Kiek laiko po ŽIV užsikrėtimo parodys kraujo tyrimas, laikas, rezultatai, tyrimų tipai. ŽIV PGR diagnostikos naudojimo principai ŽIV PGR, kur ją galite gauti

apibūdinimas

Nustatymo metodas Kiekybinis nustatymas, PGR su aptikimu realiuoju laiku.

Tiriama medžiaga Kraujo plazma (EDTA)

Galimas vizitas į namus

ŽIV 1 tipo RNR nustatymas kraujo plazmoje PGR metodu su aptikimu realiuoju laiku. Tyrimas atliekamas su Hoffmann-La Roche (Šveicarija) įranga, naudojant standartizuotą technologiją su automatizuotu mėginių paruošimu.

ŽIV 1 tipo RNR koncentracijos kraujyje tyrimas, kuris naudojamas prognozuoti ir stebėti gydymo veiksmingumą.

Žmogaus imunodeficito virusas (ŽIV) yra įgyto imunodeficito sindromo (AIDS) etiologinis veiksnys. ŽIV infekcija gali būti perduodama lytiniu keliu, per užkrėstą kraują ir jo produktus arba nuo užsikrėtusios motinos vaisiui. Praėjus 3–6 savaitėms po užsikrėtimo, dažniausiai išsivysto trumpalaikis ūmus sindromas, kuriam būdingi į gripą panašūs simptomai ir didelis viremijos kiekis periferiniame kraujyje. Dažniausiai per 4–6 savaites nuo simptomų atsiradimo atsiranda ŽIV specifinis imuninis atsakas ir sumažėja viremija plazmoje. Po serokonversijos (specifinių antikūnų atsiradimo) prasideda kliniškai stabili besimptomė fazė, kuri gali tęstis metus. Asimptominiam periodui būdingas mažas nuolatinės viremijos lygis plazmoje ir laipsniškas CD4+ T-limfocitų kiekio sumažėjimas, dėl kurio išsivysto sunkus imunodeficitas, daugybinės oportunistinės infekcijos, onkogenezė ir mirtis. Asmenims, kuriems nustatyta ŽIV-1 infekcija, antiretrovirusinio gydymo prognozavimui ir stebėjimui naudojamas kiekybinis ŽIV-1 RNR kiekio kraujyje matavimas.

Analitiniai rodikliai:

Klinikinis tyrimo specifiškumas: 100%, pasikliautinuoju intervalu 99,6-100%.

Testo jautrumas: nuo 20 kopijų/ml.

Linijinio tyrimo diapazonas: 20 – 1 * 10 7 kopijos/ml

Analizuojami M ir O grupės (ŽIV-1) potipiai.

Naudojimo indikacijos

Tyrimas skirtas ŽIV-1 užsikrėtusiems pacientams gydyti, kartu su klinikiniais duomenimis ir kitais laboratoriniais ligos progresavimo žymenimis. Testas naudojamas prognozuoti (remiantis pradiniu ŽIV-1 RNR lygiu) arba antiretrovirusinio gydymo veiksmingumui stebėti (remiantis ŽIV-1 RNR koncentracijos plazmoje pokyčiais antiretrovirusinio gydymo metu).

Atsargiai: testas nėra skirtas ŽIV-1 atrankai kraujyje ir kraujo produktuose arba ŽIV-1 infekcijos diagnozei patvirtinti.

Rezultatų interpretacija

Tyrimo rezultatų interpretacijoje pateikiama informacija gydančiam gydytojui ir tai nėra diagnozė. Šiame skyriuje pateikta informacija neturėtų būti naudojama savidiagnostikai ar savęs gydymui. Tikslią diagnozę gydytojas nustato naudodamas tiek šio tyrimo rezultatus, tiek reikiamą informaciją iš kitų šaltinių: ligos istoriją, kitų tyrimų rezultatus ir kt.

Matavimo vienetai: aptikto žmogaus imunodeficito viruso 1 tipo RNR kiekis, išreikštas C/ml (kopijos/ml). Viena ŽIV-1 RNR kopija atitinka 1,67 tarptautinių vienetų (TV) pagal pirmąjį PSO tarptautinį ŽIV-1 RNR standartą atliekant nukleorūgščių nustatymo testus (NIBSC 97/656).

Rezultato interpretacija:

• „neaptikta“: ŽIV-1 RNR neaptikta arba vertė yra mažesnė už metodo jautrumo ribą (20 kopijų/ml). Rezultatas interpretuojamas kaip „ŽIV-1 RNR neaptikta“;
• < 20 C/ml (копий/мл): HIV-1 РНК выявлена в концентрации на пределе чувствительности метода, количественная характеристика в копиях/мл с удовлетворительной точностью невозможна;
• nuo 20 iki 10000000 C/ml (kopijų/ml): gauta vertė yra tiesiniame diapazone, rezultatas patikimas;
• >10 000 000 C/ml (kopijų/ml): Rezultatas interpretuojamas taip: „ŽIV-1 RNR buvo aptikta, kai nurodyta koncentracija viršija viršutinę linijinio diapazono ribą; Bandymas buvo atliktas praskiedus 1:X.

Atkreipkite dėmesį, kad PGR tyrimų atlikimo laikas gali pailgėti, kai atliekami patvirtinamieji tyrimai.

ŽIV PGR yra vienas informatyviausių molekulinės genetinės diagnostikos metodų. Šis metodas padeda nustatyti įvairius paciento infekcinių negalavimų ir ligų tipus, kurie yra paveldimi. Tas pats diagnostikos metodas taikomas tiriant biomedžiagą, ar nėra ŽIV – sunkios ligos, kuri vystosi visą paciento gyvenimą. Su medicinine pagalba PGR buvo vienas iš rekomenduojamų mokamų tyrimų, atliekamų įtarus žmogaus imunodeficito virusą. Tačiau tyrimo patikimumas pasiteisina tik 80 atvejų iš 100.

ŽIV PGR diagnostika reiškia polimerazės grandininę reakciją. Šiai rūšiai tirti naudojamos įvairios biologinės medžiagos. Tarp jų yra kraujas, be to, gali būti naudojamas sekretas iš paciento makšties ar sėklų skystis vyrams.

Dėmesio! Seilės nenaudojamos PGR diagnozuojant ŽIV. Šis metodas laikomas neveiksmingu, nes antikūnų prieš ŽIV šioje medžiagoje yra minimali. Tas pats pasakytina apie šlapimą, prakaitą ir ašaras.

Aprašyto tyrimo indikacija yra dvigubai teigiamas ELISA (fermentinis imunosorbentinis tyrimas). Alternatyvios užduotys bus aptartos vėliau.

Išsami informacija apie analizės esmę

PGR tyrimas dėl ŽIV yra pagrįstas nukleino rūgšties gebėjimu daugintis savarankiškai. Gyvos ląstelės susideda iš baltymų ir tų pačių rūgščių, kitaip tariant, RNR ir DNR. Molekulės veikia kaip genetinio kodo sergėtojai.
Esant mažai virusinių dalelių (ŽIV) koncentracijai biomedžiagoje, mėginyje nėra visos DNR grandinės (dezoksiribonukleino rūgšties), o tik jų komponentai, vadinami nukleotidais. Analizė leidžia aptikti net nedidelius virusinių ląstelių likučius. Būtent šis faktas paaiškina PGR gebėjimą parodyti rezultatus ankstyvosiose stadijose – praėjus kelioms savaitėms po ŽIV užsikrėtimo.

Geriausių polimerazės grandininės reakcijos rezultatų galima tikėtis tiriant veninį kraują. Mėginys virškinamas naudojant įrangą. Tada frakcijos yra apdorojamos fermentiniu būdu. Reaktyviosios medžiagos susijungia su viruso DNR dalelėmis, kad ją dubliuotų. Tokių elementų skaičius didėja grandinės principu, kol jų (ne antikūnų) buvimas paciento kraujyje tampa pastebimas laboratorijos technikai. Nė vienas iš esamų diagnostikos metodų neveikia visiškai tuo pačiu principu.

Reakcijos komponentai

Naudodami PGR metodą galite iš anksto sužinoti apie viruso vystymąsi organizme. Kodėl to negalima vadinti populiariu nemokamos medicinos srityje ir daryti visur? Faktas yra tas, kad toks ŽIV testas yra labai brangus ir reikalauja šių komponentų:

• dezoksiribonukleorūgšties matricą, įskaitant DNR segmentą, skirtą amplifikacijai;
• du pradmenys (kiekvienam grandinės segmentui);
• chemiškai aktyvus polimerazės komponentas, pagreitinantis virusinių dalelių polimerizaciją;
• dezoksiribonukleozidų trifosfatai;
• dvivalenčių magnio dalelių (įkrautų);
• specialus sprendimas palankioms sąlygoms sukurti, užtikrinantis tinkamą rūgštingumo lygį, druskų koncentraciją, magnio dalelių skaičių skystyje.

Dėmesio! Siekiant apsaugoti mėginį nuo perkaitimo, į medžiagą, kurioje yra riebalų ir atitinkamai aukštą virimo temperatūrą, įpilamas nedidelis vazelino kiekis.

Santykinai didelis analizės tikslumas paaiškinamas padidėjusiu jautrumu, kuris skatina reakciją į antikūnus prieš kitus virusus.

ŽIV PGR metodo privalumai ir trūkumai

Norėdami objektyviai įvertinti metodą, žemiau esančioje lentelėje pateikiame keletą tyrimo privalumų ir trūkumų:

Akivaizdu, kad yra daugiau šios technikos privalumų. Įvertinus diagnozės tipą tolesnio gydymo produktyvumo ir paciento gyvenimo pailginimo galimybės požiūriu, PGR yra patikimiausias kelias į sėkmę.

Analizės ypatybės

Pagrindinis aprašytos analizės bruožas yra galimybė anksti diagnozuoti ŽIV, ko nepajėgia kiti tyrimo metodai. Kiek dienų po įtariamos infekcijos galiu duoti kraujo PGR? Paprastai šis laikotarpis yra 10–14 dienų. Per kitas 24 valandas pacientas gauna rezultatą. Galimi terminų nukrypimai paaiškinami individualiomis diagnostikos centrų ir klinikų veiklos sąlygomis.

Tyrimo tikslas

PGR dažniausiai atliekama siekiant nustatyti ŽIV (žmogaus imunodeficito sindromą). Tačiau testą galima atlikti ir įtarus lytiškai plintančių ligų išsivystymą. Tas pats metodas taikomas ir diagnozuojant paveldimas ligas.

PDR diagnostika: atlikimo priežastys

Kada turėtumėte duoti kraujo PGR? Daugeliu atvejų biologinė medžiaga dovanojama, kai žmogaus imunodeficito virusas prisitaiko prie organizmo sąlygų, paskatino antikūnų gamybą ir sukėlė pirmuosius ŽIV simptomus. Tačiau tai pateisinama tik tuo atveju, jei po užsikrėtimo praėjo pakankamai laiko ir reikalingas ELISA tyrimas.

PGR poreikis atsiranda paciento, norinčio operatyviai diagnozuoti ligą (jei tokia yra), iniciatyva. To priežastis gali būti: neapsaugoti lytiniai santykiai, kontaktas su užsikrėtusio asmens biologine medžiaga, neseniai atliktas kraujo perpylimas ir kt.

Kam skiriamas PGR?

ŽIV infekcijos nustatymas naudojant PGR, specialisto rekomendacija, atliekamas šiais atvejais:

• preliminari diagnozė. PGR tiksliai patvirtina arba paneigia ELISA rezultatą;
• Imunoblotas patvirtino diagnozę. Imuninis blotingas yra papildomas būdas tirti AIDS . Abu metodai naudojami kartu, o tai pašalina klaidingos diagnozės galimybę;
• su patvirtintu ŽIV statusu naudojant PGR, stebimas pasirinkto gydymo poveikis;
• donorų kraujo analizei dėl ŽIV antikūnų buvimo;
• nustatyti naujagimio ŽIV būklę, kai motinos testas yra teigiamas. PGR pirmosiomis gyvenimo dienomis leidžia nustatyti intrauterinę infekciją arba kūdikio infekciją, praeinant per gimdymo kanalą. Tyrimas atliekamas praėjus 2–3 savaitėms po gimimo.

Kiek laiko užtrunka PGR tyrimas ir kur jį galima atlikti?

ŽIV PGR analizė atliekama specialioje laboratorijoje. Pats testas ir rezultato interpretavimas nereikalauja daug laiko: mėnesio ar net savaitės. Kraujo paėmimas trunka iki 6 minučių. Įprastu atveju specialistui diagnozei nustatyti ir išvadai pateikti prireiks ne daugiau nei dienos. Pirmos 8 valandos skiriamos tiriant kraują, likęs laikas – registracijai. Rezultatas gali būti paimtas jau kitą dieną po mėginio paėmimo. Greitojo testavimo trukmė – 2 valandos.

Dėmesio! Privalomojo sveikatos draudimo polisas leidžia nemokamai atlikti testą valstybinėje sveikatos priežiūros įstaigoje.

Beveik bet kuri komercinė laboratorija gali atlikti tyrimus ir anonimiškai. Asmeniui priskiriamas specialus numeris, su kuriuo vėliau susiejami rezultatai. Ši informacija įkeliama į įstaigos svetainę vartotojo asmeninėje paskyroje.

Kiek kainuoja atlikti PGR testą?

Šis tyrimo atlikimo būdas yra gana brangus. Taip yra dėl to, kad PGR turi būti atliekama naudojant naujausią medicininę įrangą, manipuliuoti specialistai turi turėti pakankamai žinių.

Kyla aktualus klausimas: kiek kainuoja žmogui atlikti PGR tyrimą dėl ŽIV? Tam reikės apie 56–60 USD.

Analizės atlikimas

PGR tyrimas dėl ŽIV apima:

• kraujo mėginių ėmimas tyrimams;
• papildomas spermos paėmimas iš vyro ir lytinių organų išskyros iš moters.

Dėmesio! Dėl to tyrimas leidžia gydytojams nustatyti didelį viruso kiekį, kad būtų galima stebėti paciento būklę.

Kitos šio ŽIV testo ypatybės, į kurias reikėtų atsižvelgti:

• likus porai dienų iki tyrimo pacientas turi sumažinti riebaus maisto kiekį dietoje;
• Kraujas imamas tuščiu skrandžiu;
• Į suskaidytas biologines medžiagas specialiame reaktoriuje dedami fermentai, sintetinantys įvairias infekcijas;
• analizė atliekama keliais etapais, nes molekulių dalijimasis vyksta aritmetine progresija. Speciali programa palygina daugybę ląstelių struktūrų, kad nustatytų ŽIV.

Tikslūs diagnostikos metodai, įskaitant PGR, yra brangūs, tačiau jais galima nustatyti ŽIV ankstyvose stadijose. Gydant tokias patologijas, svarbiausia teisinga ir savalaikė diagnozė, galinti pagerinti žmogaus gyvenimo kokybę ir trukmę.

Kodėl ŽIV ir AIDS tokie baisūs, kokie yra diagnostikos metodai. Išsami informacija apie PGR tyrimus.

Remiantis Pasaulio sveikatos organizacijos kartu su JT organizacija UNAIDS pateikta statistika, per pastaruosius keturiasdešimt metų nuo ŽIV ir AIDS mirė daugiau nei 25 mln. Ne veltui epidemiologai ŽIV pavadino XX amžiaus maru, nes šios infekcijos daroma žala žmonijai yra didžiulė. Labiausiai užkrėstos Afrikos žemyno šalys. Infekcija smarkiai smogia ir taip nestabilių valstybių ekonomikai, o žmonės skursta.

Atsiradus simptomams, labai svarbu greitai diagnozuoti. organizmo užsikrėtimas ŽIV infekcija, nes savalaikis gydymo kursas gali išgelbėti ar bent padidinti paciento gyvenimą. Šiais laikais technologinė pažanga nuėjo ilgą kelią: buvo išrasti naujausi ŽIV ir AIDS viruso diagnozavimo metodai, gydymas yra prieinamas bet kuriam planetos žmogui, tyrimų patikimumas pasižymi nedideliu klaidų laipsniu, o gydymas labai efektyvus.

ŽIV infekcijos diagnozė

Mūsų šalyje ŽIV infekcijos buvimo paciento organizme nustatymas yra analizės kompleksas:

• Susietas imunosorbento tyrimas
• Imuninis blotingas
• Polimerazės grandininė reakcija
• Ekspresiniai testai

Fermentinis imunologinis tyrimas.

Atranka (ELISA testas) yra pradinis infekcijos nustatymo organizme etapas. Jis pagrįstas dirbtinėmis sąlygomis susidarančių viruso baltymų junginiais, kurie identifikuoja imuninių ląstelių gaminamus antikūnus kaip reakciją į infekciją. Tarp reagentų vyksta cheminė reakcija, dėl kurios indikatoriaus elementas keičia spalvą. Tai reiškia, kad tyrimo rezultatas yra teigiamas. Informaciją naudojant šį metodą galima gauti per porą savaičių nuo užsikrėtimo momento. Šis metodas neaptinka paciento infekcijos, o nustato antikūnus, pagamintus prieš šią infekciją. Pasitaiko, kad antikūnų gamyba prasideda praėjus 10-15 dienų po užsikrėtimo, tačiau didžiąja dauguma atvejų vėliau – po 1-1,5 mėnesio.

Informacija apie tokią analizę apdorojama nuo dviejų iki dešimties dienų.

Diangozės dėl ŽIV patikimumą patvirtina IB analizė. Išskirtinai teigiamas viruso IB testas gali būti įtikinama priežastis patvirtinti infekciją.

Analizės esmė:

Laboratorijoje imamas veninio kraujo mėginys. Mėginys papildomai paruošiamas, jame esantys baltyminiai junginiai įelektrinami tyrimo kameroje, o po to pagal jų molekulinę masę paskirstomi gelio medžiagoje. Į paruoštą mėginį kelis kartus dedama popieriaus juostelė, padengta reagentu. Jei mėginyje yra viruso antikūnų, įvyksta cheminė reakcija ir ant bandymo juostelės matomos linijos. Kai pasirodo 2 arba 3 brūkšniai p24, gp41 ir gp120 arba gp160, tyrimo rezultatas yra teigiamas.

Jei iš IB analizės gaunamas teigiamas rezultatas su vieno procento paklaida, galima daryti išvadą apie ŽIV infekcijos buvimą organizme.

Greitieji ŽIV ir AIDS testai

Naujausios imunodeficito viruso nustatymo organizme technologijos yra ekspresiniai metodai. Informaciją apie tokią analizę galima gauti per kelias minutes po atlikimo. Didžiausias patikimumas nustatomas atliekant imunochromagrafinius tyrimus – specialias tyrimo juosteles, ant kurių paviršiaus užpurškiamas reagento sluoksnis. Antikūnai, esantys tiriamojoje medžiagoje, liečiasi su reagentu ir keičia indikatoriaus spalvą. Po kelių minučių atsiranda dvi juostelės, rodančios infekcijos buvimą. Vienos linijos buvimas reiškia, kad nėra infekcijos.

Toks testas gali būti naudojamas kaip papildomas, informaciją apie tokį testą būtinai patvirtina kiti tyrimai.

Kiek kainuoja greitasis ŽIV testas?

Greitasis ŽIV testas kainuos vidutiniškai 200–1000 rublių.

PGR diagnostikos metodą iš pradžių prieš 35 metus sukūrė amerikiečių mokslininkas Kari Mullis. Tyrimo sumanytojas 1993 metais gavo tarptautinę Nobelio premiją už savo naujoves. Jis tapo nepakeičiamas bet kokiai laboratorinei veiklai.

PGR naudojama molekulinėje biologijoje, norint padaryti daug kopijų (pastiprinti) mažas DNR dalis. DNR polimerazė gali pridėti tik nukleotidą prie jau esančios 3-OH grupės. Taigi jam reikia pradmenų, prie kurių jis galėtų pridėti pirmąjį nukleotidą. Šis reikalavimas leidžia nustatyti konkrečią šablono sekos dalį, kurią reikia diagnozuoti. PGR reakcijos pabaigoje tam tikra seka susikaups į milijardus kopijų (amplikonų).

PGR apima šildymo ir aušinimo procesą, vadinamą terminiu ciklu, kurį atlieka specializuota įranga. Polimerazės grandininė reakcija (PGR) yra gana paprastas metodas. Jis pagerina DNR šabloną, kad susidarytų specifiniai DNR fragmentai in vitro (in vitro analizė). Tradiciniai metodai, skirti klonuoti DNR seką į vektorių ir replikuoti ją gyvoje ląstelėje, dažnai reikalauja kelių dienų iki kelių savaičių tyrimų. Tačiau DNR sekos amplifikacijos rezultatus galite gauti naudodami PGR po poros valandų.

Daugumai biocheminių tyrimų, naudojamų diagnozuojant infekcines ligas, reikalingas gana didelis kiekis biologinės medžiagos. PGR atveju ši sąlyga nėra privaloma. Taigi PGR gali suteikti jautresnį patogeno aptikimą. Ir didesnis tam tikrų sekų amplifikacijos lygis per trumpesnį laiką su gana ribotu biomedžiagos kiekiu. Dėl šių savybių ši technologija itin naudinga. Ne tik fundamentiniams tyrimams, bet ir asmeniniams tikslams. Įskaitant genetinės tapatybės tyrimus, teismo ekspertizę, pramonės kokybės kontrolę.

Pagrindinė analizės vertė yra galimybė nustatyti lytiniu keliu plintančias patologijas dar nepasireiškus pirmiesiems požymiams. PGR analizė naudojama, kai būtina anksti diagnozuoti ŽIV infekciją. Taip pat ir viruso RNR nustatymas donoro kraujyje. Dėl didelio analizės jautrumo atsakymą galima gauti praėjus 7-14 dienų po įtariamos infekcijos. Diagnostikos patikimumas sieks nuo 85 iki 98%. Tačiau PGR testas skiriamas ne visiems. Nes tai gana brangus tyrimas. Svarbiausia, kad iš laboratorijos darbuotojų tam reikia brangios įrangos ir tam tikrų profesinių įgūdžių. Jei pacientas anksčiau nebuvo patyręs situacijos, susijusios su padidėjusia infekcijos rizika, polimerazės reakcija nerekomenduojama.

Kokybinė polimerazės reakcija ŽIV

Aukštos kokybės ŽIV PGR atlikimas leidžia nustatyti virusinės ligos buvimą organizme. Pacientas gali gauti rezultatą šiais ženklais: teigiamas, klaidingas teigiamas, neigiamas. Tačiau tyrimas neleidžia nustatyti retroviruso kopijų skaičiaus. Pacientams, kuriems anksčiau buvo diagnozuota infekcija, kokybinė analizė neatliekama. Antivirusinio gydymo veiksmingumui stebėti nėra skiriama.

Kiekybinis ŽIV PGR

Jis atliekamas siekiant nustatyti RNR viruso kopijas paciento biologinėje medžiagoje. Kiekybinis PGR skiriamas tik pacientams, kuriems anksčiau nustatyta infekcija, kaip vykstančio gydymo stebėjimas.

Realaus laiko PGR

Naudojamas laboratorinėje diagnostikoje DNR sekcijų kopijoms formuoti. Taip pat vienu metu atliekamiems kiekybiniams tyrimams ir DNR sekos nustatymui biomedžiagoje. Iš esmės diagnozė yra kiekybinė PGR.

Į pastabą!

Įvairiose laboratorijose galite rasti keletą diagnostinių formuluočių: "PGR kiekybinis nustatymas" ir "realaus laiko PGR".

Abi analizės yra identiškos.

Medžiagos ėmimas ŽIV diagnostikai

Biologinės medžiagos rinkimas ŽIV diagnostikai naudojant PGR atliekamas pagal tam tikrus standartus. Manipuliacija atliekama gydymo kambaryje. Naudojami vienkartiniai sterilūs instrumentai. Pakuotė su instrumentais atidaroma tiesiai šalia paciento. Surinkta medžiaga dedama į sterilius mėgintuvėlius, iš anksto apdorotus CrO3 (chromo mišiniu). Biologinė medžiaga – veninis kraujas, duodamas ryte ir nevalgius. Likus kelioms dienoms iki tyrimo reikia vengti gerti alkoholį, riebų ir aštrų maistą, nustoti vartoti vaistus.

Jei vaistų vartojimo nutraukti neįmanoma, apie tai reikia pranešti prieš atliekant tyrimą.

Be to, norint nustatyti gretutines lytiniu keliu plintančias ligas, gali būti paimtas šlaplės ir makšties tepinėlis. Tyrimas atliekamas anonimiškai, o rezultatus pacientas gauna asmeniškai. Rekomenduojama su savimi turėti asmens dokumentą.

Po kiek laiko galite atlikti PGR testą dėl ŽIV?

ŽIV viruso buvimą galima nustatyti po 4-6 dienų po užsikrėtimo. Tokiu atveju analizės informacijos turinys sieks 85%. Po 10-13 dienų analizė gali nustatyti ligą 98% tikslumu. Neigiamas rezultatas bus teisingas tik tuo atveju, jei jis bus priimtas ne anksčiau kaip po 2 savaičių nuo įtariamos infekcijos.

Klaidingai teigiamo rezultato priežastys

Gauti klaidingą teigiamą rezultatą yra gana sunku.

Tai įmanoma, jei nesilaikoma biologinės medžiagos rinkimo taisyklių, netinkamai paženklinti mėgintuvėliai, naudojama nekokybiška tyrimo sistema ir kiti panašūs veiksniai. Kitais atvejais tikimybė gauti panašų rezultatą yra ne didesnė kaip 2%.

Kiek laiko užtrunka gauti testo rezultatus?

Techniniu požiūriu PGR rezultatus galima gauti per 4 valandas. Tačiau praktikoje laboratorinę išvadą pacientas gauna nuo vienos iki kelių dienų. Apskritai laikas priklauso nuo laboratorijos darbo krūvio ir nuo to, kaip organizuotas jos darbas.

Polimerazės reakcijos atlikimas naujagimiui

PGR skiriama, kai vaikas gimsta iš ŽIV užsikrėtusios motinos. ELISA atlikimas šiuo atveju nėra informatyvus. Kadangi vaikas antikūnus prieš retrovirusą išlaiko maždaug iki 2 metų amžiaus. Dėl šios priežasties fermentinis imunologinis tyrimas neduos tikslaus atsakymo. Jei 4-6 savaičių vaikui bus atliktas PGR tyrimas ir gautas teigiamas rezultatas, kalbėsime apie infekciją.

Jei PGR, atlikta nuo 8 savaičių iki šešių mėnesių amžiaus, rodo neigiamus rezultatus (su sąlyga, kad vaikas nemaitino motinos pienu), infekcija atmetama.

Kodėl PGR yra geresnis už ELISA nustatant ŽIV?

Polimerazės reakcija leidžia aptikti viruso RNR ir jo buvimą organizme, įskaitant kiekybinius. ELISA užduotis yra nustatyti antikūnus prieš ŽIV infekciją. Nustatant galimą infekciją, su fermentu susijęs imunosorbentinis tyrimas nenusileidžia PGR, jo tikslumas siekia 99%. Tačiau, skirtingai nei PGR, jis negali aptikti ligos ankstyvose jos vystymosi stadijose.

ŽIV PGR privalumai

• Polimerazės reakcija tiesiogiai lemia infekcinio agento buvimą. Pavyzdžiui, ELISA gali išskirti tik mikroorganizmo antikūnus ir atliekas.
• Tyrimas aiškiai identifikuoja konkretų patogeną, net jei yra keli kryžmiškai reaguojantys.
• Ši technika leidžia ištirti bet kokios rūšies biologinę medžiagą, įskaitant džiovintus kraujo lašus.

Vienas iš PGR trūkumų yra padidėjęs analizės jautrumas. Tai kartais sukelia klaidingai teigiamą rezultatą. Taip atsitinka, jei mėgintuvėlyje arba ant instrumentų yra net nedidelis svetimos DNR kiekis.

ŽIV diagnostika naudojant PGR ir ELISA: interpretacija, rezultatų patikimumas

Fermentinis imunologinis tyrimas, kurio rezultatai rodo, kad organizme nėra antikūnų prieš ŽIV ir antigeną p24, yra neigiamas. Jei šios molekulės yra, išduodama teigiama diagnostinė išvada. Kai kuriais atvejais pacientas gali gauti klaidingai teigiamą arba klaidingai neigiamą rezultatą. Tai ankstyvo nėštumo, herpetinės infekcijos, neteisingo medžiagos mėginių ėmimo ir mėgintuvėlių transportavimo sutrikimo pasekmė. Be to, panašūs rezultatai randami pacientams, sergantiems nuolatinėmis autoimuninėmis ligomis ir įvairių tipų hepatitais. Galima atlikti Western blot (imuninį blotavimą), kuris apjungia ELISA ir viruso baltymų atskyrimą.

Tada teigiamas rezultatas bus esant virusinės infekcijos glikoproteinui gp160. Tai yra ŽIV apvalkalo glikoproteinų gp41 ir gp120 pirmtakas. Jei šių molekulių trūksta, laboratorinio tyrimo išvada laikoma neigiama. Western Blot atlikimas kartu su ELISA leidžia gauti rezultatus, kurių patikimumas viršija 98%. Tuo atveju, kai ELISA testas yra teigiamas, o Western Blot – neigiamas, tyrimas laikomas abejotinu ir reikalauja PGR.