محیط جداسازی گونوکوک ها خشک است. نایسریا - Hem Ltd. کشت برای سوزاک برای تعیین اثربخشی درمان

روش های آزمایشگاهی به طور گسترده در تشخیص بیماری های مقاربتی دستگاه تناسلی استفاده می شود: سوزاک، سیفلیس، تریکومونیازیس، و غیره وجود بیماری نیاز به اقداماتی برای شناسایی علت عفونت دارد.

محیط غذایی SVG برای جداسازی و کشت گنوکوک ها هنگام مطالعه مواد از یک بیمار در نظر گرفته شده است. هر کیت برای تهیه 110 میلی لیتر محیط گونوکوک آماده برای استفاده طراحی شده است.

محتویات را تنظیم کنید

کیت برای به دست آوردن محیط غذایی باید در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد به مدت حداکثر 12 ماه نگهداری شود. مواد مغذی جامد را می توان در لوله های آزمایش یا ظروف پتری به مدت حداکثر 7 روز نگهداری کرد. کیت آماده سازی محیط غذایی شامل:

• پایه: آگار، عصاره مخمر، پپتون، نشاسته، نمک؛
• افزودنی انتخابی: کوآنزیم ها، لیزات گلبول های قرمز، ضد قارچ ها، آنتی بیوتیک ها، قندها.
• دستورالعمل استفاده از کیت

روش شناسی

این تکنیک شامل چندین مرحله است که هر یک باید مطابق با الزامات خاصی انجام شود. پس از اتمام تمام مراحل تشخیص بیماری با استفاده از روش کشت عامل بیماری زا بر روی محیط گنوکوکی، نتایج پس از 24 ساعت، 48 ساعت و 72 ساعت ثبت می شود. در سوزاک حاد، رشد گنوکوک در روز اول مشاهده می شود، در سوزاک مزمن - تا 72 ساعت.

تهیه محلول پایه متوسط ​​برای تشخیص فرهنگی با ریختن پایه در ظرف حاوی آب مقطر (100 میلی لیتر) برای تورم بعدی انجام می شود. سوسپانسیون به دست آمده را در یک حمام آب قرار داده و به طور دوره ای هم بزنید تا پایه کاملاً حل شود، سپس محلول به مدت 2 دقیقه بجوشد. محلولی از افزودنی انتخابی با حل کردن آن در آب مقطر (10 میلی لیتر) با هم زدن تهیه می شود.

یک محیط غذایی آماده با افزودن محلولی از یک افزودنی انتخابی به محلول پایه تشکیل می شود. محیط به دست آمده در ظروف پتری استریل ریخته می شود. قبل از انجام مطالعه، محیط گنوکوکی باید به مدت یک ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد نگهداری شود. سپس مواد مطابق با دستور وزارت بهداشت "در مورد یکسان سازی روش های تحقیقاتی میکروبیولوژیکی (باکتریولوژیکی) مورد استفاده در آزمایشگاه های تشخیص بالینی موسسات پزشکی تلقیح می شود.

اثربخشی روش تحقیق باکتریولوژیک در

تا حد زیادی توسط کیفیت مواد مغذی تعیین می شود. که در

در کشور ما دو نوع بیشترین آزمایش و استفاده را دارند

محیط های غذایی: محیط های غذایی آسیت آگار و بدون آسیت.

اساس هر دو محیط پنتون آگار گوشت (MPA) از گوشت است

خرگوش یا قلب گاو تازه. روش تهیه آن

به شرح زیر است. گوشت خرگوش از چربی و

تاندون ها، از چرخ گوشت رد شده یا با چاقو خرد شده،

وزن شده، با حجم دو برابر آب لوله کشی پر شده و در چنین مواردی

فرم را به مدت یک روز در یخچال با دمای 4 درجه سانتیگراد برای استخراج می گذاریم.

سپس جرم را به جوش می آورند، به مدت 10 دقیقه می جوشانند، خنک می شوند و

از طریق پارچه پنیر فیلتر کنید. به فیلتر 2% آگار-آگار، 1% اضافه کنید.

پپتون و 0.5% کلرید سدیم را حرارت دهید تا آگار-آگار حل شود

و pH=7.5-7.6 را تنظیم کنید (قلیایی شدن 20% است

محلول هیدروکسید سدیم). محیط را به جوش بیاورید، فیلتر کنید

از طریق یک فیلتر گاز پنبه ای، در بطری های استریل ریخته می شود یا

فلاسک ها را در اتوکلاو به مدت 15-20 دقیقه در دمای 0.5 اتمسفر استریل کنید

گیج فشار (112°).

روش تهیه MPA از قلب تازه گاو همان است

فقط جوشاندن توده قلب خرد شده در آب باید

به جای 10 دقیقه 20 دقیقه تولید کنید.

امکان تهیه پایه محیط غذایی بدون پپتون وجود دارد.

در این صورت برای تهیه MPA از روش فوق استفاده می کنند اما

پپتون از ترکیب آن حذف می شود، گوشت خرگوش خرد شده آب پز می شود

به جای 10 دقیقه 5 دقیقه و محیط را به مدت 10 دقیقه در اتوکلاو استریل کنید

دقیقه در 0.8 اتمسفر بر روی گیج فشار (117°).

آسیت آگار

مایع آسیتی باید از بیماران مبتلا به

آسیت ناشی از نارسایی قلبی، و

از طریق یک تروکار در یک بطری استریل تولید می شود و 5٪ اضافه می شود.

کلروفرم برای بیهوشی به مدت 10 روز، مایع با آن مخلوط می شود

کلروفرم با چرخاندن بطری و سپس رها کردن آن در بطری

دمای اتاق تا زمانی که کلروفرم کاملاً در ته بطری قرار گیرد

و پاکسازی مایع پس از این، در صورت لزوم، شفاف

مایع آسیت در فلاسک های استریل 50 میلی لیتری ریخته می شود

شمع های پنبه ای و روزانه به مدت 3 روز در آن قرار می گیرند

حمام آب در دمای 56 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت برای تبخیر کلروفرم

از طریق یک پلاگین پنبه ای پس از بررسی مایع آسیتی برای

عقیمی می تواند برای غنی سازی استفاده شود

محیط غذایی برای جداسازی گنوکوک در غلظت 1/3 و 1/4

حجم محیط که به صورت تجربی تعیین می شود.

دستور العمل برای محیط های کشت بدون آسیت

1. MPA از گوشت خرگوش یا قلب تازه گاو

(pH=7.4-7.5) - 100 میلی لیتر، کازئین هیدرولیز برای تزریقی

تغذیه پروتئین - 2 میلی لیتر، اتولیز مخمر - 2 میلی لیتر، آب پنیر

خون گاو - 20 میلی لیتر (متوسط ​​KDS-1).

2. MPA از گوشت خرگوش یا قلب تازه گاو

(pH=7.4-7.5) - 100 میلی لیتر، محلول همو هیدرولیزات 5٪ - 2 میلی لیتر،

اتولیز مخمر - 2 میلی لیتر، سرم خون گاو

گاو - 20 میلی لیتر (متوسط ​​GDS-2).

3. MPA از گوشت خرگوش یا قلب تازه گاو

(pH=7.4-7.5) - 100 میلی لیتر، متوسط ​​199 برای کشت بافت بدون

آنتی بیوتیک ها - 20 میلی لیتر، اتولیز مخمر - 2 میلی لیتر، سرم خون

گاو - 20 میلی لیتر (متوسط ​​199-SDS).

4. MPA از گوشت خرگوش یا قلب تازه گاو

(pH=7.4-7.5) - 100 میلی لیتر، زرده تخم مرغ تازه - 10 میلی لیتر،

سرم خون گاو - 20 میلی لیتر (متوسط ​​JS).

زرده تخم مرغ به صورت استریل از تخم مرغ رژیمی به دست می آید

بلافاصله قبل از آماده سازی محیط. برای این،

پس از درمان با الکل، پوسته با یک استریل باز می شود

موچین و محتویات تخم مرغ را در یک قیف استریل بریزید. بعد از

پس از بیرون آمدن سفیده، زرده باقی مانده در قیف به آن منتقل می شود

ظروف استریل و یک پیپت اندازه گیری لازم است

تولید ماده مغذی با حجم متوسط ​​زرده.

تهیه اتولیز مخمر به شرح زیر است.

مخمر نانوایی خرد شده و در بطری بزرگتر از

حجم مخمر گرفته شده 4 - 5 بار است و برای اتولیز برای دو بار باقی می ماند

روز در کابینت خشک کن یا ترموستات در دمای 60 درجه سانتیگراد. سپس ضخیم

توده قهوه ای با حجم سه برابر آب لوله کشی گرم رقیق می شود

آب، خوب مخلوط کنید و دو بار به مدت 10 دقیقه در سانتریفیوژ کنید

1000 دور در دقیقه (تا زمانی که مایع پاک شود). رویی

مایع تخلیه می شود، 0.5٪ کلرید سدیم به آن اضافه می شود، تنظیم می شود

pH به 7.4-7.5 و به مدت 30 دقیقه در 1 اتمسفر اتوکلاو کنید

گیج فشار (120 درجه). در بسته بندی های کوچک در یخچال نگهداری شود

اتولیز مخمر را می توان با محلول 1.5 درصد جایگزین کرد

عصاره مخمر خوراک (EKD) به همان مقدار (2 میلی لیتر) 1.5٪

محلول EKD در آزمایشگاه از EKD خشک با حل کردن آن در آزمایشگاه تهیه می شود

آب مقطر استریل به این ترتیب پخته شده است

عصاره مایع در لوله های استریل ریخته می شود و در آن استریل می شود

اتوکلاو در 0.5 اتمسفر روی فشار سنج به مدت 20 دقیقه.

در تمام محیط های غذایی فوق، سرم خون

گاو را می توان با بومی معمولی جایگزین کرد

سرم برای محیط های کشت باکتریولوژیک که

همان سرم است، اما با افزودن ماده نگهدارنده.

تهیه محیط غنی شده

MPA که در یک بطری یا فلاسک قرار دارد، در آب ذوب می شود

حمام کنید، تا دمای 56-58 درجه سرد کنید و مواد را به آن اضافه کنید

نسبت هایی که قبلا در دستور العمل ها مشخص شده است. غنی شده با MPA 3-3.5

میلی لیتر در لوله های استریل ریخته می شود، محیط چو می شود و مرطوب می شود

0.5 میلی لیتر آبگوشت پپتون گوشت استریل یا ایزوتونیک

محلول کلرید سدیم پس از سفت شدن. برای بررسی

برای اطمینان از عقیمی، محیط در یک ترموستات با دمای 35-37 درجه سانتیگراد در روز قرار می گیرد.

تمام محیط های بدون آسیت فوق، به جز محیط های تخم مرغ، شفاف هستند.

به راحتی می توان کلنی های میکروارگانیسم ها را روی آنها متمایز کرد. چهار شنبه،

غنی شده با تخم مرغ، کدر است، زرد است، روییده شده است

کلنی های آن، به ویژه گونوکوک ها، به خوبی قابل تشخیص نیستند. با این حال، رشد

گونوکوکوس در این محیط به وفور یافت می شود و کلنی های آن به راحتی می تواند وجود داشته باشد

با درمان رشد با محلول 1٪ کشف شد

دی متیل پارافنیلن دی آمین یا دیگر معرف اکسیداز،

کدام رنگ مستعمرات گونوکوک قرمز، خوب است

متضاد در برابر پس زمینه زرد محیط. استفاده از زرده

محیط های بدون درمان رشد میکروارگانیسم ها با یک معرف اکسیداز نیست

کیفیت هر سری جدید از محیط های غذایی آزمایشگاهی

تولید باید با کاشت روی آن بررسی شود

مواد پاتولوژیک از بیماران با باکتریوسکوپی

گنوکوک یافت شد.

ماندگاری MPA در یخچال در دمای 4 درجه سانتیگراد نباید بیشتر از 1 باشد

ماه، محیط غنی شده - 7 روز.

با توجه به اینکه برای محیط فوق مدت زمان کوتاهی امکان پذیر است

ذخیره سازی، یک روش تولید توسعه یافته است

محیط مغذی لیوفیلیزه بدون آسیت، که در زیر است

با عنوان "محیط غذایی برای جداسازی گونوکوک، خشک"

موجود در دو بطری: قسمت I (پایه متوسط) و قسمت II

(عوامل غنی سازی). برای آماده سازی محیط کار در قسمت اول

باید 100 میلی لیتر آب مقطر استریل اضافه کنید و حرارت دهید

در یک حمام آب در دمای 100 درجه تا زمانی که محتویات بطری کاملاً حل شود

(در عرض 30 دقیقه). زمان اضافی برای نگهداری محیط در آب

نیازی به حمام نیست، زیرا این باعث کاهش کیفیت آن می شود. قسمت دوم شامل

24 میلی لیتر آب مقطر استریل (انحلال غنی شده

مواد بلافاصله رخ می دهد). سپس در صورت احراز شرایط

استریلیت، قسمت II به قسمت I منتقل می شود، تا دمای 56 درجه سانتیگراد سرد می شود.

مخلوط شده، درون لوله های استریل ریخته شده، چویده و

همانطور که قبلا توضیح داده شد مرطوب کنید.

محیط خشک از گوشت خرگوش یا قلب گاو تهیه می شود.

علاوه بر مواد غنی‌کننده در دستور 1 (محیط KDS-1)

حاوی اسید اوروتیک با غلظت 1 میکروگرم در میلی لیتر است. چهار شنبه

با کیفیت بالا، مناسب برای استفاده در باکتری شناسی

آزمایشگاه ها، زیرا برای تبدیل یک محیط خشک به محیط کاری لازم است

فقط آب مقطر استریل

استفاده از یک محیط مغذی بدون آسیت با افزودن

آنتی بیوتیک و اسید اوروتیک نتایج خوبی با

تشخیص های باکتریولوژیک، از جمله خارج ژنتیکی

سوزاک: سوزاک لوزه ها و حلق، رکتوم. آنتی بیوتیک ها

برای سرکوب رشد گنوکوک همراه اضافه شده است

فلور باکتریایی که باعث افزایش شدت رشد گونوکوک می شود.

تشخیص مستعمرات منفرد و جداسازی خالص را تسهیل می کند

فرهنگ. 20.0 U/ml پلی میکسین M سولفات و 6.2 U/ml اضافه کنید

سولفات ریستومایسین؛ به جای دومی می توانید استفاده کنید

لینکومایسین هیدروکلراید - 2 میکروگرم در میلی لیتر. اسید اوروتیک به داخل تزریق می شود

ترکیب ماده مغذی به مقدار 1 میکروگرم در میلی لیتر.

برای این کار نمونه ای از اسید اوروتیک 1 میلی گرم (1000 میکروگرم) و

رقیق شده در 1.0 میلی لیتر آب مقطر استریل (دریافت کنید

محلول کاری حاوی 1000 میکروگرم که می تواند در آن ذخیره شود

در یخچال به مدت 10 روز) و استریل در حمام آب 15

دقیقه، سپس 0.1 میلی لیتر از محلول حاصل را گرفته و به آن اضافه کنید

100 میلی لیتر محیط مغذی غنی شده. محیط با آنتی بیوتیک

باید همزمان با محیط عاری از آنتی بیوتیک استفاده شود

(یک لوله آزمایش با یک محیط حاوی آنتی بیوتیک، دیگری بدون آنها)، زیرا

اگرچه نادر است، اما گونه هایی از گونوکوک وجود دارد که به آن حساس هستند

آنتی بیوتیک های فوق

محیط ذخیره سازی (حمل و نقل).

ترکیب محیط نگهداری: 1) 1 لیتر آب مقطر،

بدون کلر، 30 گرم آگار آگار؛ 2) 900 میلی لیتر مقطر

آب بدون کلر، 2 میلی لیتر اسید تیوگلیکولیک، 12 میلی لیتر 1M

محلول هیدروکسید سدیم، 100 میلی لیتر محلول آبی 20 درصد سدیم

فسفات تک جایگزین، 20 میلی لیتر محلول کلرید 1٪

کلسیم آخرین مخلوط (2) به تازه آماده شده اضافه می شود

آگار (1)، pH را روی 7.3-7.4 تنظیم کنید، 10 میلی لیتر از محیط را در

لوله های آزمایش استریل، استریل شده با بخار جاری به مدت 1 ساعت.

سواب های پنبه ای روی چوب ها یا میله های چوبی

فولاد ضد زنگ با قطر حدود 2 میلی متر، نصب شده در پنبه

چوب پنبه ها را به مدت 20 دقیقه در بافر فسفات، pH = 7.4 بجوشانید و

به مدت 24 ساعت در یک سوسپانسیون آبی 1 درصد به صورت نازک آغشته کنید

زغال چوب خرد شده پس از خشک شدن، سواب پنبه ای

تصحیح شده، وارد لوله های باکتریولوژیک می شود

قطر مناسب (برابر قطر لوله های آزمایش با محیط) و

در اتوکلاو به مدت 20 دقیقه در 1 اتمسفر (درجه حرارت) استریل کنید

برای تهیه بافر فسفات دو محلول تهیه کنید: 1

محلول - 28.4 گرم سدیم حل شده در 1 لیتر آب مقطر

فسفات دیجایگزین شده (0.2M)؛ 2 محلول - در 1 لیتر

27.8 گرم اسید سیتریک (0.1 M) را در آب مقطر حل کنید.

181.7 میلی لیتر از محلول 1 و 18.3 میلی لیتر از محلول 2 را مخلوط کنید.

تولید محصولات زراعی با استفاده از محیط های نگهداری

به شرح زیر انجام می شود. پزشک در حال معاینه یک بیمار

تامپون را از لوله آزمایش خارج می کند، آن را در محل بیماری قرار می دهد

چند ثانیه برای خیساندن (می توانید چند

حرکات در جهت عقربه های ساعت و خلاف جهت عقربه های ساعت)، بدون دست زدن آن را برمی دارد

اجسام اطراف را در یک لوله آزمایش با محیط نگهداری قرار می دهد. بر روی

با استفاده از یک پلاگین پنبه ای، لوله آزمایش با یک نوک لاستیکی بسته می شود. قبل از ارسال

مواد به آزمایشگاه باکتری شناسی، کشت ها در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری می شوند

در یخچال برای حداقل مدت، اما نه بیشتر از یک روز. همزمان

مواد پاتولوژیک بگیرید و اسمیر درست کنید

معاینه باکتریوسکوپی، که به

آزمایشگاه همراه با کشت در آزمایشگاه باکتری شناسی

بلافاصله پس از دریافت سواب با مواد پاتولوژیک

از محیط ذخیره سازی خارج شده و برای کاشت روی سطح استفاده می شود

محیط مغذی کج در لوله های آزمایش. هر تامپون می سازد

تلقیح بر روی یک محیط غذایی در دو لوله آزمایش. کاشت در سطح

محیط غذایی باید در یک حرکت زیگزاگ تولید شود

در امتداد سطح محیط، چرخاندن سواب. اگر قطر لوله های آزمایش باشد

محیط نگهداری و ماده مغذی مشابه هستند، می توانید از یک سواب استفاده کنید

پس از تلقیح، در لوله آزمایش دوم در تماس با

محیط مغذی محصولات در یک ترموستات قرار می گیرند و در آن رشد می کنند

36-37е در خشک کن. لطفا توجه داشته باشید که هنگام استفاده

محیط نگهداری، رشد گونوکوک ممکن است دیرتر از زمان رخ دهد

تلقیح مستقیم مواد پاتولوژیک روی مواد مغذی

کار با محصولات زراعی

کشت گونوکوک را می توان در لوله های آزمایش یا

ظروف پتری؛ روش اول باعث صرفه جویی قابل توجهی می شود

محیط. برای افزایش درصد تلقیح گنوکوک ها، تلقیح می شود

مواد مغذی در یک ترموستات در یک خشک کن با 20% قرار می گیرند.

واکنش های بین اسید سولفوریک و بی کربنات سدیم: در خشک کن

حجم 5 لیتر قرار داده شده است شیشه با 50 میلی لیتر اسید سولفوریک 10 درصد، در

گونوکوک ها لوبیایی شکل هستند، به شکل دیپلوکوک قرار گرفته اند، اطراف آن را یک میکروکپسول احاطه کرده اند، تاژک ندارند و شبیه مننگوکوس هاگ تشکیل نمی دهند. دیواره سلولی دارای غشای خارجی است که پروتئین های آن بر اساس اهمیت عملکردی به سه گروه تقسیم می شوند. گونوکوکی ها با وجود پیلی مشخص می شوند که از نظر خواص آنتی ژنی با یکدیگر متفاوت هستند (16 نوع آنتی ژنی). گونوکوک ها بر روی محیط های غذایی حاوی پروتئین بومی (سرم خون، مایع آسیتی) کشت می شوند. آنها در 3-5٪ CO2 بهتر رشد می کنند. کلنی های شفاف با لبه های صاف روی آسیتاگار تشکیل می شوند. از کربوهیدرات ها، فقط گلوکز تخمیر می شود، کاتالاز و سیتوکروم اکسیداز تشکیل می شوند - آنزیم های معمولی نایسریا.

آنتی ژن ها

ساختار آنتی ژنی گنوکوک ها متغیر است. این به دلیل وجود انواع مختلف آنتی ژنی پیلی است که در طول توسعه عفونت تشکیل می شود.

بیماری زایی و بیماری زایی

گونوکوک ها به اپیتلیوم استوانه ای مجرای ادرار، قسمت واژن دهانه رحم، راست روده، ملتحمه چشم و همچنین اسپرم و تک یاخته (تریکوموناس، آمیب) متصل می شوند. چسبندگی به دلیل پیلی و پروتئین های غشای خارجی دیواره سلولی رخ می دهد. یکی از ویژگی های گونوکوک ها توانایی آنها در نفوذ به لکوسیت ها و تکثیر در آنها است. قسمت لیپولیگوساکاریدی دیواره سلولی اثر سمی دارد. پلی ساکاریدهای کپسولی فاگوسیتوز را مهار می کنند. گونوکوک ها با اتصال به پرزهای اپیتلیوم استوانه ای مخاط مجرای ادرار و در زنان کانال اندوسرویکال با مشارکت پروتئین های غشای خارجی دیواره سلولی به داخل سلول ها نفوذ می کنند. این منجر به ایجاد اورتریت حاد، سرویکس و آسیب به دهانه رحم، زائده ها (لوله ها، تخمدان ها) در زنان، وزیکول های منی و غده پروستات در مردان می شود. با محلی سازی خارج تناسلی، گنوکوک ها می توانند به راست روده و لوزه ها آسیب برسانند و همچنین باعث ایجاد بلنوره (کانژونکتیویت) در نوزادان می شوند. عفونت در حین عبور از کانال تولد مادر مبتلا به سوزاک رخ می دهد.

مصونیت

با سوزاک، یک پاسخ ایمنی هومورال رخ می دهد. با این حال، آنتی بادی های ضد باکتریایی به دست آمده خاصیت محافظتی ندارند. در طول دوره بیماری، IgA تشکیل می شود که اتصال پیلی پاتوژن به سلول های مخاط مجرای ادرار را سرکوب می کند. با این حال، آنها قادر به محافظت از مخاط از عفونت بعدی توسط نسل های دیگر گونوکوک ها نیستند که با تغییر در ساختار آنتی ژنی آنها همراه است. این منجر به عفونت مجدد و عود بیماری و همچنین مزمن شدن بیماری می شود.

عفونت های گنوکوکی

عامل بیماری سوزاک و بلنوره N.gonorrhoeae (که در ابتدا به عنوان gonococcus طبقه بندی شده است) متعلق به خانواده Neisseriaceae، جنس Neisseria است. در اسمیر از ترشحات بیمار، گنوکوک ها شکل دانه های قهوه دارند، گرم منفی هستند و به صورت جفت هم در داخل لکوسیت ها (فاگوسیتوز ناقص) و هم در خارج سلول ها قرار دارند. با توجه به خصوصیات مورفولوژیکی آنها بسیار شبیه به مننگوکوک هستند. گونوکوک ها با پلی مورفیسم مشخص می شوند - سلول های کوچک و بزرگی وجود دارد که به ندرت میله ای شکل هستند. آنها در محیط های حاوی خون، سرم و مایع آسیتی بهتر رشد می کنند. گونوکوک ها حاوی آنتی ژن های پروتئینی و پلی ساکاریدی هستند که بر اساس آن به 16 سرووار تقسیم می شوند اما هنوز در آزمایشگاه های معمول باکتری شناسی مشخص نشده اند و برای تشخیص میکروبیولوژیک عفونت های گنوکوکی از روش های باکتریوسکوپی، باکتریولوژیک، سرولوژی و آلرژی استفاده می شود.

گرفتن مطالب برای تحقیق

برای انجام تشخیص های باکتریولوژیکی و باکتریوسکوپی با وقار و کیفیت خوب، گرفتن صحیح مواد بالینی مهم است. قاعدتاً باید توسط پزشک انجام شود.در مردان ترشحات مجرای ادرار، مجاری پیشابراهی، راست روده و در صورت لزوم، موادی از اوروفارنکس و همچنین ترشح غده پروستات پس از آن بررسی می شود. ماساژ دادن. شما همچنین می توانید رسوبات و "نخ های" ادرار را بررسی کنید، اما گنوکوک ها بسیار کمتر در آنها شناسایی می شوند. قبل از گرفتن مواد از مجرای ادرار، بیمار نباید 5-4 ساعت ادرار کند و از داروهای ضد میکروبی و محلول های ضدعفونی کننده استفاده نکند. دهانه خارجی مجرای ادرار ابتدا با یک سواب پنبه استریل مرطوب شده با محلول 0.85٪ کلرید سدیم و سپس با یک سواب خشک پاک می شود. اسمیرها نه از کود دامی که آزادانه جریان می‌یابد، بلکه از موادی تهیه می‌شوند که با خراشیدن از مخاط مجرای ادرار با یک حلقه باکتریولوژیکی یا قاشق مخصوص Volkmann گرفته می‌شود. برای ترشحات جزئی، انجام ماساژ اولیه مجرای ادرار ضروری است. در زنان، مواد از مجرای ادرار، مجرای پیشابراه، دهانه رحم، رکتوم و در صورت لزوم از اوروفارنکس گرفته می شود. ابتدا واژن از ترشحات پاک می شود، مجرای ادرار ماساژ داده می شود و با خراش دادن با یک حلقه باکتریولوژیک یا قاشق Volkmann مواد خارج می شود. دهانه رحم ابتدا با یک سواب پنبه ای استریل پاک می شود تا پلاک مخاطی خارج شود. ترشحات از کانال دهانه رحم با یک حلقه باکتریولوژیکی یا موچین گرفته می شود. مواد از دیستال رکتوم با استفاده از قاشق Volkmann به صورت کور، یعنی بدون هیچ گونه آمادگی بیمار یا با استفاده از ریکوسکوپ یا اسپکولوم رکتوم گرفته می شود و در این حالت، مواد مورد مطالعه مستقیماً از محل قابل مشاهده ضایعه گرفته می شود. با سوزاک اوروفارنکس، مخاط با سواب های پنبه ای استریل روی نگهدارنده های مخصوص ساخته شده از سیم فولادی از اوروفارنکس گرفته می شود.برای تشخیص لنوره، ترشح ملتحمه با یک حلقه باکتریولوژیک خارج می شود. به ندرت، سوزاک با گونوپسیس، اندوکاردیت یا آرتریت پیچیده می شود. سپس مواد برای juslidzhenya خون یا مایع سینوویال است. با در نظر گرفتن حساسیت بالای گنوکوک ها به نوسانات دما، مواد مورد مطالعه در قمقمه یا کیسه های مخصوص با پد گرمایشی به آزمایشگاه تحویل داده می شوند.

معاینه باکتریوسکوپی

معاینه باکتریوسکوپی رایج ترین روش تشخیص آزمایشگاهی سوزاک و بلنوره در مقایسه با جداسازی کشت های واقعی، اگرچه کمتر حساس است. این امر به ویژه برای دوره مزمن بیماری، زمانی که مواد آزمایش حاوی مقدار کمی گونوکوک باشد، صادق است. با این حال، با جمع آوری صحیح مواد، معاینات مکرر بیماران، استفاده از روش های تحریک کننده و ارزیابی واجد شرایط اسمیر، معاینه باکتریوسکوپی اغلب تشخیص سریع و صحیح بیماری را ممکن می سازد.دو آماده سازی اسمیر نازک و یکنواخت از مواد مورد مطالعه یکی با متیلن بلو رنگ آمیزی می شود، دومی با روش گرم رنگ آمیزی می شود. در غیاب متیلن بلو، یک اسمیر را می توان با محلول آبی 1% کریستال ویولت یا محلول 0.5% سبز درخشان به مدت 1 دقیقه رنگ آمیزی کرد. نتیجه گیری در مورد حضور گنوکوک ها بر اساس خواص آنها انجام می شود: رنگ گرم منفی، ساختار دیپلوکوک، شکل دانه های قهوه، محل قرارگیری در داخل لکوسیت ها. تحت تأثیر آنتی بیوتیک ها و سایر داروهای شیمی درمانی، و همچنین در سوزاک مزمن، مورفولوژی و رنگ گونوکوک می تواند تغییر کند. سلول های منفرد شکل ها و اندازه های متفاوتی پیدا می کنند (به اصطلاح اشکال Asch). علاوه بر این، ماده آزمایش ممکن است حاوی کوکسی های گرم منفی مشابه گونوکوک ها از جنس Veillonella باشد. این امر تا حدی ارزش تشخیصی روش میکروسکوپ اولیه را محدود می کند.بهترین و مطمئن ترین نتایج با روش ایمونوفلورسانس به دست می آید. اسمیرهای نازکی از ترشحات بیمار در شعله مشعل ثابت می شود. سرم ضد گنوکوکی نشاندار شده با فلورسین ایزوتیوسیانات به مدت 1 ساعت در دمای 35 درجه سانتیگراد در یک محفظه مرطوب روی آنها اعمال می شود. پس از این، اسمیرها دو بار با یک محلول بافر شسته می شوند، بافر با گلیسرول اعمال می شوند و با پوشش های پوششی پوشانده می شوند. هنگامی که گنوکوک ها با آنتی بادی های نشاندار شده تعامل می کنند، درخشش مشخصی در اطراف سلول های باکتریایی در زیر میکروسکوپ فلورسنت قابل مشاهده است.

تحقیقات باکتریولوژیک

نشانه‌هایی برای جداسازی کشت خالص گنوکوکی‌ها نتایج مکرر باکتریوسکوپی منفی، وجود میکروارگانیسم‌های مشکوک برای گنوکوکی است، اما از نظر مورفولوژیکی شناسایی نشده‌اند، و همچنین برای ایجاد قابل اعتماد درمان بیماری. بسیار مهم است که محصولات را فوراً در ترموستات قرار دهید. اگر انجام کشت در محل جمع‌آوری مواد غیرممکن است، می‌توانید یک سواب پنبه‌ای را در یک لوله آزمایش با محیط انتقال استوارت آویزان کنید، که تضمین می‌کند زنده ماندن گنوکوک‌ها در حین تحویل به آزمایشگاه حفظ شود. کشت‌ها انجام می‌شوند. طبق طرح استاندارد در یکی از محیط های غذایی ویژه در لوله های آزمایش یا ظروف پتری (CDS، بیلی، آگار خون یا سرم، محیط غذایی خشک شرکت خارکف "Biolek" برای تولید داروهای باکتریایی و دارویی). برای کشت تشخیصی گونوکوک در بسیاری از کشورها از آگار "شکلاتی" نیز استفاده می شود. بهترین رسانه ها آنهایی هستند که بر اساس آگار گوشت خرگوش یا قلب تازه گاو هستند. افزودن 20 واحد در میلی لیتر پلی میکسین و 2 میکروگرم در میلی لیتر لینکومایسین به آنها به طور قابل توجهی فراوانی تلقیح گنوکوک ها را افزایش می دهد، زیرا این داروها از رشد سایر باکتری ها جلوگیری می کنند. قبل از کاشت، تمام محیط ها به مدت 15-20 دقیقه در یک ترموستات گرم می شوند. ظروف و لوله‌های آزمایش با کشت در خشک‌کن‌ها قرار می‌گیرند، جایی که فضایی از 20% CO2 ایجاد می‌شود. کلنی ها معمولاً در عرض 24-18 ساعت رشد می کنند، اما رشد دیرهنگام نیز امکان پذیر است. سپس محصولات در یک ترموستات (در یک خشک کن!) تا 8 روز نگهداری می شوند و ظاهر رشد روزانه بررسی می شود. ثبات. آنها شفاف هستند، مانند قطرات شبنم، تقریباً بی رنگ، اگرچه انواع سفید رنگ نیز می توانند رخ دهند. کلنی های حاصل به صورت ماکروسکوپی و میکروسکوپی بررسی می شوند. در اسمیر، گنوکوک ها به صورت جفت، تتراد و خوشه قرار دارند. کلنی‌های معمولی به منظور جداسازی یک کشت خالص، روی مایل‌های آگار سرم کشت می‌شوند. شناسایی نهایی با در نظر گرفتن خواص مورفولوژیکی، فرهنگی، آنزیمی و آنتی ژنی انجام می شود. از نظر بیوشیمیایی، گونوکوک ها کمی فعال هستند. در محیط های آب پنیر با 5/1 درصد کربوهیدرات های مختلف، فقط گلوکز را تجزیه می کنند، اما مالتوز و ساکارز را تجزیه نمی کنند.فعالیت اکسیداز کشت های جدا شده با استفاده از محلول 1 درصد دی متیل پارافنیلن دی آمین به کلنی ها (پس از میکروسکوپ) تعیین می شود. کلنی های اکسیداز مثبت ابتدا قرمز و بعداً سیاه می شوند.تمایز گونوکوک ها از سایر گونه های جنس نایسریا در تشخیص سوزاک اوروفارنکس اهمیت ویژه ای دارد. همانطور که مشخص است، روی غشای مخاطی لوزه ها، دهان و نازوفارنکس همیشه تعداد زیادی نایسریا گرم منفی وجود دارد - نمایندگان میکرو فلور طبیعی انسان. روش‌های قابل اعتماد برای شناسایی گنوکوکی‌ها، واکنش‌های ایمونوفلورسانس، لاتکس و کوآگلوتیناسیون و همچنین تعیین خواص آنزیمی است. انجام یک تعیین کیفی حساسیت یا مقاومت میکروارگانیسم ها به آنتی بیوتیک ها با استفاده از روش انتشار آگار با استفاده از دیسک ضروری است. موارد تنبل و مزمن بیماری، روش های تحریک سوزاک استفاده می شود، یعنی تشدید مصنوعی فرآیند پاتولوژیک، در نتیجه تعداد بیشتری از گنوکوک ها در ترشحات ظاهر می شوند. عمده این روش ها عبارتند از: الف) شیمیایی - القای محلول 0.5٪ نیترات نقره در مجرای ادرار در مردان، روانکاری کانال دهانه رحم با محلول 2-5٪ نیترات نقره؛ ب) مکانیکی - وارد کردن مستقیم. بوژی به مدت 10 دقیقه در مجرای ادرار یا اورتروسکوپی قدامی؛ ج) تزریق بیولوژیکی - عضلانی گونوواکسین به مقدار 500 میلیون اجسام میکروبی یا پیروژنال 200 MTD؛ د) تغذیه - مصرف غذاهای شور و تند؛ ه) حرارتی - گرم کردن بدن اندام تناسلی با جریان القایی گرما؛ و) فیزیولوژیکی - گرفتن اسمیر در طول قاعدگی. حتی بهتر است چندین روش تحریک را ترکیب کنید، به عنوان مثال، شیمیایی، تغذیه ای و بیولوژیکی. اخیراً از واکنش زنجیره ای پلیمراز برای شناسایی مطمئن تر عامل ایجاد کننده استفاده شده است. از سوزاک این به شما امکان می دهد پاتوژن را در موارد سوزاک مزمن شناسایی کنید، زمانی که معاینه باکتریوسکوپی و باکتریولوژیکی نتایج مثبتی به دست نمی دهد.

تشخیص سرولوژیکی

تشخیص سرولوژیک سوزاک نسبتاً به ندرت انجام می شود، عمدتاً در دوره مزمن آن، زمانی که مطالعات باکتریوسکوپی و باکتریولوژیکی نتایج مثبتی به دست نمی دهند. در شرایط مدرن، ایمونواسی آنزیمی، واکنش‌های RNGA و Bordet-Gengou (BRS) انجام می‌شود. آنتی‌ژن‌های این واکنش‌ها عبارتند از: واکسن گنوکوکی چند ظرفیتی با گرما، واکسن غیرفعال‌شده با اولتراسوند، بخش‌های پروتئینی و پلی‌ساکاریدی گنوکوک‌ها و همچنین آنتی‌ژن پیریدین. ELISA و RNGA واکنش های سرولوژیکی بسیار اختصاصی و قابل اعتماد هستند. در مقایسه با گذشته، RSK تا حدودی نقش خود را از دست داده است. هیچ ارزش عملی در تشخیص سوزاک حاد ندارد، زیرا قبل از تشکیل مقدار قابل توجهی از آنتی بادی ها درمان می شود. به طور کلی برای ایجاد قابلیت اطمینان یک درمان نامناسب است. واکنش Bordet-Gengou در تشخیص سروزی سوزاک مزمن، به ویژه در اشکال پیچیده آن (گونوسپسیس، متریت، آرتریت، پروستاتیت و غیره) مهم است. سالها پس از سوزاک برای تنظیم آنها، 0.1 میلی لیتر واکسن گنوکوک تازه (100 میلیون سلول میکروبی در 1 میلی لیتر) به صورت داخل جلدی تزریق می شود. پس از 24 ساعت، پرخونی مشاهده می شود، گاهی اوقات با تورم در مرکز.

درمان و پیشگیری

برای شیمی درمانی سوزاک، از آنتی بیوتیک ها استفاده می شود: بتالاکتام ها (پنی سیلین ها، سفالوسپورین ها) و سایر آنتی بیوتیک ها. پیشگیری واکسیناسیون سوزاک به دلیل عدم وجود واکسن های موثر انجام نمی شود. برای جلوگیری از بلنوره، به همه نوزادان محلول یکی از آنتی بیوتیک های ذکر شده در ملتحمه چشم تزریق می شود.

این آگار با افزودن خون، هموگلوبین یا سایر مواد افزودنی برای جداسازی انتخابی گنوکوک توصیه می شود.

ترکیب**:

** ترکیب تأیید و تنظیم شده است تا پارامترهای مورد نیاز را برآورده کند

آماده سازی:

7.2 گرم پودر را در 100 میلی لیتر آب مقطر مخلوط کنید تا یک محیط با قدرت دو برابر تهیه شود. حرارت دهید تا به جوش آید تا ذرات کاملا حل شوند. با اتوکلاو در دمای 1.1 اتمسفر (121 درجه سانتیگراد) به مدت 15 دقیقه استریل کنید. تا دمای 50 درجه سانتیگراد خنک کنید و 100 میلی لیتر محلول هموگلوبین استریل 2% (FD022) و مکمل GC (FD021) را به طور جداگانه آماده شده به آن اضافه کنید. کاملا مخلوط کنید و در ظرف های پتری بریزید. برای ایجاد خواص انتخابی، آنتی بیوتیک های موجود در افزودنی های زیر را می توان به محیط اضافه کرد: VNC (FD023)، VCNT (FD024)، Linco T (FD026)، Vanco (FD028).

برای تهیه آگار شکلاتی، محیطی با غلظت معمولی با هم زدن 3.6 گرم پودر در 100 میلی لیتر آب مقطر آماده کنید. استریل کنید، تا 5% (v/v) خون استریل دفیبرین شده را اضافه کنید و محیط را در دمای 80 درجه سانتی گراد به مدت 10 دقیقه گرم کنید.

اصل و ارزیابی نتیجه:

این آگار با افزودن خون یا هموگلوبین و سایر مواد افزودنی برای جداسازی و پرورش انتخابی میکروارگانیسم‌های سختگیر مانند گونوکوک و باکتری هموفیلوس آنفلوآنزا توصیه می‌شود. جانستون آگار شکلاتی را تولید کرد که روی آن می‌توان در عرض 24 ساعت رشد کرد نایسریا گونوره(1). بعدها، نویسندگان دیگر (2) محیط را با وارد کردن هموگلوبین به ترکیب آن بهبود بخشیدند.

آگار حاوی پپتون خاصی است - منبعی از مواد مغذی برای میکروارگانیسم ها. نشاسته به خنثی کردن مواد سمی تولید شده توسط نایسریا کمک می کند و فسفات ها با تغییر pH ناشی از تشکیل آمین ها مقابله می کنند که می تواند بر رشد و زنده ماندن میکروارگانیسم ها نیز تأثیر بگذارد. هموگلوبین به عنوان منبع فاکتور X برای باکتری های هموفیل عمل می کند. افزودنی دیگر محیط را با فاکتور V (NAD، نیکونین آمید آدنین دی نوکلئوتید)، لازم برای هموفیلوس آنفلوآنزا، و همچنین اسیدهای آمینه، ویتامین ها، یون های آهن و غیره غنی می کند که باعث تحریک رشد نایسریا بیماری زا می شود.

برای جمع آوری مواد از سواب پنبه ای استفاده نکنید. کاشت بلافاصله پس از جمع آوری مواد انجام می شود. باید به گونه ای انجام شود که مناطق رشد متراکم و پراکنده وجود داشته باشد. تلقیح در دمای 37 درجه سانتیگراد در اتمسفر 5-10 درصد دی اکسید کربن و 70 درصد رطوبت انکوبه می شود. تمام کلنی های مشکوک باید با استفاده از تست های بیوشیمیایی و/یا سرولوژیکی آزمایش شوند.

کنترل کیفیت:

ظاهر پودری:

پودر همگن با جریان آزاد زرد روشن.

چگالی محیط نهایی:

محیطی متناسب با چگالی ژل آگار 1.0 درصد تشکیل می شود.

رنگ و شفافیت محیط نهایی:

پایه محیط به رنگ زرد روشن، شفاف یا کمی مادی است. پس از افزودن هموگلوبین، اگر ژل در ظروف پتری تشکیل شود، محیط قهوه ای شکلاتی و مات می شود.

اسیدیته محیط:

در دمای 25 درجه سانتیگراد، محلول آبی (3.6% w/v) دارای pH 0.2 ± 7.2 است.

خواص فرهنگی:

خصوصیات رشد سویه مرجع پس از 40-48 ساعت در دمای 35-37 درجه سانتی گراد بر روی شکلات آگار تهیه شده بر این اساس، در حضور اتمسفر 10-5 درصد دی اکسید کربن و 70 درصد رطوبت.

Neisseria gonorrhoeae متعلق به خانواده Neisseriaceae، جنس Neisseria است. گونوکوکی توسط نایسر در سال 1879 کشف شد و تمام خانواده به نام او نامگذاری شدند.

مرفولوژی. گونوکوک ها دیپلوکوک هایی هستند که از دو کوکسی به شکل دانه تشکیل شده اند که به صورت مقعر روی هم قرار گرفته اند (یادآور دانه های قهوه). اندازه گنوکوک ها 1.2-1.3 × 0.7-0.8 میکرون است. آنها چندشکلی هستند؛ همراه با باکتری های بزرگ، باکتری های L شکل بسیار کوچک با شکل نامنظم وجود دارند. گونوکوک ها بی حرکت هستند و هاگ ندارند. یک ماده کپسولی شکل در ماده پاتولوژیک (چرک) یافت می شود. گرم منفی تحت تأثیر داروها و سایر مواد، آنها به سرعت تغییر می کنند: اشکال گرم مثبت ظاهر می شود. در مواد پاتولوژیک آنها در داخل سلولی (در یک لکوسیت) قرار دارند، اما می توانند خارج از سلول باشند. آنها را می توان به شکل کوکسی های فردی یافت (شکل 4 را ببینید).

کشت. گونوکوک ها هوازی هستند. برای محیط های مغذی بسیار خواستار است. آنها در محیط های حاوی پروتئین بومی (انسانی) - خون، سرم، در دمای 37 درجه سانتیگراد و pH 7.2-7.4 رشد می کنند. رسانه باید تازه آماده و مرطوب باشد. کاشت باید بلافاصله پس از برداشت مواد انجام شود. روی یک محیط سرم، گونوکوک ها کلونی های کوچکی به ابعاد 1-2 میلی متر، شفاف، براق با لبه های صاف، شبیه قطرات شبنم تشکیل می دهند. در محیط خونی همولیز وجود ندارد. در آب پنیر آب پنیر کمی کدورت می دهند و لایه ای می دهند که در ته لوله آزمایش ته نشین می شود. اگر بعد از 24 ساعت رشد ضعیف باشد، محصولات برای روز دوم در ترموستات رها می شوند.

خواص آنزیمی. خواص ساکارولیتیک ضعیف بیان می شود. گونوکوک ها فقط یک قند را تجزیه می کنند - گلوکز و اسید تولید می کنند. آنها خاصیت پروتئولیتیک ندارند.

تشکیل سم. دیواره سلولی گونوکوک حاوی یک ماده سمی - لیپوپلی ساکارید (کم مطالعه شده است).

ساختار آنتی ژنیک. ساختار آنتی ژنی ناهمگن است و به راحتی تحت تأثیر عوامل محیطی تغییر می کند. هیچ تقسیم پذیرفته شده ای از گونوکوک ها به سرووارها و سروتیپ ها وجود ندارد.

مقاومت در برابر عوامل محیطی. در محیط خارجی، گونوکوک ها خیلی پایدار نیستند. در دمای 56-60 درجه سانتیگراد می میرند. در دمای 40 درجه سانتیگراد، زنده ماندن آنها به شدت کاهش می یابد. دمای پایین و خشک شدن سریع آنها را از بین می برد. اما آنها تا 24 ساعت در چرک باقی می مانند.محلول های ضد عفونی کننده - محلول 1% فنل، کلرید جیوه 1:1000 در عرض چند دقیقه گنوکوک ها را از بین می برند. گونوکوک ها به خصوص به نمک های نقره حساس هستند - محلول نیترات نقره 1٪ آنها را بلافاصله می کشد. اشعه ماوراء بنفش در عرض چند دقیقه آنها را از بین می برد.

حساسیت حیوانات. حیوانات به گونوکوک حساس نیستند. اما تزریق داخل صفاقی سم گنوکوکی به موش های سفید باعث مرگ آنها می شود.

منابع عفونت. فرد مبتلا به سوزاک.

مسیرهای انتقال. تماس با خانه (جنسی)، کمتر از طریق اشیاء آلوده (حوله، اسفنج، و غیره).

بیماری ها در انسان. سوزاک و بلنوره.

پاتوژنز. میزبان طبیعی گونوکوک ها یک فرد بیمار است. گونوکوک ها از طریق غشاهای مخاطی مجرای ادرار (در زنان، مجرای ادرار و دهانه رحم) نفوذ می کنند. عامل بیماری زایی گنوکوک ها وجود پیلی است که با اتصال به میکروویلی های اپیتلیوم استوانه ای، نفوذ گنوکوک را به سلول اپیتلیال تسهیل می کند و باعث ایجاد یک فرآیند التهابی حاد در غشای مخاطی می شود.

سوزاک از نظر بالینی با درد در هنگام ادرار کردن، ترشح چرک از مجرای ادرار و واژن ظاهر می شود. این بیماری حاد است، اما گاهی اوقات مزمن می شود. گونوکوک می تواند باعث التهاب ملتحمه سوزاک - بلنوره (التهاب چرکی غشای مخاطی چشم در نوزادان) شود. گونوکوک ها به ندرت از مجرای ادرار به اندام های دیگر نفوذ می کنند، اما گاهی اوقات می توانند باعث آرتریت، اندوکاردیت و غیره شوند.

مصونیت. هیچ مقاومت طبیعی در برابر گونوکوک وجود ندارد. بیماری منتقل شده نیز ایمنی ایجاد نمی کند. فاگوسیتوز مشاهده شده ناقص است.

جلوگیری. آموزش بهداشت. افزایش سطح فرهنگی و بهداشتی. پیشگیری خاصی وجود ندارد. برای جلوگیری از بلنوره، کودکان باید بلافاصله پس از تولد با 1-2 قطره محلول آلبوسید 30 درصد به کیسه ملتحمه تزریق شوند.

رفتار. آنتی بیوتیک ها (پنی سیلین، بی سیلین، استرپتومایسین و غیره). از داروهای سولفونامید نیز استفاده می شود. برای شکل مزمن، از واکسن گونوکوک استفاده می شود.

کنترل سوالات

1. خواص مورفولوژیکی گنوکوک ها را شرح دهید.

2. فعالیت آنزیمی و تولید سم گنوکوک ها چیست؟

3. مقاومت گونوکوک چقدر است. گونوکوک ها به کدام دارو حساس هستند؟

4. گنوکوک ها چه بیماری هایی ایجاد می کنند و پاتوژنز آنها.

بررسی میکروبیولوژیکی

هدف از مطالعه: شناسایی گنوکوک ها و آنتی بادی های آنتی گونوکوکی.

مواد برای تحقیق

1. ترشحات از مخاط مجرای ادرار در مردان.

2. ترشحات از غشای مخاطی مجرای ادرار و دهانه رحم در زنان.

3. ترشحات چرکی از چشم.

4. خون برای سرم.

توجه داشته باشید. برای بررسی باکتریوسکوپی و باکتریولوژیکی، مواد گرفته می شود: 1) قبل از شروع درمان آنتی بیوتیکی: 2) زودتر از 10 روز پس از پایان درمان آنتی بیوتیکی. 3) نه زودتر از 2 ساعت پس از آخرین ادرار. 4) نباید زودتر از 2 ساعت پس از دوش.

روشهای اساسی تحقیق

1. میکروسکوپی (عمدتا برای اشکال حاد استفاده می شود).

2. میکروبیولوژیک.

3. سرولوژیکی.

پیشرفت مطالعه

روز دوم مطالعه

محصولات را از ترموستات خارج کرده و آنها را بررسی کنید. مطالعه مستعمرات اسمیر درست می کنند. اگر دیپلوکوک های گرم منفی مشکوک وجود داشته باشد، کلنی ها روی محیط مایل در لوله های آزمایش زیر کشت داده می شوند (محیط باید تازه تهیه شده باشد و حاوی مقدار کافی میعانات باشد) و از نظر اکسیداز آزمایش می شود. برای انجام این کار، یک قطره از محلول دی متیل پارافنیلن دی آمین 1٪ با پیپت به کلنی زده می شود؛ کلنی ها از قهوه ای تیره به سیاه تغییر رنگ می دهند.

روز سوم مطالعه

کشت ها از ترموستات خارج می شوند، اسمیر از آگار مایل تهیه می شود، با گرم رنگ آمیزی می شود و به صورت میکروسکوپی بررسی می شود. روی محیط های هیس (لاکتوز، گلوکز، مانیتول و مالتوز) تلقیح شود. این کربوهیدرات ها باید حاوی 30 درصد سرم خون باشند. لوله های آزمایش تلقیح شده در یک ترموستات قرار می گیرند.

روز چهارم تحقیق

لوله ها را از ترموستات خارج کنید، در صورت عدم رشد، آنها را برای 1-2 روز دیگر در ترموستات بگذارید. در صورت وجود رشد، نتایج در نظر گرفته می شود (جدول 28).

تشخیص سرولوژیکی

هفته سوم بیماری در سیر مزمن بیماری و در موارد مشکوک، RSC با استفاده از سرم بیمار انجام می شود (به فصل 12 مراجعه کنید). کشت کشته شده گونوکوکی که در شرایط صنعتی تهیه می شود به عنوان آنتی ژن استفاده می شود. می توانید از واکنش هماگلوتیناسیون غیرمستقیم استفاده کنید (به فصل 12 مراجعه کنید).

کنترل سوالات

1. برای شناسایی گنوکوک ها از چه ماده ای استفاده می شود و چگونه به دست می آید؟

2. چه مدت بعد از ادرار (یا دوش در زنان) می توان برای تحقیق مواد گرفت؟

3. کدام روش تحقیق برای فرم حاد و کدام روش برای فرم مزمن سوزاک است؟

4. در صورت مشکوک شدن به سوزاک چه زمانی و چه آزمایش سرولوژیکی انجام می شود؟

5. برای افتراق گنوکوک ها از چه میکروارگانیسم هایی نیاز است؟

دارو را از معلم خود بگیرید. آن را مطالعه کنید و با استفاده از رنگ آمیزی گرم، گنوکوک های واقع در داخل و خارج لکوسیت را ترسیم کنید.

رسانه فرهنگ

زرده متوسط. به 100 میلی لیتر MPA از گوشت خرگوش، 15 میلی لیتر زرده (تخم مرغ تازه)، 6 میلی لیتر نشانگر قرمز فنل، 1.5 میلی لیتر شکر حل شده در 1 میلی لیتر آب مقطر استریل اضافه کنید.

محیط مغذی آسیت آگار. به فیلتر آبگوشت تهیه شده از گوشت خرگوش، 2% آگار، 1% پپتون و 0.5% کلرید سدیم اضافه کنید. حرارت دهید تا آگار حل شود، PH را روی 7.4-7.5 تنظیم کنید و با هیدروکسید سدیم 20% قلیایی کنید. محیط را به جوش می آورند، فیلتر می کنند، داخل ویال های استریل می ریزند و در اتوکلاو به مدت 15 دقیقه در دمای 115 درجه سانتی گراد استریل می کنند.

دستور العمل برای محیط های کشت بدون آسیت (MPA pH 7.4-7.5).

1) آب گوشت از گوشت خرگوش یا قلب گاو - 100 میلی لیتر

هیدرولیز کازئین - 2 میلی لیتر

اتولیز مخمر - 2 میلی لیتر

سرم خون گاو - 20 میلی لیتر

2) آب گوشت از گوشت خرگوش یا قلب گاو - 100 میلی لیتر

محلول 5٪ همو هیدرولیزات - 2 میلی لیتر

اتولیز مخمر - 2 میلی لیتر

سرم گاو - 20 میلی لیتر

3) آب گوشت از گوشت خرگوش یا قلب گاو - 100 میلی لیتر

زرده تخم مرغ - 10 میلی لیتر

سرم خون گاو - 20 میلی لیتر

رشد گونوکوک ها در این محیط ها فراوان است. کلنی های گونوکوک را می توان با استفاده از آزمایش اکسیداز شناسایی کرد که در آن قرمز و سیاه می شوند.