چه مدت پس از عفونت HIV آزمایش خون، زمان، نتایج، انواع آزمایش ها نشان داده می شود. اصول استفاده از تشخیص PCR برای HIV PCR برای HIV که در آن می توانید آن را دریافت کنید

شرح

روش تعیین تعیین کمی، PCR با تشخیص بلادرنگ.

مواد مورد مطالعه پلاسمای خون (EDTA)

بازدید از خانه در دسترس است

تعیین RNA HIV نوع 1 در پلاسمای خون توسط PCR با تشخیص بلادرنگ. این مطالعه با استفاده از تجهیزات Hoffmann-La Roche (سوئیس) با استفاده از فناوری استاندارد شده با آماده‌سازی نمونه خودکار انجام شده است.

مطالعه غلظت RNA HIV نوع 1 در خون، که برای پیش بینی و نظارت بر اثربخشی درمان استفاده می شود.

ویروس نقص ایمنی انسانی (HIV) عامل ایجاد کننده سندرم نقص ایمنی اکتسابی (ایدز) است. عفونت HIV می تواند از طریق جنسی، از طریق خون و فرآورده های خونی آلوده یا از مادر آلوده به جنین منتقل شود. بین 3 تا 6 هفته پس از عفونت، معمولاً یک سندرم حاد کوتاه مدت ایجاد می شود که با علائم مشابه آنفولانزا و سطوح بالای ویرمی در خون محیطی مشخص می شود. در بیشتر موارد، پاسخ ایمنی اختصاصی HIV و کاهش ویرمی پلاسما معمولاً در عرض 4 تا 6 هفته پس از شروع علائم ایجاد می شود. پس از تبدیل سرمی (ظاهر آنتی بادی های خاص)، یک مرحله بدون علامت با ثبات بالینی شروع می شود که می تواند سال ها ادامه یابد. دوره بدون علامت با سطح پایین ویرمی مداوم در پلاسما و کاهش تدریجی سطح لنفوسیت های T CD4 + مشخص می شود که متعاقباً منجر به ایجاد نقص ایمنی شدید، عفونت های فرصت طلب متعدد، انکوژنز و مرگ می شود. در افراد مبتلا به عفونت HIV-1 ثابت، اندازه گیری کمی سطح HIV-1 RNA در خون به منظور پیش آگهی و نظارت بر درمان ضد رتروویروسی استفاده می شود.

شاخص های تحلیلی:

ویژگی بالینی آزمایش: 100٪، با فاصله اطمینان 99.6-100٪.

حساسیت تست: از 20 کپی در میلی لیتر.

محدوده تست خطی: 20 – 1 * 10 7 کپی در میلی لیتر

زیرگروه های گروه M و O (HIV-1) تجزیه و تحلیل می شوند.

موارد مصرف

این آزمایش برای استفاده در مدیریت بیماران مبتلا به HIV-1 در ارتباط با داده های بالینی و سایر نشانگرهای آزمایشگاهی پیشرفت بیماری در نظر گرفته شده است. این آزمایش برای پیش آگهی (بر اساس سطح پایه HIV-1 RNA) یا برای نظارت بر اثربخشی درمان ضد رتروویروسی (بر اساس تغییرات در سطوح RNA HIV-1 پلاسما در طول درمان ضد رتروویروسی) استفاده می شود.

احتیاط: این آزمایش برای غربالگری HIV-1 در خون و فرآورده های خونی یا برای تشخیص تاییدی عفونت HIV-1 در نظر گرفته نشده است.

تفسیر نتایج

تفسیر نتایج تحقیق حاوی اطلاعاتی برای پزشک معالج است و تشخیص نیست. اطلاعات این بخش نباید برای خود تشخیصی یا خوددرمانی استفاده شود. پزشک هم با استفاده از نتایج این معاینه و هم با استفاده از اطلاعات لازم از منابع دیگر: سابقه پزشکی، نتایج سایر معاینات و غیره، تشخیص دقیق می دهد.

واحدهای اندازه گیری: مقدار RNA ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 شناسایی شده که بر حسب C/ml بیان می شود (کپی/ml). یک کپی از RNA HIV-1 مطابق با 1.67 واحد بین المللی (IU) مطابق با اولین استاندارد بین المللی WHO برای HIV-1 RNA در آزمایش های تشخیص اسید نوکلئیک (NIBSC 97/656) است.

تفسیر نتیجه:

• "تشخیص نشده": RNA HIV-1 شناسایی نشده است یا مقدار آن زیر حد حساسیت روش است (20 کپی در میلی لیتر). نتیجه به عنوان "HIV-1 RNA شناسایی نشده" تفسیر می شود.
• < 20 C/ml (копий/мл): HIV-1 РНК выявлена в концентрации на пределе чувствительности метода, количественная характеристика в копиях/мл с удовлетворительной точностью невозможна;
• از 20 تا 10000000 C / ml (کپی / میلی لیتر): مقدار به دست آمده در محدوده خطی است، نتیجه قابل اعتماد است.
• > 10،000،000 C/ml (کپی در میلی لیتر): نتیجه به این صورت تفسیر می شود: «RNAHIV-1 در غلظت مشخص شده فراتر از حد بالایی محدوده خطی شناسایی شد. آزمایش در رقت 1:X انجام شد.

لطفاً توجه داشته باشید که زمان انجام آزمایشات PCR ممکن است افزایش یابد.

HIV PCR یکی از آموزنده ترین روش های تشخیص ژنتیکی مولکولی است. این روش به شناسایی انواع بیماری ها و بیماری های عفونی در بیمار که ارثی هستند کمک می کند. همین روش تشخیصی در مورد آزمایش بیومتریال برای وجود HIV، یک بیماری جدی که در طول زندگی بیمار ایجاد می شود، قابل استفاده است. با کمک پزشکی، PCR یکی از آزمایش‌های توصیه شده بود که به صورت پولی در موارد مشکوک به ویروس نقص ایمنی انسانی انجام می‌شد. با این حال، پایایی مطالعه تنها در 80 مورد از 100 مورد قابل توجیه است.

تشخیص PCR برای HIV مخفف واکنش زنجیره ای پلیمراز است. برای مطالعه این گونه از انواع مواد بیولوژیکی استفاده می شود. از جمله خون است، علاوه بر این می توان از ترشحات واژن یا مایع منی بیمار در مردان استفاده کرد.

توجه! بزاق برای PCR در تشخیص HIV استفاده نمی شود. این رویکرد بی اثر در نظر گرفته می شود، زیرا آنتی بادی های HIV در حداقل غلظت در این ماده هستند. همین امر در مورد ادرار، عرق و اشک نیز صدق می کند.

اندیکاسیون مطالعه توصیف شده یک ELISA مثبت دوگانه (آزمایش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم) است. تکالیف جایگزین بعداً مورد بحث قرار خواهد گرفت.

جزئیات در مورد ماهیت تجزیه و تحلیل

آزمایش PCR برای HIV بر اساس توانایی نوکلئیک اسید برای تولید مثل مستقل است. سلول های زنده از پروتئین و همین اسیدها، به عبارت دیگر، RNA و DNA تشکیل شده اند. مولکول ها به عنوان نگهبان کد ژنتیکی عمل می کنند.
در غلظت کم ذرات ویروسی (HIV) در بیومتریال، نمونه شامل کل زنجیره های DNA (دئوکسی ریبونوکلئیک اسید) نمی شود، بلکه فقط شامل اجزای آنها به نام نوکلئوتید می شود. تجزیه و تحلیل به شما امکان می دهد حتی بقایای جزئی سلول های ویروس را شناسایی کنید. این واقعیت است که توانایی PCR را برای نشان دادن نتایج در مراحل اولیه - چندین هفته پس از عفونت HIV توضیح می دهد.

هنگام بررسی خون وریدی می توان بهترین نتایج را از واکنش زنجیره ای پلیمراز انتظار داشت. نمونه با استفاده از تجهیزات هضم می شود. بخش ها سپس تحت درمان آنزیمی قرار می گیرند. مواد واکنش‌دهنده با ذرات DNA ویروسی ترکیب می‌شوند تا آن را تکثیر کنند. تعداد این عناصر بر اساس اصل زنجیره افزایش می یابد تا زمانی که وجود آنها (نه آنتی بادی) در خون بیمار برای تکنسین های آزمایشگاه قابل توجه باشد. هیچ یک از روش های تشخیصی موجود دقیقاً بر اساس یک اصل کار نمی کند.

اجزای واکنش

با استفاده از روش PCR، می توانید از قبل از ایجاد ویروس در بدن مطلع شوید. چرا نمی توان آن را در حوزه پزشکی رایگان محبوب خواند و در همه جا انجام داد؟ واقعیت این است که چنین آزمایش HIV بسیار گران است و به اجزای زیر نیاز دارد:

• یک ماتریس اسید دئوکسی ریبونوکلئیک شامل یک قطعه DNA در نظر گرفته شده برای تقویت.
• دو آغازگر (برای هر بخش زنجیره)؛
• یک جزء پلیمراز شیمیایی فعال برای تسریع پلیمریزاسیون ذرات ویروسی.
• تری فسفات دئوکسی ریبونوکلئوزید؛
• ذرات منیزیم دو ظرفیتی (شارژ شده)؛
• یک محلول ویژه برای ایجاد شرایط مطلوب، اطمینان از سطح مناسب اسیدیته، غلظت نمک و تعداد ذرات منیزیم در مایع.

توجه! برای محافظت از نمونه از گرمای بیش از حد، مقدار کمی ژله نفتی به مواد اضافه می شود که حاوی چربی و بر این اساس نقطه جوش بالایی است.

میزان دقت نسبتاً بالای تجزیه و تحلیل با افزایش حساسیت آن توضیح داده می شود، که باعث تحریک واکنش به آنتی بادی ها به سایر ویروس ها می شود.

مزایا و معایب روش PCR برای HIV

برای ارزیابی عینی روش، تعدادی از مزایا و معایب مطالعه را در جدول زیر ارائه می‌کنیم:

بدیهی است که این تکنیک مزایای بیشتری دارد. اگر نوع تشخیص را از نظر بهره وری درمان بعدی و امکان افزایش طول عمر بیمار ارزیابی کنیم، PCR مطمئن ترین راه برای موفقیت است.

ویژگی های تجزیه و تحلیل

ویژگی اصلی تجزیه و تحلیل توصیف شده، توانایی آن در تشخیص زودهنگام HIV است که سایر روش های تحقیقاتی قادر به انجام آن نیستند. چند روز بعد از عفونت مشکوک می توانم برای PCR خون اهدا کنم؟ به طور معمول این دوره زمانی 10-14 روز است. طی 24 ساعت آینده، بیمار نتیجه را دریافت می کند. انحرافات احتمالی در ضرب الاجل ها با شرایط عملکرد فردی مراکز و کلینیک های تشخیصی توضیح داده می شود.

هدف از مطالعه

PCR بیشتر برای تشخیص HIV (سندرم نقص ایمنی انسانی) انجام می شود. با این حال، در صورت مشکوک بودن به بیماری های مقاربتی نیز می توان آزمایش را انجام داد. همین روش در مورد تشخیص بیماری های ارثی نیز قابل اجرا است.

تشخیص PDR: دلایل انجام

چه زمانی باید برای PCR خون اهدا کرد؟ در بیشتر موارد، مواد بیولوژیکی زمانی اهدا می شود که ویروس نقص ایمنی انسانی با شرایط بدن سازگار شده، تولید آنتی بادی ها را تحریک کرده و اولین علائم HIV را ایجاد کرده باشد. با این حال، این تنها در صورتی قابل توجیه است که مدت زمان کافی پس از عفونت گذشته باشد و نیاز به الایزا داشته باشد.

نیاز به PCR به ابتکار بیمار ایجاد می شود که می خواهد به سرعت بیماری را تشخیص دهد (در صورت وجود). دلیل این امر ممکن است موارد زیر باشد: رابطه جنسی محافظت نشده، تماس با مواد بیولوژیکی یک فرد آلوده، انتقال خون اخیر و غیره.

PCR برای چه کسی تجویز می شود؟

تشخیص عفونت HIV با استفاده از PCR به توصیه متخصص در موارد زیر انجام می شود:

• تشخیص اولیه PCR به طور دقیق نتیجه ELISA را تایید یا رد می کند.
• ایمونوبلات تشخیص را تایید کرد. بلات ایمنی یک راه اضافی برای مطالعه ایدز است . هر دو روش با هم استفاده می شوند که امکان تشخیص اشتباه را از بین می برد.
• با وضعیت HIV تایید شدهبا استفاده از PCR، اثر درمان انتخابی بررسی می شود.
• برای آنالیز خون اهداکنندگانبرای وجود آنتی بادی HIV؛
• برای تعیین وضعیت HIV در یک نوزاد تازه متولد شده در صورت مثبت بودن آزمایش مادر. PCR در روزهای اول تولد تشخیص عفونت داخل رحمی یا عفونت نوزاد را در حین عبور از کانال زایمان ممکن می سازد. این آزمایش 2 تا 3 هفته پس از تولد انجام می شود.

چه مدت طول می کشد تا آزمایش PCR انجام شود و کجا می توان آن را انجام داد؟

تجزیه و تحلیل HIV PCR در یک آزمایشگاه ویژه انجام می شود. خود آزمایش و تفسیر نتیجه به زمان زیادی نیاز ندارد: یک ماه یا حتی یک هفته. خون گیری تا 6 دقیقه طول می کشد. در یک حالت عادی، یک متخصص بیش از یک روز برای تشخیص و صدور نتیجه نیاز ندارد. 8 ساعت اول صرف مطالعه خون و زمان باقی مانده صرف ثبت نام می شود. نتیجه را می توان همان روز بعد از نمونه برداری جمع آوری کرد. مدت زمان تست سریع 2 ساعت است.

توجه! بیمه نامه اجباری پزشکی به شما این امکان را می دهد که به صورت رایگان در یک موسسه مراقبت های بهداشتی عمومی شرکت کنید.

تقریباً هر آزمایشگاه تجاری قادر به انجام تحقیقات و به صورت ناشناس است. به شخص شماره خاصی اختصاص داده می شود که نتایج به آن پیوند داده می شود. این اطلاعات در حساب شخصی کاربر در وب سایت موسسه آپلود می شود.

هزینه انجام آزمایش PCR چقدر است؟

این روش انجام تحقیق بسیار گران است. این به این دلیل است که PCR باید بر روی آخرین تجهیزات پزشکی انجام شود، دستکاری نیاز به دانش کافی متخصصان دارد.

سوال مبرم این است: هزینه انجام آزمایش PCR برای HIV برای یک فرد چقدر است؟ این به حدود 56-60 دلار نیاز دارد.

انجام تحلیل

آزمایش PCR برای HIV شامل:

• نمونه گیری خون برای تحقیق؛
• جمع آوری اضافی اسپرم از یک مرد و ترشحات تناسلی از یک زن.

توجه! در نتیجه، این آزمایش به پزشکان اجازه می دهد تا بار ویروسی بالایی را برای نظارت بر وضعیت بیمار تعیین کنند.

سایر ویژگی های این آزمایش HIV که باید در نظر گرفته شود:

• چند روز قبل از آزمایش، بیمار باید مقدار غذاهای چرب را در رژیم غذایی کاهش دهد.
• خون با معده خالی گرفته می شود.
• آنزیم هایی که عفونت های مختلف را سنتز می کنند به مواد بیولوژیکی تقسیم شده در یک راکتور ویژه اضافه می شوند.
• تجزیه و تحلیل در چندین مرحله انجام می شود، زیرا تقسیم مولکول ها در یک پیشرفت حسابی اتفاق می افتد. یک برنامه ویژه تعداد زیادی از ساختارهای سلولی را برای تشخیص HIV مقایسه می کند.

روش های تشخیصی دقیق، که شامل PCR می شود، گران هستند، اما قادر به تشخیص HIV در مراحل اولیه هستند. در درمان این گونه آسیب شناسی ها مهم ترین نکته تشخیص صحیح و به موقع است که می تواند کیفیت زندگی و طول مدت آن را بهبود بخشد.

چرا HIV و ایدز اینقدر ترسناک است، چه روش های تشخیصی وجود دارد. اطلاعات عمیق در مورد مطالعات PCR.

بر اساس آمار ارائه شده توسط سازمان بهداشت جهانی به طور مشترک با سازمان ملل متحد UNAIDS، در طول چهل سال گذشته، بیش از 25 میلیون بیمار بر اثر اچ آی وی و ایدز جان خود را از دست داده اند. بی جهت نیست که اپیدمیولوژیست ها اچ آی وی را طاعون قرن بیستم نامیده اند، زیرا آسیب ناشی از این عفونت به بشریت بسیار زیاد است. کشورهای قاره آفریقا به شدت آلوده بودند. این عفونت به شدت به اقتصاد کشورهای بی ثبات ضربه می زند و مردم فقیر هستند.

هنگامی که علائم ظاهر می شوند، تشخیص سریع بسیار مهم است.عفونت بدن با عفونت HIV، زیرا یک دوره درمانی به موقع می تواند باعث نجات یا حداقل افزایش زندگی بیمار شود. امروزه پیشرفت تکنولوژی راه درازی را پیموده است: جدیدترین روش‌ها برای تشخیص ویروس HIV و ایدز اختراع شده است، درمان برای هر فردی در این سیاره در دسترس است، قابلیت اطمینان آزمایش‌ها با درجه کمی خطا مشخص می‌شود، و درمان بسیار موثر.

تشخیص عفونت HIV

در کشور ما تشخیص وجود عفونت HIV در بدن بیمار است مجموعه تحلیل ها:

• سنجش ایمونوسوربنت مرتبط
• بلات ایمنی
• واکنش زنجیره ای پلیمراز
• تست های اکسپرس

ایمونواسی آنزیمی

غربالگری (تست الایزا)مرحله اولیه تشخیص عفونت در بدن است. این بر اساس ترکیبات پروتئینی ویروس تشکیل شده در شرایط مصنوعی است که آنتی بادی های تولید شده توسط سلول های ایمنی را در واکنش به عفونت شناسایی می کند. یک واکنش شیمیایی بین معرف ها رخ می دهد که در نتیجه عنصر نشانگر تغییر رنگ می دهد. یعنی نتیجه آزمایش مثبت است. اطلاعات با استفاده از این روش را می توان در عرض چند هفته از لحظه آلودگی به دست آورد. این روش وجود عفونت را در بیمار تشخیص نمی دهد، بلکه آنتی بادی های تولید شده برای این عفونت را تعیین می کند. این اتفاق می افتد که تولید آنتی بادی ها 10-15 روز پس از عفونت شروع می شود، اما در اکثریت قریب به اتفاق موارد بعد - پس از 1-1.5 ماه.

اطلاعات مربوط به چنین تحلیلی از دو تا ده روز پردازش می شود.

قابلیت اطمینان دیانگوز برای HIV توسط تجزیه و تحلیل IB پشتیبانی می شود. یک آزمایش IB استثنایی مثبت برای ویروس می تواند دلیل قانع کننده ای برای تایید عفونت باشد.

اصل تحلیل:

نمونه خون وریدی برای تجزیه و تحلیل در آزمایشگاه گرفته می شود. نمونه به علاوه آماده می شود، ترکیبات پروتئینی موجود در آن در محفظه آزمایش الکتریکی می شوند و سپس با توجه به وزن مولکولی خود در ماده ژل توزیع می شوند. یک نوار کاغذی پوشیده شده با معرف چندین بار در نمونه آماده شده قرار می گیرد. اگر آنتی‌بادی‌هایی برای ویروس در نمونه وجود داشته باشد، یک واکنش شیمیایی رخ می‌دهد و خطوط روی نوار تست قابل مشاهده می‌شوند. هنگامی که 2 یا 3 خط تیره از p24، gp41 و gp120 یا gp160 ظاهر شد، نتیجه آزمایش مثبت است.

اگر از آنالیز IB نتیجه مثبت حاصل شود با خطای یک درصد می توان در مورد وجود عفونت HIV در بدن نتیجه گیری کرد.

آزمایشات سریع اچ آی وی و ایدز

جدیدترین فناوری ها برای تعیین ویروس نقص ایمنی در بدن روش های اکسپرس هستند. اطلاعات مربوط به چنین تحلیلی را می توان در عرض چند دقیقه پس از تکمیل به دست آورد. بالاترین قابلیت اطمینان در تست های ایمونوکروموگرافی یافت می شود - نوارهای تست ویژه که روی سطح آن لایه ای از معرف اسپری می شود. آنتی بادی های موجود در ماده آزمایش با معرف در تماس هستند و رنگ نشانگر را تغییر می دهند. پس از چند دقیقه، دو نوار ظاهر می شود که نشان دهنده وجود عفونت است. وجود یک خط به معنای عدم وجود عفونت است.

چنین آزمونی می تواند به عنوان یک آزمون اضافی مورد استفاده قرار گیرد؛ اطلاعات مربوط به چنین آزمونی لزوماً توسط مطالعات دیگر تأیید می شود.

هزینه آزمایش سریع اچ آی وی چقدر است؟

یک آزمایش سریع برای HIV به طور متوسط ​​200-1000 روبل هزینه دارد.

تکنیک تشخیصی PCR در ابتدا 35 سال پیش توسط دانشمند آمریکایی Kari Mullis توسعه یافت. مخترع این مطالعه جایزه بین المللی نوبل را در سال 1993 برای نوآوری خود دریافت کرد. برای هر فعالیت آزمایشگاهی ضروری شده است.

PCR در زیست شناسی مولکولی برای ساختن کپی های زیادی (تقویت) بخش های کوچک DNA استفاده می شود. DNA پلیمراز فقط می تواند یک نوکلئوتید را به یک گروه 3-OH از قبل موجود اضافه کند. بنابراین او به یک آغازگر نیاز دارد که بتواند اولین نوکلئوتید را به آن اضافه کند. این نیاز به شما امکان می دهد بخش خاصی از توالی الگو را که نیاز به تشخیص دارد شناسایی کنید. در پایان واکنش PCR، یک توالی خاص به میلیاردها نسخه (آمپلیکون) انباشته می شود.

PCR شامل یک فرآیند گرمایش و سرمایش به نام سیکل حرارتی است که توسط تجهیزات تخصصی انجام می شود. واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) یک تکنیک نسبتا ساده است. این الگوی DNA را برای تولید قطعات خاص DNA در شرایط آزمایشگاهی (تحلیل در شرایط آزمایشگاهی) تقویت می کند. روش‌های سنتی شبیه‌سازی یک توالی DNA در یک ناقل و تکثیر آن در یک سلول زنده اغلب به چندین روز تا چند هفته تحقیق نیاز دارند. اما پس از چند ساعت می‌توانید نتایج تکثیر توالی DNA را با استفاده از PCR دریافت کنید.

اکثر آزمایش‌های بیوشیمیایی که در تشخیص بیماری‌های عفونی استفاده می‌شوند، به مقدار نسبتاً زیادی مواد بیولوژیکی نیاز دارند. برای PCR این شرط اجباری نیست. بنابراین، PCR ممکن است تشخیص پاتوژن حساس تری را فراهم کند. و سطوح بالاتر تقویت توالی های خاص در زمان کمتر با مقدار نسبتاً محدودی از مواد زیستی. این ویژگی ها این فناوری را بسیار مفید می کند. نه تنها برای تحقیقات پایه، بلکه برای اهداف شخصی. از جمله تست هویت ژنتیکی، تست پزشکی قانونی، کنترل کیفیت صنعتی.

ارزش اصلی تجزیه و تحلیل در توانایی شناسایی آسیب شناسی های مقاربتی قبل از ایجاد اولین علائم نهفته است. زمانی که تشخیص زودهنگام عفونت HIV ضروری باشد از آنالیز PCR استفاده می شود. و همچنین تعیین RNA ویروس در خون اهدا کننده. با توجه به حساسیت بالای تجزیه و تحلیل، می توان 7-14 روز پس از عفونت مشکوک به آن پاسخ داد. قابلیت اطمینان تشخیصی از 85 تا 98 درصد خواهد رسید. با این حال، آزمایش PCR برای همه تجویز نمی شود. زیرا مطالعه نسبتاً گرانی است. مهمتر از همه، نیاز به تجهیزات گران قیمت و مهارت های حرفه ای خاصی از کارکنان آزمایشگاه دارد. اگر بیمار قبلاً در موقعیت های مرتبط با افزایش خطر عفونت نبوده است، واکنش پلیمراز توصیه نمی شود.

واکنش کیفی پلیمراز برای HIV

انجام PCR با کیفیت بالا برای HIV به شما امکان می دهد وجود یک بیماری ویروسی را در بدن تعیین کنید. بیمار می تواند نتیجه را به صورت علائم زیر دریافت کند: مثبت، مثبت کاذب، منفی. اما این مطالعه امکان تعیین تعداد نسخه های رتروویروس را فراهم نمی کند. تجزیه و تحلیل کیفی در بیمارانی که قبلاً عفونت تشخیص داده شده است انجام نمی شود. برای نظارت بر اثربخشی درمان ضد ویروسی تجویز نمی شود.

PCR کمی برای HIV

این برای تعیین نسخه هایی از ویروس RNA در مواد بیولوژیکی بیمار انجام می شود. PCR کمی تنها برای بیماران مبتلا به عفونت شناسایی شده قبلی، به عنوان نظارت بر درمان مداوم تجویز می شود.

Real-time PCR

در تشخیص های آزمایشگاهی برای ایجاد کپی از بخش های DNA استفاده می شود. همچنین برای تحقیقات کمی و همزمان تشخیص توالی DNA در بیومتریال. اساساً تشخیص PCR کمی است.

در یک یادداشت!

در آزمایشگاه های مختلف می توانید چندین فرمول تشخیصی پیدا کنید: "تعیین کمی PCR" و "PCR بلادرنگ".

هر دو تحلیل یکسان هستند.

گرفتن مواد برای تشخیص HIV

جمع آوری مواد بیولوژیکی برای تشخیص HIV با استفاده از PCR طبق استانداردهای خاصی انجام می شود. دستکاری در اتاق درمان انجام می شود. از ابزار استریل یکبار مصرف استفاده می شود. بسته با ابزار مستقیماً در نزدیکی بیمار باز می شود. مواد جمع‌آوری‌شده در لوله‌های استریل که از قبل با CrO3 (مخلوط کروم) تیمار شده‌اند قرار داده می‌شوند. ماده بیولوژیکی خون وریدی است که صبح و با معده خالی اهدا می شود. چند روز قبل از انجام آزمایش، باید از نوشیدن الکل، غذاهای چرب و تند خودداری کنید و مصرف داروها را قطع کنید.

اگر امکان قطع دارو وجود ندارد، باید قبل از آزمایش گزارش شود.

علاوه بر این، ممکن است یک اسمیر از مجرای ادرار و واژن برای شناسایی بیماری های مقاربتی همزمان گرفته شود. مطالعه به صورت ناشناس انجام می شود و بیمار نتایج را شخصا دریافت می کند. توصیه می شود شناسنامه خود را همراه داشته باشید.

چه مدت بعد می توانید آزمایش PCR برای HIV انجام دهید؟

پس از آن می توان وجود ویروس HIV را تشخیص داد 4-6 روز بعد از عفونت در این صورت محتوای اطلاعاتی تحلیل به 85 درصد خواهد رسید. پس از 10-13 روز، تجزیه و تحلیل می تواند بیماری را با دقت 98٪ تعیین کند. نتیجه منفی تنها در صورتی صادق است که زودتر از 2 هفته پس از عفونت مشکوک مصرف نشود.

دلایل نتیجه مثبت کاذب

گرفتن نتیجه مثبت کاذب بسیار دشوار است.

این امر در صورت عدم رعایت قوانین جمع آوری مواد بیولوژیکی، برچسب نادرست لوله ها، استفاده از سیستم تست با کیفیت پایین و سایر عوامل مشابه امکان پذیر است. در سایر موارد، شانس به دست آوردن نتیجه مشابه بیش از 2٪ نیست.

چه مدت طول می کشد تا نتایج آزمایش به دست آید؟

از نقطه نظر فنی، نتایج PCR را می توان در عرض 4 ساعت به دست آورد. اما در عمل، بیمار از یک تا چند روز گزارش آزمایشگاهی دریافت می کند. به طور کلی زمان بندی بستگی به حجم کاری آزمایشگاه و سازماندهی کار آن دارد.

انجام واکنش پلیمراز در نوزاد تازه متولد شده

PCR زمانی تجویز می شود که کودک از مادر HIV مثبت متولد شود. انجام ELISA در این مورد آموزنده نیست. از آنجایی که کودک تا حدود 2 سالگی آنتی بادی های ضد رتروویروس را حفظ می کند. به همین دلیل، ایمونواسی آنزیمی پاسخ دقیقی نخواهد داد. اگر آزمایش PCR روی کودک 6-4 هفتگی انجام شود و نتیجه مثبت حاصل شود، در مورد عفونت صحبت خواهیم کرد.

اگر PCR انجام شده بین 8 هفته تا 6 ماهگی نتایج منفی نشان دهد (به شرطی که کودک از شیر مادر تغذیه نکرده باشد)، عفونت منتفی است.

چرا PCR برای تشخیص HIV بهتر از الایزا است؟

واکنش پلیمراز تشخیص RNA ویروس و حضور آن در بدن، از جمله موارد کمی را ممکن می سازد. وظیفه ELISA تعیین آنتی بادی برای عفونت HIV است. سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم در تعیین عفونت احتمالی کمتر از PCR نیست، دقت آن به 99٪ می رسد. با این حال، برخلاف PCR، قادر به تشخیص بیماری در مراحل اولیه توسعه آن نیست.

مزایای HIV PCR

• واکنش پلیمراز به طور مستقیم وجود یک عامل عفونی را تعیین می کند. به عنوان مثال، ELISA می تواند به طور انحصاری آنتی بادی ها و مواد زائد یک میکروارگانیسم را شناسایی کند.
• این آزمایش به وضوح یک پاتوژن خاص را شناسایی می کند، حتی اگر چندین پاتوژن با واکنش متقابل وجود داشته باشد.
• این تکنیک به شما امکان می دهد هر نوع ماده بیولوژیکی، از جمله قطرات خشک شده خون را بررسی کنید.

یکی از معایب PCR افزایش حساسیت آنالیز است. این گاهی اوقات باعث یک نتیجه مثبت کاذب می شود. اگر حتی مقدار کمی DNA خارجی در یک لوله آزمایش یا روی ابزار وجود داشته باشد، این اتفاق می افتد.

تشخیص HIV با استفاده از PCR و ELISA: تفسیر، قابلیت اطمینان نتایج

ایمونواسی آنزیمی که در آن نتایج آزمایش نشان دهنده عدم وجود آنتی بادی علیه HIV و آنتی ژن p24 در بدن است، منفی است. در صورت وجود این مولکول ها، نتیجه تشخیصی مثبت صادر می شود. در برخی موارد، بیمار ممکن است نتیجه مثبت یا منفی کاذب دریافت کند. این عواقب اوایل بارداری، وجود عفونت تبخال، نمونه برداری نادرست از مواد و اختلال در حمل و نقل لوله های آزمایش است. علاوه بر این، نتایج مشابهی در بیماران مبتلا به بیماری های خودایمنی مداوم و انواع مختلف هپاتیت یافت می شود. وسترن بلات (بلات ایمنی)، که ترکیبی از ELISA و جداسازی پروتئین ویروسی است، می تواند انجام شود.

سپس یک نتیجه مثبت در حضور عفونت ویروسی گلیکوپروتئین gp160 خواهد بود. این یک پیش ساز برای گلیکوپروتئین های پوششی HIV gp41 و gp120 است. اگر این مولکول ها وجود نداشته باشند، نتیجه آزمایش آزمایشگاهی منفی تلقی می شود. انجام وسترن بلات در ترکیب با ELISA به شما امکان می دهد نتایجی را بدست آورید که قابلیت اطمینان آنها از 98٪ فراتر می رود. در مواردی که الایزا مثبت و وسترن بلات منفی باشد، آزمایش مشکوک تلقی می شود و نیاز به PCR دارد.