ஹைட்ரோபோபிசிட்டி கொண்ட பெப்டைட்களின் குரோமடோகிராஃபிக்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது, அவை தலைகீழ்-கட்ட HPLC இல் நிலையான கட்டத்தால் தக்கவைக்கப்படவில்லை. இந்த துறையில் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரியைப் பயன்படுத்துவதற்கு முன்பு, பெப்டைட் பிரிப்பு மற்றும் சுத்திகரிப்புக்கான தங்கத் தரமாக தலைகீழ் நிலை HPLC இருந்தது. RP-HPLC ஆனது குரோமடோகிராஃபிக் பகுப்பாய்வின் மற்ற முறைகளைக் காட்டிலும் பின்வரும் நன்மைகளைக் கொண்டுள்ளது: முடிவுகளின் மறுஉருவாக்கம், அதிக பிரிப்பு சக்தி, தேர்வுத்திறன் (ஒரு அமினோ அமிலத்தின் வித்தியாசத்துடன் பெப்டைட்களை வேறுபடுத்தும் திறன்), உணர்திறன், அதிக வேகம் மற்றும் செயல்பாட்டின் பயன்பாடு சிறிய அளவு ஆவியாகும் கரைப்பான்கள்.

தலைகீழ்-கட்ட ஹெச்பிஎல்சியில் பெப்டைட் பகுப்பாய்வின் தேர்வு மற்றும் தரமானது கட்டங்களின் சரியான தேர்வைப் பொறுத்தது: மொபைல் மற்றும் நிலையானது.

ஒரு நிலையான கட்டமாக, adsorbents பயன்படுத்தப்படுகின்றன, அவை பல்வேறு குளோரோசிலேன் வழித்தோன்றல்களுடன் மாற்றியமைக்கப்பட்ட சிலிக்கா ஜெல் ஆகும். இந்த கட்டத்தில் கரிம கரைப்பான்களுக்கு அதிக வலிமை மற்றும் அலட்சியம் உள்ளது. தலைகீழ் கட்டம் மேட்ரிக்ஸின் சிறப்பியல்புகளால் வேறுபடுகிறது - சிலிக்கா ஜெல் மற்றும் ஒட்டப்பட்ட ரேடிக்கலின் அமைப்பு, இது கார்பன் துண்டின் கலவை மற்றும் கட்டமைப்பில் வேறுபடுகிறது. பெப்டைட்களின் குரோமடோகிராபியின் போது, ​​பெப்டைட்களின் அளவு மற்றும் ஹைட்ரோபோபிசிட்டி மூலம் தலைகீழ் கட்டத்தின் தேர்வு தீர்மானிக்கப்படுகிறது: குறுகிய சங்கிலி கொண்ட பெப்டைடுகளுக்கு, ஹைட்ரோஃபிலிக் பெப்டைடுகள், கட்டங்கள் C8 (n-octyl) மற்றும் C18 (n-octadecyl) ஆகியவை பயன்படுத்தப்படுகின்றன. மற்றும் ஹைட்ரோபோபிக் ஒன்று - கட்டம் C3 (டிரைமெதில்- அல்லது டைமெதில்ப்ரோபில்), C4 (n-butyl), C6 (பீனைல்).

மொபைல் கட்டத்தை சரியாகத் தேர்ந்தெடுக்க, கரிம கரைப்பானின் pH, கலவை மற்றும் செறிவு ஆகியவற்றை கணக்கில் எடுத்துக்கொள்வது அவசியம்:

பெப்டைட்களின் துருவமுனைப்பைக் குறைப்பதற்கும், உறிஞ்சி மூலம் சிறந்த தக்கவைப்பை உறுதி செய்வதற்கும், எலுயண்டின் pH 2-3 வரம்பில் இருக்க வேண்டும். மேலும், பெப்டைட்களின் தக்கவைப்பு நேரத்தை அதிகரிக்க, மாற்றியமைப்பாளர்கள் அல்லது அயனி-ஜோடி எதிர்வினைகள் (கவுன்டீரியன்கள்) என்று அழைக்கப்படுபவை, நேர்மறையாக சார்ஜ் செய்யப்பட்ட பெப்டைட் குழுக்களுடன் அயன் ஜோடிகளை உருவாக்கும் திறன் கொண்டவை, மொபைல் கட்டத்தில் அறிமுகப்படுத்தப்படுகின்றன. RP HPLC இல் உள்ள முக்கிய அயனி மாற்றியானது ட்ரைஃப்ளூரோஅசெடிக் அமிலம் ஆகும். இது ஆவியாதல் மூலம் எளிதில் அகற்றப்படுகிறது, பெப்டைட்களை நன்கு கரைக்கிறது மற்றும் குறுகிய அலைநீள பகுதியில் UV வெளிப்படையானது, இது கண்டறியும் போது கூடுதல் உச்சங்களை உருவாக்காது. ஃபார்மிக் அமிலம் மாற்றியமைப்பாளராகவும் பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் நல்ல பிரித்தலை வழங்குகிறது, ஆனால் அதன் பயன்பாடு UV பகுதியில் வலுவான உறிஞ்சுதலால் வரையறுக்கப்படுகிறது.

மொபைல் கட்டத்தின் நீக்கும் திறனில் கரிம கரைப்பானின் தாக்கம் மிகப் பெரியது. எனவே, கரைப்பானின் வெளியேற்ற வலிமை பின்வரும் வரிசையில் அதிகரிக்கிறது: நீர் - மெத்தனால் - அசிட்டோனிட்ரைல் - எத்தனால் - டையாக்ஸேன் - டெட்ராஹைட்ரோஃபுரான் - 2-புரோபனால் - 1-புரோபனால். இந்தத் தொடரில் கரிமப் பொருட்களின் துருவமுனைப்பு குறைவதால் இந்த வரிசை ஏற்படுகிறது. அசிட்டோனிட்ரைல் பெரும்பாலும் மொபைல் கட்டத்தின் கரிம அங்கமாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, ஏனெனில் இது 200 nm வரை UV பகுதியில் வெளிப்படையானது, குறைந்த பாகுத்தன்மை கொண்டது, அதிக ஆவியாகும், இது தேவைப்பட்டால், சேகரிக்கப்பட்ட எலுவேட்டிலிருந்து எளிதாக அகற்ற அனுமதிக்கிறது. பின்னம், மற்றும் நல்ல தேர்வு மூலம் வகைப்படுத்தப்படும்.

பெப்டைட் சேர்மங்களைப் பிரிப்பது ஐசோக்ரேடிக் நிலைமைகளின் கீழ் மேற்கொள்ளப்படலாம், அங்கு கரிம கரைப்பானின் செறிவு நிலையானது, அல்லது சாய்வு நீக்கம் மூலம், கரிம கரைப்பானின் செறிவு காலப்போக்கில் அதிகரிக்கிறது. ஹைட்ரோபோபிசிட்டியை அதிகரிக்கும் பொருட்டு சோதனைப் பொருட்கள் நீக்குகின்றன.

1.2.1.2. உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராஃபியில் பெப்டைட்களைக் கண்டறிவதற்கான முறைகள்: UV கண்டறிதல், மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி.

HPLC ஆல் மருத்துவப் பொருட்களைப் பிரித்த பிறகு தரமான மற்றும் அளவு பகுப்பாய்வுகளைத் துல்லியமாக மேற்கொள்ள, அவற்றின் கண்டறிதலுக்கு உபகரணங்களைப் பயன்படுத்துவது அவசியம், இதையொட்டி பின்வரும் தேவைகள் உள்ளன: கண்டுபிடிப்பாளர்களுக்கு அதிக உணர்திறன் (நல்ல சமிக்ஞை, சத்தம் இல்லை), வேகம், பரந்த நேரியல் மாறும் வரம்பு, நிலைப்புத்தன்மை, மொபைல் கட்டத்துடன் தொடர்பு இல்லாமை.

உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ நிறமூர்த்தத்தில் மிகவும் பொதுவான கண்டறிதல் முறைகளில் ஒன்று புற ஊதா ஆகும், இது பொருளாதாரக் கண்ணோட்டத்தில் பகுப்பாய்வு, எளிமை மற்றும் மலிவு ஆகியவற்றின் உயர் உணர்திறன் மூலம் விளக்கப்படுகிறது. இருப்பினும், UV கண்டறிதல் என்பது மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரியை விட குறைவான உணர்திறன் கொண்ட முறையாகும். UV டிடெக்டர்கள் இன்று நான்கு முக்கிய வகைகளால் குறிப்பிடப்படுகின்றன:

• நிலையான அலைநீளத்துடன்;
• அதன் வரம்பில் அலைநீளங்களை மாற்ற உங்களை அனுமதிக்கும் மோனோக்ரோமேட்டருடன்;
• பல-அலைநீளம், பல-சேனல் கண்டறிதலை அனுமதிக்கும் தானாக டியூன் செய்யக்கூடிய மோனோக்ரோமேட்டருடன்;
• கொடுக்கப்பட்ட வரம்பில் முழு நிறமாலை தகவலைப் பெற அனுமதிக்கும் டையோடு-மேட்ரிக்ஸ் டிடெக்டர்கள்.

அமினோ அமிலங்களின் கலவையிலும், பெப்டைட் பிணைப்பிலும் சில குரோமோபோர்கள் இருப்பதால், மேலே பட்டியலிடப்பட்டுள்ள நான்கு வகையான உபகரணங்களில் ஒன்றைப் பயன்படுத்தி புற ஊதா கதிர்வீச்சைப் பயன்படுத்தி பெப்டைட் கலவைகளைக் கண்டறிய முடிந்தது.

பெப்டைட் கலவைகள் மூன்று பகுதிகளில் UV கதிர்வீச்சை உறிஞ்சும் திறன் கொண்டவை:

250 nm (λ=280 nm) க்கு மேல், இது பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட கலவையில் நறுமண அமினோ அமிலங்கள் இருப்பதால் - டிரிப்டோபன் (λ=278 nm), டைரோசின் (λ=275 nm) மற்றும் ஃபெனிலாலனைன்.

210-250 nm இல், அத்தகைய சமிக்ஞையை புரத மூலக்கூறுகளில் உள்ள உள் மற்றும் இடைநிலை ஹைட்ரஜன் பிணைப்புகளுடன் மற்ற அமினோ அமிலங்களால் கொடுக்க முடியும்.

190 nm இல், இது பெப்டைட் பிணைப்புகள் இருப்பதால் விளக்கப்படுகிறது.

எவ்வாறாயினும், HPLC இல் பயன்படுத்தப்படும் கரைப்பான்களின் செல்வாக்கின் காரணமாக 210 nm க்கும் குறைவான அலைநீளங்களில் ஆய்வின் கீழ் உள்ள சேர்மங்களைக் கண்டறிதல் மேற்கொள்ளப்படவில்லை, அவை 210 nm க்கும் குறைவான அலைநீளங்களில் அவற்றின் சொந்த உறிஞ்சுதலைக் கொண்டுள்ளன, அத்துடன் அசுத்தங்கள் இருப்பதால். எனவே, பெப்டைட் பொருட்களைக் கண்டறியும் போது, ​​250 nm க்கும் அதிகமான அலைநீள வரம்பு அடிக்கடி பயன்படுத்தப்படுகிறது. இந்த பகுதியில் புற ஊதா கதிர்வீச்சை உறிஞ்சும் குரோமோபோர்களை சேர்மங்கள் கொண்டிருக்கவில்லை என்றால், அவை வழித்தோன்றல் முறையை நாடுகின்றன.

டெரிவேட்டேஷன் என்பது ஒரு பகுப்பாய்வின் இரசாயன மாற்றமாகும், இது மேம்பட்ட பகுப்பாய்வு பண்புகளைக் கொண்ட ஒரு வழித்தோன்றல் கலவையை உருவாக்குகிறது. வழித்தோன்றல் மூலம் HPLC-UV உடன் பணிபுரியும் போது, ​​உயிரியல் பொருள் பகுப்பாய்வுக்கு வசதியான பகுதியில் UV ஸ்பெக்ட்ரமில் பதிவு செய்யப்பட்ட கலவையைப் பெறுவது அவசியம். எனவே Rudenko A.O இன் வேலையில். சிக்கலான உயிரியல் மெட்ரிக்குகளில் மிக முக்கியமான அமினோ அமிலங்களைத் தீர்மானிக்கும் போது, ​​16 அமினோ அமிலங்களின் வழித்தோன்றல் முறை பயன்படுத்தப்பட்டது. O-phthalaldehyde ஒரு வழித்தோன்றல் முகவராகப் பயன்படுத்தப்பட்டது.

மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரிக் கண்டறிதல் முறை மூன்று நிலைகளைக் கொண்டுள்ளது: அயனியாக்கம், நிறை-க்கு-கட்டணம் பிரித்தல் மற்றும் வெகுஜன பகுப்பாய்வியைப் பயன்படுத்தி அதைத் தொடர்ந்து கண்டறிதல். மருந்து கலவைகளின் பகுப்பாய்விற்கு, "மென்மையான" அயனியாக்கம் நுட்பங்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன: எலக்ட்ரோஸ்ப்ரே அயனியாக்கம், அத்துடன் மேட்ரிக்ஸ்-உதவி லேசர் டிசார்ப்ஷன் (MALDI). இந்த முறைகள் மென்மையான அயனியாக்கம் பயன்முறையைக் குறிக்கின்றன, இது வெப்ப நிலையற்ற உயிர் மூலக்கூறுகளுக்கு மிகவும் முக்கியமானது. இருப்பினும், இந்த வகையான அயனியாக்கம் போதுமான தகவல் இல்லை, எனவே அவை பெரும்பாலும் டேன்டெம் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரியை (MS/MS) நாடுகின்றன, இது பகுப்பாய்வுகளின் துண்டுகளை பதிவு செய்வதற்கான ஒரு முறையாகும். இன்னும் துல்லியமாக, இந்த முறை பல நிலைகளைக் கொண்டுள்ளது: முதலில், பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட சேர்மங்கள் மென்மையாக அயனியாக்கம் செய்யப்படுகின்றன, முதல் பகுப்பாய்வி வழியாகச் செல்கின்றன, பின்னர் அவற்றின் ஆற்றல் அதிகரிக்கிறது, இதன் காரணமாக ஆய்வின் கீழ் உள்ள மூலக்கூறுகள் துண்டு துண்டாகி, இரண்டாவது பகுப்பாய்வி அதன் விளைவாக வரும் வெகுஜனத்தைப் பதிவு செய்கிறது. ஸ்பெக்ட்ரம்.

புதிய மருந்து சேர்மங்களின் அளவு நிர்ணயத்திற்கு, பின்வரும் வகையான வெகுஜன பகுப்பாய்விகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன:

Quadrupole (மூன்று குவாட்ரூபோல்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட வெகுஜன பகுப்பாய்வி), இது புதிய மருத்துவ கலவைகளின் ஆய்வில் "தங்கத் தரம்" ஆகும்;

டைம்-ஆஃப்-ஃப்ளைட் (TOF), டிரிபிள் க்வாட்ரூபோல் பகுப்பாய்விகளைப் பயன்படுத்துவதை விட, பயன்படுத்தப்படும் போது குறைந்த உணர்திறனை அடைகிறது.

அயன் சைக்ளோட்ரான் அதிர்வு மற்றும் ஆர்பிட்டல் அயன் ட்ராப், இவை உயர் தெளிவுத்திறன் கொண்ட வெகுஜன பகுப்பாய்விகள் மற்றும் அத்தகைய சாதனங்களின் அதிக விலை மற்றும் சிக்கலான தன்மை காரணமாக இதுவரை அரிதாகவே பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

HPLC உடன் இணைந்து மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி கண்டறிதலின் பயன்பாடு அதிக அளவிலான பகுப்பாய்வுகளை அடைவதை சாத்தியமாக்கியுள்ளது, மருந்து கலவைகளின் கண்டறிதல் வரம்பை அதிகரிக்கிறது மற்றும் ஆய்வுகளின் நிலைத்தன்மை மற்றும் துல்லியத்தை கணிசமாக மேம்படுத்துகிறது.

• மெல்லிய அடுக்கு நிறமூர்த்தம்

இன்று, HPLC, திரவ நிரல் குரோமடோகிராபி, அயன் எக்ஸ்சேஞ்ச் க்ரோமடோகிராபி, புரோட்டீன் பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மற்றும் கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் போன்ற பெப்டைட் பிரிப்புக்கான உயர்-தொழில்நுட்ப முறைகள் கிடைத்துள்ளதால், டிஎல்சி மிகவும் குறைந்த அளவிலேயே பயன்படுத்தப்படுகிறது. இருப்பினும், TLC அதன் காலத்தில் ஒரு அளவு, உயர் தொழில்நுட்பம், ஒப்பீட்டளவில் மலிவான மற்றும் எளிதில் மீண்டும் உருவாக்கக்கூடிய முறையாக நிரூபிக்கப்பட்டது. மெல்லிய அடுக்கு குரோமடோகிராபி 80 களில் பிரபலமாக இருந்தது - அமினோ அமிலங்கள் தாவரங்கள், விலங்குகள் மற்றும் பல்வேறு உயிரியல் திரவங்களிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டன.