ELISA бол ХДХВ-ийн халдварыг оношлох найдвартай арга юм. ELISA тестийг хэрхэн, хаана өгөх вэ. ELISA-ийн оношлогоо: мөн чанар нь юу вэ, эсрэгбиемийг тодорхойлох, үүнийг хэрхэн хийдэг, ямар өвчинд үр дүнтэй байдаг вэ? Ферментийн дархлаа судлалын хамгийн сонирхолтой нь ХДХВ-ийн ЭЛИЗА юм

ХДХВ бол бидний үеийнхний гамшиг юм. ХДХВ-ийн халдварыг оношлох ямар аргууд байдаг вэ, ХДХВ-ийн ELISA тестийн талаар дэлгэрэнгүй мэдээлэл. Хэрхэн авах вэ, шинжилгээний үр дүнг хэрхэн тайлбарлах вэ.

Хүний дархлал хомсдолын вирус нь бидний үеийнхний хувьд хамгийн аймшигтай халдварын нэг юм.

ХДХВ нь бидний дархлааны тогтолцоонд хортой нөлөө үзүүлдэг бөгөөд хэрэв өвчний явцыг цаг тухайд нь зогсоохгүй бол дархлалын олдмол хомсдолд шилжиж болно. ХДХВ нь бэлгийн хавьталд орохдоо бэлгийн хавьталд орохдоо эрэгтэй, эмэгтэй хүний ​​бэлгийн замаар дамждаг. Халдварын өөр нэг шалтгаан нь цусны урсгал руу орж буй вирус байж болно. Энэ нь ариутгагдаагүй багаж хэрэгсэл ашиглах, бохирдсон цусыг сэлбэх, тэр ч байтугай үе дамжин: халдвартай эхээс хөхүүлэх үед хүүхдэд тохиолддог.

Өнөөг хүртэл дэлхийн өнцөг булан бүрт эрдэмтэд ДОХ-ыг эмчлэх шинэ үеийн анагаах ухааныг бий болгохын тулд оюун ухаанаа дайчлан ажиллаж байгаа хэдий ч шинжлэх ухаан хурдацтай хөгжиж байгаа ч хүний ​​дархлал хомсдолын вирус дэлхий даяар тархсаар байна.

ELISA - ХДХВ-ийн халдварыг оношлох арга

20-р зууны үеийн эрдэмтэд ХДХВ-ийн халдварыг оношлох хэд хэдэн аргыг боловсруулсан бөгөөд тэдгээрийн хамгийн чухал нь ферментийн дархлааны шинжилгээ юм. ХДХВ-ийн ELISA-г харьцангуй саяхан буюу ерээд оны эхээр хийж эхэлсэн. Цаг хугацаа өнгөрөхөд арга нь боловсронгуй болж, шинэ нарийн ширийн зүйлийг олж авсан. Одоо ELISA аргын найдвартай байдал нь хамгийн өндөр үзүүлэлтүүдийн нэг юм - ойролцоогоор 98%. Үүний дагуу энэ аргыг улам бүр ашиглаж байна.

ELISA бол ХДХВ-ийн халдвар илрүүлэх шинжилгээнд өвчтөнд тулгардаг анхны шинжилгээ юм. ELISA арга нь цусан дахь эсрэгбие байгаа эсэхийг тодорхойлдог. Хэрэв шинжилгээгээр цусан дахь эсрэгбие илэрсэн бол вирус байгаа гэсэн үг. Гэсэн хэдий ч, энэ тестийн талаарх мэдээллийг иммуноблотинг (IB) болон хамгийн сүүлийн үеийн арга болох полимеразын гинжин урвал (ПГУ) гэх мэт бусад туршилтуудаар дэмжих ёстой.

Эсрэгбие нь бие махбодид нэвтэрч буй халдварын хариуд плазмын эсээс үүсдэг тусгай уургийн нэгдлүүд юм (эсрэгбие нь халдварын дараа 1-2 сарын дараа үүсч эхэлдэг).

ХДХВ-ийн халдварын шалтгаан

Хэрэв та ХДХВ-ийн халдвартай хүнтэй харьцаж байсан эсвэл халдвар авах эрсдэлтэй бол таны эмч танд шинжилгээ өгөх лавлагаа бичнэ. ХДХВ-ийн халдвар авах эрсдэлтэй үеийн хүмүүсийн дунд:

• нэг сарын турш тарилгын эмчилгээ хийлгэх;
• тусгай хамгаалалтын хэрэгсэлгүйгээр бэлгийн харьцаанд орох;
• бэлгийн хавьталд орох үед халдвар дамжих халдвар тээгч;
• наяад онд цусны бүлэгнэлтийн шалтгааныг олж мэдэхийн тулд цус сэлбэх эсвэл тариа хийлгэсний дараа өвчтөнүүд.

Хэрэв та ХДХВ-ийн халдвартай эсэхээ эргэлзэж, халдвар авах боломжтой эсэх талаар санаа зовж байгаа бол манай улсын аль ч эмнэлгийн байгууллагад яаралтай хандаж, ХДХВ-ийн иж бүрэн шинжилгээ хийлгэхийг зөвлөж байна. Шинжилгээний хариу нэг сарын дотор ирдэг. ХДХВ-ийн халдвар авах эрсдэлтэй хүмүүсийг 4 сар тутамд шинжилгээнд хамруулахыг зөвлөж байна.

Хэрхэн шинжилгээ өгөх вэ

ХДХВ-ийн цусны шинжилгээ өгөхийн тулд тусгай бэлтгэл хийх шаардлагагүй боловч хамгийн энгийн дүрмийг баримтлах нь дээр.

• Орой идэхгүй байх нь дээр, харин өглөө нь өлөн элгэн дээрээ шинжилгээ өгөх;
• Бие махбодийн ажилд хэт их ачаалал өгөхийг зөвлөдөггүй;
• эрүүл хоол хүнс идэх, тамхи, согтууруулах ундаа хэрэглэхийг хэсэг хугацаанд орхих;
• Хуурамч шинжилгээний үр дүнг үгүйсгэхийн тулд та ноцтой өвчнийг эмчилсний дараа шинжилгээнд хамрагдах ёсгүй.

Хүний дархлал хомсдолын вирусын халдвар нь ноцтой онош юм. Оношлогооны алдаа нь гамшигт үр дагаварт хүргэж болзошгүй юм. ХДХВ-ийн халдвар илрүүлэх ELISA шинжилгээ нь судалгааны хамгийн хүртээмжтэй арга боловч бүх тохиолдолд мэдээлэл өгөх боломжгүй юм.

ELISA - ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ. ELISA аргын зорилго нь биологийн материалд дархлал хомсдолын вирусын эсрэгбие илрүүлэх явдал юм. Энэ аргыг ашигласнаар та шингэнд вирус өөрөө биш, харин зөвхөн тэдгээрийн оршихуйн хариуд үүссэн эсрэгбие байгаа эсэхийг хянах боломжтой. Бэлгийн замаар дамжих өвчний оношлогоонд ферментийн дархлааны шинжилгээг өргөн ашигладаг. Энэ нь бэлгийн замын халдварт өвчнийг тодорхойлоход тусалдаг.

ELISA хэд хэдэн төрөл байдаг: шууд хувилбар, шууд бус хувилбар, сэндвич арга. Ямар ч тохиолдолд энэ техник нь эсрэгбие байгаа эсэхийг тодорхойлоход суурилдаг бөгөөд энэ нь гадны бодис нэвтэрч буйг илтгэдэг. Эдгээр "шошго" -ыг тодорхойлохын тулд биологийн бүрэлдэхүүн хэсгийг ферментээр эмчилдэг.

Ферментийн дархлааны шинжилгээ нь эсрэгбиемийг 96-98% -ийн нарийвчлалтайгаар тодорхойлдог бөгөөд алдаа нь ач холбогдолгүй юм. Энэ нь 2-4% байна.

ELISA - ХДХВ-ийн халдварыг оношлох арга

ХДХВ-ийн халдвар илрүүлэх ELISA шинжилгээ нь оношлогооны эхний шат юм. Дархлал хомсдолын вирусын эсрэгтөрөгч нь уураг p24, p15, p17, p31 ба гликопротейн gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160 юм.

Вирусын уураг илрүүлэхийн тулд венийн цуснаас дээж авдаг. ELISA-ийн цусны шинжилгээнд илгээсэн дээжийг ферментийн дархлаа судлалын урвалжаар эмчилдэг. Ийлдэс нь цуснаас тусгаарлагдсан байдаг. Хэрэв судалгааны явцад тэдгээр нь илэрсэн бол энэ нь вирус цусанд аль хэдийн орсон гэсэн үг юм.

Цусыг зөвхөн өлөн элгэн дээрээ өгдөг. Шинжилгээ хийхээс 2 хоногийн өмнө өөх тос, согтууруулах ундаа хэрэглэхийг зөвлөдөггүй. Та 14 хоногийн турш вирусын эсрэг эм хэрэглэхээ болих хэрэгтэй.

Аргын давуу талууд:

• харьцангуй бага зардал;
• урвалжуудын өндөр тогтвортой байдал;
• өндөр мэдрэмж;
• богино хугацаа;
• хүний ​​хүчин зүйлийн хамгийн бага нөлөө.

Орчин үеийн ELISA тестийн системийг олон улсын стандартын дагуу үйлдвэрлэдэг. Энэ нь аргын нарийвчлалыг нэмэгдүүлдэг.

Ферментийн дархлааны шинжилгээ нь үргэлж найдвартай үр дүнг өгдөггүй. Вирус цусанд орсны дараа хөгжлийн далд (далд) үе шат эхэлдэг. Вирус үржиж, эсрэгбие хараахан бүрдээгүй байхаас өмнөх үеийг "серонегатив цонхны хугацаа" гэж нэрлэдэг. Энэ үе шатанд ELISA хийх нь утгагүй юм. Хэрэв халдвар авсан бол үр дүн нь үүснэ. Вирус хэр хурдан илрэх нь биед хичнээн аюултай эс нэвтэрснээс хамаарна. Хамгаалалтгүй бэлгийн харьцаанд орох эсвэл бохирдсон цус сэлбэх тохиолдолд энэ хугацаа хамгийн бага байх болно.

ХДХВ-ийн ELISA-ийн өндөр найдвартай байдлыг хангахын тулд шинжилгээг гурван удаа хийдэг. Хүний дархлал хомсдолын вирусын ELISA шинжилгээ өгөх эцсийн хугацаа:

• Болзошгүй холбоо барьснаас хойш 6 долоо хоногийн дараа
• 3 сарын дотор,
• зургаан сарын дараа.

ХДХВ-ийн 4-р үеийн ELISA нь халдварын эхний үе шатанд хамгийн мэдээлэл сайтай арга юм. Сэжигтэй халдвараас хойш 1 сарын дараа үүнийг хийж болно. Туршилт нь 3-р үеийн аналогитай харьцуулахад үнэтэй байдаг. Тиймээс улсын эмнэлгийн байгууллагад үүнийг нэмэлт оношлогооны арга болгон ашигладаг. Туршилт 3-ыг үнэ төлбөргүй хийдэг бөгөөд үр дүнд нь тодорхой хариулт өгөх боломжгүй бол өвчтөнийг 4-р үеийн ELISA-д шилжүүлнэ.

Чухал! Халдвар авсны дараа тэр даруй хүн халдвартай болдог. Тэр оношоо хараахан мэдээгүй байсан ч бусдад аюултай!

Хэрэв ELISA шинжилгээгээр ХДХВ-ийн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие илэрсэн бол нэмэлт судалгаа хийх шаардлагатай. Үүнд . Энэ аргын найдвартай байдал 80% байна. ПГУ-ын шинжилгээгээр цус, үрийн шингэн, үтрээний ялгадас зэргийг шалгадаг. Биологийн шингэнийг эмнэлгийн реакторт задалж, дараа нь ферментээр эмчилдэг. Үүний үр дүнд шингэн орчинд ХДХВ-ийн эсийн концентрацийн талаархи мэдээллийг олж авдаг. Их хэмжээний алдааны улмаас (20%), хэрэв эерэг үр дүн гарвал дархлаажуулалтыг нэмэлтээр хийдэг.

Оношлогооны дараагийн үе шат нь Combo тест (эсвэл иммуноблотинг) юм. Энэ бол 6 сарын дараа ELISA-ийн үр дүн тодорхой бус байвал хийгдэх өндөр мэдрэмжтэй тест (98% итгэлтэй).

ELISA үр дүнг тайлж байна

Шифр тайлах хугацаа 24-48 цагийн хооронд хэлбэлздэг. Мэдээллийг яаралтай авах шаардлагатай бол (мэс засал хийх шаардлагатай) код тайлах ажлыг 2 цагийн дотор хийдэг. Аймгуудын эрүүл мэндийн төвүүдэд шаардлагатай урвалж тэр бүр байдаггүй. Дээжийг өргөдөл гаргасан газраас аваад дараа нь бүсийн төв рүү шилжүүлнэ. Ийм нөхцөлд үр дүн нь 1-2 долоо хоногийн дотор тодорхой болно.

Ферментийн дархлаа судлалын үр дүн эерэг эсвэл сөрөг байж болно; өөр сонголт байхгүй.

Анхны болон давтан ELISA-ийн үр дүн эерэг байсан ч өвчтөнийг ХДХВ-ийн халдвартай гэж хүлээн зөвшөөрөх боломжгүй. Алдаатай. Хуурамч эерэг үр дүнгийн шалтгаанууд:

• архаг өвчин;
• урт хугацааны халдварт өвчин;
• жирэмслэлт.

Тиймээс шинжилгээний үр дүнг нэмэлт судалгаагаар тодруулах шаардлагатай.

Хэрэв иммуноблотинг нь ХДХВ эерэг (реактив) байвал тухайн хүн ХДХВ-ийн халдвартай гэж тооцогддог бөгөөд энэ нь эрүүл гэсэн үг юм.

Цаг хугацаа өнгөрөхөд вирусын эсүүд заасан эмэнд дасан зохицдог. Хянахын тулд ELISA тестийг үе үе давтан хийдэг.

Заримдаа immunoblotting нь хуурамч сөрөг үр дүнг харуулдаг. Дархлал хомсдолын вирус 6 сар (ба түүнээс дээш) байх нь маш ховор тохиолддог. Цусан дахь вирусын эсүүд бага хэмжээгээр нэвтэрсэн тохиолдолд энэ нь боломжтой юм. Нийт тохиолдлын 0.5% -д халдварыг зөвхөн нэг жилийн дараа оношлох боломжтой. Халдвар авснаас хойш 6 сарын дотор 99.5% -д ELISA найдвартай үр дүнг өгнө.

Өндөр нарийвчлалтай судалгаа хийсэн ч алдаа гарах магадлал 2% хэвээр байна. Хүний хүчин зүйлийг мартаж болохгүй. Алдаа гарах магадлалыг арилгахын тулд туршилтыг 2 өөр байгууллагад хийж болно.

С.Н. ИГОЛКИНА, В.Ф. ПУЗЫРЕВ, Л.Г. ЗИНИНА, Н.М. ДЕНИСОВА, А.Н. БУРКОВ,

А.П. RITE, T.I. УЛАНОВА
"Оношлогооны систем" Судалгаа, үйлдвэрлэлийн нэгдэл ХХК,

Нижний Новгород
Цочмог болон архаг В гепатитын тусгай оношилгоо, үр дүнг урьдчилан таамаглах “DS-ELISA-HBeAg”, “DS-ELISA-anti-HBe” ELISA IMMUNO ТЕСТ СИСТЕМ.
Гепатит В нь хүнд хэлбэрийн вируст халдварт өвчин юм

элэгний үрэвсэлт гэмтэл. Нас баралтын 1 орчим хувь нь энд тохиолддог

өвчний цочмог үе, тохиолдлын 4-10% -д архаг хэлбэрт шилждэг

элэгний болон анхдагч элэгний дараагийн цирроз үүсэх боломжтой үйл явц

элэгний хорт хавдар.

Цочмог гепатит В-ийн өвчлөл буурах хандлагатай байгаа хэдий ч архаг вируст гепатитаар анх удаа оношлогдсон тархвар судлалын аюултай бүлэг, түүнчлэн өвчний үүсгэгч бодисыг тээгч бүлэг бүрдсээр байна. . Нөхөн үржихүйн насны хүн ам, өсвөр насныхны дунд гепатит В-ийн өвчлөл өндөр байгаа тул таагүй таамаглал хэвээр байна.

Иймээс элэгний В вирүсийн эмчилгээ, урьдчилан сэргийлэх, оношлох асуудал өнөө үед онцгой ач холбогдолтой болж байна.Одоогийн байдлаар энэ халдварын маркеруудыг илрүүлэхийн тулд ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээний аргууд өргөн хэрэглэгддэг. HBV-ийн хамгийн чухал ийлдэс судлалын маркерууд нь e-antigen (HBeAg) болон e-antigen (anti-HBe)-ийн эсрэгбие юм. HBeAg нь цусны өндөр бохирдолтой холбоотой бөгөөд энэ нь гепатит В вирус (HBV) идэвхтэй репликацийг харуулж байна. HBeAg-ийн өндөр титр нь ДНХ-ийн полимеразын өндөр идэвхжилтэй тохирч, Данийн бүрэн хэсгүүдийг илрүүлэхтэй байнга хослуулдаг нь тогтоогдсон. HBeAg агуулсан ийлдэс нь эрүүл хүний ​​цусанд ороход халдвар авах эрсдэл нь сероконверси үүссэнээс хэд дахин өндөр байдаг.

Цочмог гепатит В-ийн үед HBeAg нь халдварт үйл явцын эхний үе шатанд, өвчний анхны эмнэлзүйн шинж тэмдгүүдийн үед цусанд илэрч, HBsAg-ийн илрэлээс долоо хоногоор хоцорч байна. Цикл хэлбэрийн цочмог гепатит В (AHB) нь HBeAg-ийн богино хугацааны эргэлтээр тодорхойлогддог. Удалгүй, цочмог үений 2-3 долоо хоногт анти-HBe гарч ирдэг бөгөөд энэ нь өвчний таатай үр дүнг урьдчилан таамаглах боломжийг олгодог.

Anti-HBe нь цусанд 2-5 жил, цөөн хэдэн сараар эргэлддэг.

HBeAg-antiHBe сероконверси үүсэх нь идэвхжил огцом буурч байгааг харуулж байна

халдварт үйл явц. Өвчний 2 сарын дараа өвчтөний цусан дахь HBeAg-ийг илрүүлэх нь эмгэг процессын архаг явцыг илтгэнэ. Энэ тохиолдолд HBcAg-ийн эсрэгбие илэрсэнээс хойш олон жилийн дараа анти-HBe үүсэх эсвэл огт илрэхгүй байж болно.

Анти-HBe-ийн илрэл нь таамаглалд таагүй утгатай байж болно

Хүнд хэлбэрийн HBV-ийн цочмог үе бөгөөд энэ нь өмнөх үндсэн бүсэд мутацитай тохирч байна

HBV "e-" омог үүсэх.

Энэхүү ажлын зорилго нь өндөр мэдрэмжтэй, өвөрмөц байдлыг хөгжүүлэх явдал байв

HBeAg ба анти-HBe илрүүлэх, тэдгээрийн үндсэн шинж чанарыг үнэлэх ферментийн дархлааны шинжилгээний систем.

Материал ба арга.

1. “DS-ELISA-HBeAg” ферментийн дархлааны сорилтын систем. Туршилтын хүчинтэй эхлэл

Эдгээр нь Нижний Новгородын NPO Diagnostic Systems компаниас үйлдвэрлэсэн рекомбинант HBeAg-ийн поликлональ эсрэгбие, хатуу фазад шингэсэн ямааны эсрэгбие ба Нижний Новгородын NPO Diagnostic Systems компанийн үйлдвэрлэсэн тунхууны пероксидазаар тэмдэглэгдсэн рекомбинант HBeAg-ийн поликлональ ямааны эсрэгбие юм. Шинжилгээний схем нь нэг үе шаттай “сэндвич” юм.Нийт урвалын хугацаа 1.5 цаг. Сийвэнгийн дээжийг шингэлээгүй шинжилнэ.

2. “DS-ELISA-anti-HBe” ферментийн дархлааны сорилтын систем. Туршилтын үндэс нь

NPO Diagnostic Systems үйлдвэрлэсэн рекомбинант HBeAg (AHBV 102),

Нижний Новгород, Москвагийн Сорбент Сервис компанийн үйлдвэрлэсэн тунхууны пероксидаз бүхий хатуу фаз ба IgG эсрэг коньюгат. Урвал нь хоёр үе шаттайгаар явагддаг. Туршилтын ийлдсийг хөдөлгөөнгүй антиген дээр 1/10 шингэрүүлсэн хэлбэрээр нэмж, инкубаци хийж, холбогдоогүй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг зайлуулсны дараа тунхууны пероксидазаар тэмдэглэгдсэн хүний ​​IgG-ийн эсрэг хулганы моноклональ эсрэгбиемүүдийг ашиглан өвөрмөц дархлааны цогцолборыг илрүүлдэг.

3. Боловсруулсан тестийн системийг үнэлэхийн тулд ийлдсийн 2178 дээж ашигласан

цус. Үүнээс 480 нь эрүүл донороос авсан ийлдэс байсан. 1680 дээжийг төлөөлдөг

нь элэгний В вирусын янз бүрийн маркер агуулсан цусны ийлдэс юм.

Цочмог вируст гепатит В-ийн эмнэлзүйн оноштой өвчтөнүүдээс цаг хугацааны явцад 18 дээж авсан. Өмнө нь бүх дээжийг Нижний Новгородын "ELISA-HBsAg/m", "DS-ELISA-HBeAg", "NPO Diagnostic Systems" компанийн үйлдвэрлэсэн тестийн системийг ашиглан HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc-ийн шинжилгээнд хамруулсан. DS-ELISA-anti-HBe", "ELISA-anti-HBc".

4. Боловсруулсан тестийн системүүдийн харьцуулсан үнэлгээг ашиглан хийсэн

Францын BIO-RAD үйлдвэрлэсэн арилжааны эм "Monolisa HBe";

Үр дүн, хэлэлцүүлэг. "Оношлогооны систем" ТББ нь "DS-ELISA-HBeAg" ба "DS-ELISA-anti-HBe" гэсэн 2 шинэ оношилгооны иж бүрдэл боловсруулсан. “DS-ELISA-HBeAg” тестийн систем нь хүний ​​ийлдэс (плазм) дахь элэгний В вирүсийн цахим эсрэгтөрөгчийг фермент холбоот дархлалын шинжилгээ ашиглан илрүүлэх зорилготой бөгөөд халдварт өвчний идэвхжилийг тодорхойлох тусгай оношлогоонд ашиглах боломжтой. үйл явц, гепатит В-ийн хүндрэл, үр дагаврыг урьдчилан таамаглах.

“DS-ELISA-anti-HBe” шинжилгээний систем нь хүний ​​цусны ийлдэс (плазм) дахь гепатитын В вирүсийн цахим эсрэгтөрөгчийн эсрэг IgG эсрэгбие илрүүлэх зорилготой бөгөөд

халдварт үйл явцын явцыг урьдчилан таамаглах, гепатит В-ийн эмчилгээг хянахад ашигладаг.

Шинэ туршилтуудын онцлогийг судлахын тулд тархалтыг үнэлэв

агуулсан ба агуулаагүй цусны ийлдсийн дээжийн оптик нягтрал (OD).

HBeAg эсвэл анти-HBe. Эрүүл доноруудын цусны ийлдэс, гепатитын В вирусын янз бүрийн маркерыг сонгон авсан цусны ийлдсийн дээжийг ашигласан.

цус сэлбэх станцууд. Судалгааны үр дүнгээс харахад хоёр популяци ихээхэн тусгаарлагдсан байна. HBeAg агуулаагүй ийлдсийн дээжийн OD утга нь 0.011-0.111, HBeAg агуулсан ийлдсийн дээжийн гол оргил нь 2.186-аас 3.186 хооронд хэлбэлздэг (Зураг 1a).

Зураг 1a. “DS-ELISA-HBeAg” шинжилгээний систем дэх HBeAg агуулсан болон агуулаагүй ийлдсийн дээжийн OD-ийн тархалт
Бага OD (0.3-0.6) бүхий ийлдэсийн бүлэгт тохирох оргил нь халдварт үйл явцын эхний үе шатанд цуглуулсан ийлдсийн дээжээс бүрдэх магадлалтай.

Инкубацийн үед аль хэдийн HBsAg болон HBeAg нь өвчтнүүдийн цусанд бүртгэгдсэн байдаг нь тэдний эпидемиологийн аюулыг баталж байна.

Анти-HBe агуулаагүй ийлдсийн дээжийн оптик нягтын хүрээ

нь 0.002-0.122 хооронд байсан ба анти-HBe агуулсан ийлдсийн дээжийн гол оргил OD нь 2.431-3.231 хооронд байв (Зураг 1б).

Цагаан будаа. 1б. “DS-ELISA-anti-HBeAg” шинжилгээний систем дэх анти-HBe агуулсан болон агуулаагүй ийлдсийн дээжийн OD-ийн тархалт
HBe-ийн эсрэг эерэг дээжийн OD-ийн тархалтын онцлогийг судалсан

агуулсан серумууд ( n=78) ба HBsAg агуулаагүй ( n=56).


Цагаан будаа. 2а. “DS-ELISA-anti-HBe” шинжилгээний систем дэх HBsAg агуулсан HBe эерэг ийлдэс.

Зураг 2b. “DS-ELISA-anti-HBe” шинжилгээний системд HBsAg агуулаагүй HBe-эерэг ийлдсийн дээжийн OD-ийн тархалтын онцлог.
HBsAg агуулаагүй HBe-эерэг сийвэнгийн дээжүүдийн 87%-ийн оптик нягтрал 0.41-0.81 хооронд хэлбэлзэж байна (Зураг 2b). Түүнчлэн HBsAg агуулсан анти-HBe-эерэг ийлдэс дээжийн зөвхөн 14% нь энэ хязгаарт OD-тэй байсан (Зураг 2a). Хожуу эдгэрэлтийн үе шатанд HBsAg-д сөрөг урвал үзүүлэх үед HBeAg-ийн эсрэгбиеийн титр аажмаар буурч байгааг мэддэг (Зураг 2b). Иймээс HBe-эерэг дээжийн зонхилох концентраци нь OD 0.8-аас бага хэмжээтэй тохирч байх магадлалтай.

Хүлээн авсан өгөгдөл нь эерэг ба салгах найдвартай байдлыг харуулж байна

өвчний үе шатаас үл хамааран цусны ийлдсэнд сөрөг сорьц. “DS-ELISA-HBeAg” болон “DS-ELISA-antiHBe” тестийн системүүдийн мэдрэмж, өвөрмөц байдлыг “Monolisa HBe” тест (BIORAD, Франц)-тай харьцуулан судалсан (Хүснэгт 1).

Хүснэгт 1
Мэдрэмж ба өвөрмөц байдлын харьцуулсан шинж чанарууд

DS-ELISA-HBeAg ба DS-ELISA-antiHB туршилтын системүүд

Индекс	HBeAg тодорхойлох		AntiHBe тодорхойлох
	NPO "DS", DS-IFA-HBeAg	"БИО-РАД" "Monolisa HВe"	NPO "DS" DS-ELISA-antiHBe	"БИО-РАД"
Тоо хэмжээ судалсан дээж	67	67	32	32
Илчилсэн эерэг дээж	47	47	16	16
Илчилсэн сөрөг дээж	20	20	16	16

Хүснэгт 1-д үзүүлсэн өгөгдөл нь үр дүнгийн хооронд 100% тохирч байгааг харуулж байна.

HBeAg ба анти-HBe-ийн хосолсон үзүүлэлт, ялангуяа тэдгээрийн тоон үнэлгээ нь прогнозын нэмэлт ач холбогдолтой болохыг мэддэг. HBe-ийн эсрэг титрийн хурдацтай өсөлт нь хошин дархлааны идэвхтэй хариу урвалыг тодорхойлдог бөгөөд архагших аюулыг бараг арилгадаг. Бид "цочмог вируст гепатит В" гэсэн клиник оноштой өвчтөнүүдийн цусны ийлдэс дэх HBeAg/anti-HBe агууламжийн өөрчлөлтөд дүн шинжилгээ хийсэн (Хүснэгт 2).

хүснэгт 2
HBV-тэй өвчтөнд HBeAg/anti-HBe сероконверцийн динамик

Сэдэв өвчтэй	Цус цуглуулах өдөр*	HBeAg	эсрэг HBe O.F./O.C.		HBc-ийн эсрэг	Эсрэг HBc IgM
	1	1,4+	2,1+	+	+	+
	12	0,5-	1,0+	+	+	+
	21	0,3-	1,3+	+	+	+
	1	1,2+	1,2+	+	+	+
	5	0,4-	1,0+	+	+	+
	13	0,2-	2,5+	+	+	+
	1	1,2+	0,6-	+	+	+
	21	0,2-	4,6+	+	+	+
	30	0,2-	9,7+	+	+	+
	1	2,1+	0,5-	+	+	+
	8	0,6-	1,1+	+	+	+
	28	0,3-	2,8+	+	+	+
	1	0,7-	2,2+	+	+	+
	8	0,3-	2,2+	+	+	+
	15	0,3-	2,8+	+	+	+
	38	0,2-	3,0+	+	+	+
6	1	1,1+	4,4+	+	+	+
	14	0,5-	3,8+	+	+	+

* эмнэлэгт хэвтсэнээс хойш
Сийвэнгийн бүх дээжийг ийлдэс судлалын маркер байгаа эсэхийг шалгасан

OGV: HBsAg, эсрэг HBc, эсрэг HBc IgM. Ажиглалтын хугацаа 13-38 хоног байна. 1, 2, 6-р өвчтөнд HBeAg титрийн бууралтын дэвсгэр дээр анти-HBe илэрсэн. 3 ба 4-р өвчтөнд HBeAg цусны ийлдэсээс 21, 8 дахь өдөр алга болсны дараа HBe-ийн эсрэг илэрнэ. Эмнэлэгт хэвтсэн №5 өвчтөний цусны ийлдэс дэх HBeAg-ийн шинжилгээнд сөрөг үр дүн гарсан. Үүний зэрэгцээ, HBe-ийн эсрэг хөрвүүлэлт шалгалтын эхний өдөр аль хэдийн бүртгэгдсэн байна.

Бүх субъектуудад HBeAg-ийн эсрэгбиеийн титр нэмэгдэх хандлагатай байна

цусны ийлдэс, энэ нь эмнэлзүйн таатай динамикийг урьдчилан таамаглах боломжийг олгодог

амьсгалын замын цочмог хам шинжийн илрэл, хурдан эдгэрэх.

Туршилтын шинэ системийг судлах нь оношлогооны өндөр найдвартай байдлыг харуулсан. DS-ELISA-HBeAg болон DS-ELISA-antiHBe-ийн харьцуулалтын үр дүн нь Monolisa HBe тесттэй 100% тохирч байгааг харуулсан.

Гепатит В-тэй өвчтөнүүдийн ийлдсийн дээжийг динамик, шинжилгээнд судлахдаа

өндөр мэдрэмж, өвөрмөц чанарыг баталсан.

Туршилтын дээж ба коньюгатыг богино хугацаанд өсгөвөрлөх хугацаа (1 цаг) нь эмчилгээний арга хэмжээг хамгийн богино хугацаанд хийх зөв тактикийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Үүсгэсэн тестийн системүүд нь хэрэглэхэд хялбар, хэмнэлттэй байдаг (HBeAg-ийг тодорхойлоход 50 мкл ийлдэс, HBe-ийн эсрэг тодорхойлоход 10 мкл ийлдэс шаардлагатай). Шинжилгээний өндөр чанарын шинж чанар нь халдварт үйл явцын явцыг урьдчилан таамаглах, гепатит В-ийн эмчилгээг хянахад амжилттай ашиглах боломжийг олгодог.
Уран зохиол

1.Майер К.П.Гепатит ба гепатитын үр дагавар / K.P. Майер. – М., GEOTAR, Анагаах ухаан, 1999.- С.720

2.Онищенко Г.Г.Вируст гепатитын тархалт үндэсний аюулгүй байдалд заналхийлж байна / Г.Г. Онищенко, Л.А. Дементьева // Микробиологийн сэтгүүл. –2003.-No4.- Х.93-99.

3.Соринсон С.Н.Вируст гепатит / С.Н.Соринсон. - Санкт-Петербург, Теза, 1997.- 306 П.

4. Баумейстер М.Гепатит В вирус e антигенийн өвөрмөц эпитопууд ба арилжааны эсрэг HВe дархлаа судлалын хязгаарлалт / M. Баумейстер // Анагаах ухааны вирус судлалын сэтгүүл.- 2000.-N 60.- R. 256-263.

5.Кейн М.Гепатит В-ийн халдварыг хянах дэлхийн хөтөлбөр / М.Кэйн // Вакцин. – 1995.-N131(Нэмэлт 1).- R.47-6. Шуничи БямбаО. Фулминант гепатиттай өвчтөнүүдэд гепатит В вирусийн омог нь мутацитай / Шуничи Сато, Казюки Сузуки // Дотоод анагаах ухааны тэмдэглэл. – 1995.- N122.- Р.241-248.

7. Оу Ж.-Н. Гепатит В вирусын эсрэгтөрөгчийн молекул биологи./ J.-N.Ou // Гастроэнтерологи ба элэг судлалын сэтгүүл. – 1997.- No 12 (Suppl.1) – R. 178-187.

8.Тиоллайс П.Гепатит В вирус. / P. Tiollais, C. Pourcel, A. Dejean // Байгаль. – 1985. – С.317, 489-495
Хэвлэгдсэн: Ж.“Клиникийн лабораторийн оношлогоо” - 2005.-No6-P.-34-37

ELISA (ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ, ELISA) нь өнгөрсөн зууны 60-аад оны үед практик анагаах ухааны амьдралд нэвтэрсэн. Түүний анхны даалгавар бол амьд организмын эсийн эсрэгтөрөгчийн бүтцийг хайж олох, тодорхойлоход чиглэсэн шинжлэх ухааны зорилгоор гистологийн судалгаа байв.

ELISA арга нь тусгай (AT) ба холбогдох эсрэгтөрөгч (AG) нь ферментийн тусламжтайгаар илрүүлдэг "эсрэгтөрөгч-эсрэгбие" цогцолбор үүсэх харилцан үйлчлэлд суурилдаг. Энэ баримт нь эрдэмтэд энэ аргыг тодорхой халдварын эсрэг дархлааны хариу урвалд оролцдог янз бүрийн ангиллын тодорхой иммуноглобулиныг тодорхойлохын тулд оношлогооны зорилгоор ашиглаж болно гэж бодоход хүргэсэн. Мөн энэ нь эмнэлзүйн лабораторийн оношилгооны нээлт болсон юм!

Энэ аргыг зөвхөн 80-аад оны эхээр идэвхтэй ашиглаж эхэлсэн бөгөөд дараа нь ихэвчлэн төрөлжсөн байгууллагуудад хэрэглэгдэж эхэлсэн. Африк тивд төрсөн аймшигт ДОХ нь бидний тэнгэрийн хаяанд гарч, "хуучин" халдвартай нэн даруй нэгдэж, яаралтай оношлох арга хэмжээ, эрэл хайгуул хийх шаардлагатай болсон тул анхны иммунофермент анализаторууд цус сэлбэх төв, станцууд, халдварт өвчин, венерологийн эмнэлгүүдээр тоноглогдсон байв. түүнд нөлөөлдөг эмчилгээний эмийн хувьд.

ELISA аргын хэрэглээний хамрах хүрээ

Ферментийн дархлаа судлалын боломжууд үнэхээр өргөн цар хүрээтэй юм. Анагаах ухааны бүх салбарт хэрэглэгддэг ийм судалгаагүйгээр яаж хийхийг төсөөлөхөд бэрх юм. ELISA онкологийн хувьд юу хийж чадах вэ? Энэ нь боломжтой болж байна. Бас маш их. Шинжилгээний явцад зарим төрлийн хорт хавдрын шинж тэмдгийг илрүүлэх чадвар нь жижиг хэмжээтэй тул өөр ямар ч аргаар тодорхойлогдоогүй байгаа хавдрыг эрт илрүүлэх үндэс болдог.

Орчин үеийн эмнэлзүйн лабораторийн оношлогоо (CDL) нь хавдрын маркеруудаас гадна ELISA хавтангийн ихээхэн арсеналтай бөгөөд тэдгээрийг янз бүрийн эмгэг судлалын эмгэгийг (халдварт үйл явц, дааврын эмгэг) оношлох, өвчтөний биед үзүүлэх нөлөөг тодорхойлохын тулд эмийн эмийг хянахад ашигладаг. мөн дашрамд хэлэхэд зөвхөн хүн ч биш. Одоогийн байдлаар иммуноферментийн шинжилгээг мал эмнэлгийн үйлчилгээнд өргөн ашиглаж байна, учир нь "манай дүү нар" олон өвчинд өртөмтгий байдаг тул заримдаа тэд маш их өвддөг.

Тиймээс ELISA нь мэдрэмтгий, өвөрмөц байдлаасаа шалтгаалан судсаар авсан цусны дээжээс дараахь зүйлийг тодорхойлж болно.

• Гормоны байдал (бамбай булчирхай, бөөрний дээд булчирхайн даавар, бэлгийн даавар);
• Вирус ба бактерийн халдвар (ХДХВ, В, С, хламиди, тэмбүү, мөн эмгэг төрүүлэгч бичил биетнээс үүдэлтэй бусад олон өвчин) байгаа эсэх;
• Халдварт үйл явцыг эхлүүлсэн бичил биетний амин чухал үйл ажиллагааны ул мөр нь амжилттай дуусч, энэ эмгэг төрүүлэгчид дархлааны хариу урвал үүсгэх үе шатанд шилжсэн. Ийм ул мөр, өөрөөр хэлбэл эсрэгбие нь ихэнх тохиолдолд цусанд насан туршдаа эргэлдэж, улмаар хүнийг дахин халдвар авахаас хамгаалдаг.

ELISA-ийн мөн чанар юу вэ?

Ферментийн дархлаа судлалын арга нь зөвхөн эмгэг төрүүлэгч өөрөө байгаа эсэхийг (чанарын шинжилгээ) төдийгүй өвчтөний цусны ийлдэс дэх тоон хэмжээг тодорхойлох боломжийг олгодог.

Вирус ба бактерийн тун нь халдварт үйл явц, түүний үр дагаварт ихээхэн нөлөөлдөг тул тоон шинжилгээ нь янз бүрийн хэлбэр, үе шатанд өвчний оношлогоо, эмчилгээнд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг.

Гэсэн хэдий ч иммуноферментийн судалгааг ELISA арга гэж мэддэг учраас бид энэ арга нь манай гараг дээр амьдардаг, ихэнх нь хүн, амьтны эрүүл мэнд, амь насанд шууд заналхийлж буй ийм өргөн хүрээний бичил биетнийг хэрхэн хамрах талаар бодох ч үгүй. Гэвч үнэн хэрэгтээ ELISA нь олон сонголттой (өрсөлдөх чадваргүй, өрсөлдөх чадвартай - шууд ба шууд бус), тус бүр нь өөрийн асуудлыг шийдэж, зорилтот хайлт хийх боломжийг олгодог.

Нэг буюу өөр ангиллын иммуноглобулиныг тодорхойлохын тулд уламжлалт 96 худагтай полистирол хавтанг (хавтан) ашигладаг бөгөөд тэдгээрийн нүхэнд шингэсэн рекомбинант уургууд нь хатуу фазад төвлөрдөг. Цусны ийлдэстэй хамт худаг руу орж буй эсрэгбие эсвэл эсрэгтөрөгч нь "танил" объектыг олж, түүнтэй цогцолбор үүсгэдэг (AG - AT) нь ферментийн коньюгатаар бэхлэгдсэн үед худгийн өнгө өөрчлөгдөхөд илэрдэг. үр дүнг унших.

Ферментийн дархлааны шинжилгээг тусгай лабораторид үйлдвэрлэсэн, шаардлагатай бүх урвалын бүрэлдэхүүн хэсгүүдээр тоноглогдсон тодорхой өвөрмөц шинж чанартай туршилтын системийг ашиглан хийдэг. Судалгааг угаалгын машин ("угаагч"), унших спектрофотометр ашиглан хийж болно, үүнд ихэвчлэн гар ажиллагаа орно. Лабораторийн туслахыг нэгэн хэвийн дусаах, угаах болон бусад ердийн ажлаас чөлөөлдөг бүрэн автомат машинууд дээр ажиллах нь мэдээжийн хэрэг илүү хурдан бөгөөд илүү тохиромжтой боловч бүх лабораториуд ийм тансаг байдлыг хангаж чадахгүй бөгөөд хуучин хэв маягаараа үргэлжлүүлэн ажилладаг. хагас автомат машинууд.

ELISA-ийн үр дүнг тайлбарлах нь лабораторийн оношлогооны эмчийн бүрэн эрхэд хамаарах бөгөөд хуурамч эерэг эсвэл худал-сөрөг хариулт өгөх бараг бүх иммунохимийн урвалын өвөрмөц шинж чанарыг харгалзан үзэх шаардлагатай.

Видео: орчин үеийн ферментийн дархлааны шинжилгээ

Тэмбүүгийн жишээг ашиглан ELISA-ийн үр дүн

Ферментийн дархлааны шинжилгээ нь бүх хэлбэрийг тодорхойлоход тохиромжтой бөгөөд үүнээс гадна скрининг судалгаанд ашиглагддаг. Шинжилгээ хийхийн тулд өвчтөний хоосон ходоодонд авсан венийн цусыг ашигладаг. Уг ажил нь тодорхой өвөрмөц шинж чанартай (AB ангиллын A, M, G) эсвэл нийт эсрэгбие бүхий шахмалыг ашигладаг.

Тэмбүүгийн эсрэгбие нь тодорхой дарааллаар үүсдэг тул ELISA нь халдвар хэзээ үүссэн, ямар үе шатанд байгаа гэсэн асуултанд амархан хариулж, олж авсан үр дүнгийн тайлбарыг дараах хэлбэрээр танилцуулж болно.

• IgM нь халдварт үйл явцын үргэлжлэх хугацааг харуулдаг (архаг үрэвсэлт өвчний хурцадмал үед илэрч болно);
• IgA нь сар гаруйн өмнө халдвар авсан гэж заасан;
• IgG нь халдвар эрчимтэй явагдаж байгаа эсвэл саяхан эмчилгээ хийлгэсэн болохыг харуулж байгаа бөгөөд энэ нь анамнез авах замаар амархан тодорхойлогддог.

Тэмбүүгийн шинжилгээ хийх үед сөрөг худаг (мөн сөрөг хяналт) өнгөгүй хэвээр байх бөгөөд эерэг худаг (болон эерэг хяналтын) нь шинжилгээний явцад нэмсэн хромогенийн өнгөний өөрчлөлтөөс болж тод шар өнгөтэй болно. Гэсэн хэдий ч өнгөний эрч хүч нь хяналттай үргэлж давхцдаггүй, өөрөөр хэлбэл бага зэрэг цайвар эсвэл бага зэрэг шаргал өнгөтэй байж болно. Эдгээр нь эргэлзээтэй үр дүн бөгөөд дүрмээр бол спектрофотометр дээр олж авсан тоон үзүүлэлтүүдийг заавал харгалзан дахин шалгаж үзэх шаардлагатай боловч ерөнхийдөө өнгө нь дархлааны цогцолборын тоотой шууд пропорциональ байдаг (холбогдох Ags ба ATs) .

Ферментийн дархлаа судлалын хамгийн сонирхолтой нь ХДХВ-ийн ЭЛИЗА юм

Нийгмийн олон асуудал (биеэ үнэлэх, хар тамхинд донтох гэх мэт) арилсан гэж баттай хэлэх боломжгүй байгаа тул дүн шинжилгээ хийх нь хүн амын өргөн хүрээний хувьд бусдаас илүү сонирхолтой байж магадгүй юм. Харамсалтай нь ХДХВ нь хүний ​​нийгмийн эдгээр давхаргад нөлөөлдөг төдийгүй бэлгийн садар самуун, хар тамхины хэрэглээтэй холбоогүй янз бүрийн нөхцөлд халдвар авч болно. Гэхдээ хэрэв ХДХВ-ийн шинжилгээ хийлгэх шаардлагатай бол таны эргэн тойронд байгаа бүх хүмүүс ийм лабораторид очсон тухай мэдэх болно гэж айх хэрэггүй. Одоо ХДХВ-ийн халдвартай хүмүүс хуулиар хамгаалагдсан бөгөөд эргэлзэж байгаа хүмүүс олон нийтэд ил тод, буруушаалтаас айхгүйгээр асуудлыг шийдэж чадах нэрээ нууцалсан албанд хандаж болно.

ХДХВ-ийн халдварыг оношлоход ашигладаг ферментийн дархлаа судлалын арга нь хамгийн чухал стандарт судалгааны нэг боловч сэдэв нь маш нарийн байдаг тул тусгай нөхцөл шаарддаг.

ХДХВ-ийн ELISA-г бэлгийн хавьталд орох, цус сэлбэх, халдварыг илтгэдэг бусад эмнэлгийн процедурын дараа, мөн инкубацийн хугацаа дууссаны дараа ("серонегатив цонх") хийх нь утга учиртай боловч энэ хугацаа үргэлжилдэг гэдгийг анхаарах хэрэгтэй. тогтмол биш. Энэ нь 14-30 хоногийн дотор дуусах эсвэл зургаан сар хүртэл үргэлжлэх боломжтой тул дундаж утгыг 45-аас 90 хоногийн завсарлага гэж үздэг. ХДХВ-ийн эсрэг цусыг бусад халдварын нэгэн адил өлөн элгэн дээрээ судсаар өгдөг. Лабораторид материалын хуримтлал, ажлын ачаалал (2-оос 10 хоног) зэргээс шалтгаалан үр дүн бэлэн болно, гэхдээ ихэнх тохиолдолд лабораториуд тухайн өдөр эсвэл дараагийн өдөр нь хариулт өгдөг.

ХДХВ-ийн халдварын үр дүнгээс юу хүлээж болох вэ?

ХДХВ-ийн халдварыг илрүүлэх ELISA нь хоёр төрлийн вирусын эсрэгбиемүүдийг илрүүлдэг: ХДХВ-1 (ОХУ болон Европ, Азийн бусад орнуудад илүү түгээмэл) ба ХДХВ-2 (Баруун Африкт илүү түгээмэл).

ХДХВ-ийн ELISA-ийн үүрэг бол бүх тестийн систем дээр илэрсэн G ангиллын эсрэгбие, дараа нь шинэ үеийн рекомбинант тестийн иж бүрдэл дээр илэрсэн А ба М ангиллын эсрэгбиемүүдийг хайж олох явдал юм. хамгийн эхний үе шатанд (инкубацийн хугацаа - "серонегатив цонх"). Та ELISA-аас дараах хариултуудыг хүлээж болно.

Анхдагч эерэг үр дүн: цусыг ижил төрлийн, гэхдээ боломжтой бол өөр цуврал, өөр хүн (лабораторийн туслах) ашиглан дахин шинжилгээ хийх шаардлагатай;

Давтан (+) нь анхан шатны шинжилгээтэй төстэй шинжилгээгээр өвчтөнөөс шинэ цус авахыг хэлнэ;

Өөр нэг эерэг үр дүн нь лавлагааны шинжилгээнд хамрагдах бөгөөд үүнд маш тодорхой туршилтын иж бүрдэл (2-3 ширхэг) ашигладаг;

Хоёр (эсвэл гурван) системд эерэг үр дүнг дархлаажуулалтад илгээдэг (ижил ELISA, гэхдээ өндөр өвөрмөц шинж чанартай тестийн иж бүрдлийг тус тусад нь хийдэг).

ХДХВ-ийн халдварын талаархи дүгнэлтийг зөвхөн дархлаажуулалтын үндсэн дээр хийдэг. Халдвар авсан хүнтэй бүрэн нууцлалтайгаар харилцан яриа хийдэг. ОХУ-д төдийгүй бусад улс орнуудад эмнэлгийн нууцыг задруулсан тохиолдолд эрүүгийн хариуцлага хүлээлгэдэг.

Хламиди ба цитомегаловирусын эсрэг ферментийн дархлааны аргыг ашиглан шинжилгээ хийх нь халдварын цаг хугацаа, өвчний үе шат, эмчилгээний үр нөлөөг тодорхойлох боломжийг олгодог тул онцгой алдартай болсон.

Хэрэгжүүлэх явцад халдварт бодисоос үүдэлтэй эмгэгийн янз бүрийн үе шатанд янз бүрийн ангиллын эсрэгбие гарч ирэхийг ажиглаж болно.

• IgM нь халдвар авснаас хойш 7 хоногийн дараа илрэх боломжтой;
• IgA нь халдвар нь нэг сараас дээш хугацаанд бие махбодид амьдардаг болохыг харуулж байна;
• IgG нь хламидийн оношийг баталж, эмчилгээг хянах, түүний үр нөлөөг тодорхойлоход тусалдаг. G ангиллын эсрэгбие нь өвчний үргэлжлэх хугацаанаас үл хамааран биед үлдэж, эргэлддэг тул шинжилгээг зөв тайлбарлахын тулд та жишиг утгыг (норм) анхаарч үзэх хэрэгтэй. , CDL тус бүрийн хувьд өөр өөр байдаг: туршилтын системийн брэнд болон багцад орсон урвалжуудын өвөрмөц байдлыг харгалзан үзнэ. Хэвийн утгыг ELISA үр дүнгийн хажууд байгаа маягт дээр оруулна.

Энэ нь арай өөр юм: М ангиллын эсрэгбие нь сар хагасын дараа гарч ирдэг, өөрөөр хэлбэл үр дүн (IgM+) нь анхдагч халдварын үе шатанд эсвэл далд халдварын дахин идэвхжих үед эерэг болж, 4 сараас хойш хэвээр байна. зургаан сар.

G ангиллын эсрэгбие байгаа нь анхдагч цочмог халдвар эсвэл дахин халдвар авах шинж тэмдэг юм. Шинжилгээнд вирус байгаа гэж заасан боловч халдварын явц ямар шатанд байгаа талаар мэдээлэл өгөхгүй байна. Үүний зэрэгцээ, IgG-ийн хэвийн титрийг тодорхойлох нь бас хүндрэл үүсгэдэг, учир нь энэ нь тухайн хүний ​​​​дархлалын төлөв байдлаас бүрэн хамаардаг боловч G ангиллын иммуноглобулиныг тодорхойлох замаар тогтоогддог.. CMV-ийг оношлоход эсрэгбиеийн ийм зан чанарыг харгалзан үзэх шаардлагатай байдаг. G ангиллын эсрэгбиеийн CMV-тэй харилцан үйлчлэх чадварыг үнэлэх, хожим нь түүнийг "саармагжуулах" (AT avidity). Өвчний эхний үе шатанд IgG нь вирусын эсрэгтөрөгчтэй маш муу холбогддог (бага avidity) бөгөөд зөвхөн дараа нь идэвхжиж эхэлдэг тул эсрэгбиеийн авидит нэмэгдэх тухай ярьж болно.

Энэ арга нь зөвхөн венийн цусыг ашиглан оношилгооны олон асуудлыг шийдэж чадсан тул бид ферментийн дархлаа судлалын давуу талуудын талаар маш их ярьж болно. Судалгааны материал цуглуулахад удаан хүлээх, санаа зоволт, асуудал гарах шаардлагагүй. Нэмж дурдахад ELISA тестийн системийг сайжруулсаар байгаа бөгөөд туршилт 100% найдвартай үр дүнг өгөх өдөр холгүй байна.

Видео: Москвагийн Улсын Анагаах Ухааны Их Сургуулийн боловсролын кино. Сеченов ELISA-ийн үндэс

Хүсэлтийн дагуу үнэ

Та тоо хэмжээг зааж өгснөөр сагсандаа бараа нэмж болно

Үйлдвэрлэгч: Оношлогооны систем

Орос улс

Нэгж Хэмжээ: тогтоосон

Сав баглаа боодлын төрөл: картон хайрцаг

Нийтлэл: L-1823

Тодорхойлолт

Хүний цусны ийлдэс (плазм) болон тархи нугасны шингэн дэх G, M, A ангиллын эсрэгбие илрүүлэх ферментийн дархлааны шинжилгээний систем, тэмбүү өвчнийг оношлох 96х2 хэмжээтэй урвалжийн иж бүрдэл. гарын авлагын аргууд ба автомат туршилтын анализатор. Энэ арга нь "хавх" зарчим дээр суурилдаг бөгөөд энэ нь дээжинд агуулагдах бүх ангиллын өвөрмөц антитрепонемаль эсрэгбие нь хавтангийн нүхэнд бэхлэгдсэн T. pallidum-ийн дархлаа давамгайлсан уургийн аналогууд болох рекомбинант эсрэгтөрөгчтэй нэгэн зэрэг холбогддог явдал юм. хүний ​​цусны ийлдэс (плазм) эсвэл тархи нугасны шингэн ба коньюгатаас дээжийг хамтад нь өсгөвөрлөх үед тунхууны пероксидазын шошготой ижил эсрэгтөрөгч. Хавтангийн нүхэнд нэмэхэд TMB агуулсан субстрат-хромоген хольцын өнгө өөрчлөгдөх нь туршилтын дээжинд Treponema pallidum-ийн өвөрмөц эсрэгбие байгааг харуулж байна.

Функциональ зорилго

Pallidum Treponema-ийн эсрэгбие илрүүлэх нь тэмбүүгийн оношлогоонд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг, учир нь T. pallidum-ийг эсийн өсгөвөрөөс ялгаж авах боломжгүй, эмгэг төрүүлэгчийг шууд тодорхойлох дээжийг өвчний далд болон хожуу үе шатанд авах боломжгүй байдаг. Тэмбүүгийн серодиагнозын хувьд трепонемал бус (RMP, RPR, VDRL) ба трепонемал (RPGA, RIF, ELISA) шинжилгээг ашигладаг. Нийт эсрэгбиемийг тодорхойлох ферментийн дархлааны шинжилгээг ийлдэс судлалын цогц шинжилгээний нэг хэсэг болгон донорын цусыг их хэмжээгээр илрүүлэх, тэмбүүг оношлоход ашигладаг. Амжилттай эмчилгээ хийсний дараа ихэнх тохиолдолд трепонемаль шинжилгээний хариу урвал хэвээр байна

Үзүүлэлтүүд

Агуулгыг тохируулах:
1. Полистирол 96 худагтай эвхэгддэг хавтан - 2 ширхэг.,
2. Коньюгат нь тунгалаг шар шингэн,
3. Эерэг хяналт - ил тод улаан шингэн,
4. Сөрөг хяналт - ил тод ногоон шингэн,
5. Угаах уусмал, баяжмал, рН 6.9-7.6,
6. TMB нь тунгалаг өнгөгүй шингэн,
7. Субстратын уусмал - тунгалаг өнгөгүй шингэн, рН ~4.2.
8. Урвалжийг зогсоох (0.2М),
9. Хэрэглэх заавар, чанарын гэрчилгээ.
Хадгалах нөхцөл: +2...8°C температурт, хөлдөхийг зөвшөөрөхгүй.
Хадгалах хугацаа нь багцын шошгон дээр заасан үйлдвэрлэсэн өдрөөс хойш 15 сар байна.
TU 9398-182-05941003-2010 стандартын шаардлагад нийцсэн байдал.
Росздравнадзорт бүртгүүлсэн.