Diagnosis PCR pengobatan DNA klamidia trachomatis. Pengujian klamidia menggunakan metode PCR. Interpretasi hasil penelitian “Chlamydia trachomatis, penentuan DNA”

Keterangan

Persiapan

Indikasi

Interpretasi hasil

Keterangan

Metode penentuan PCR dengan deteksi waktu nyata.

Materi yang sedang dipelajari Pengikisan sel epitel urogenital

Kunjungan rumah tersedia

Penentuan DNA Chlamydia trachomatis pada kerokan sel epitel saluran urogenital menggunakan metode Polymerase Chain Reaction (PCR) dengan deteksi real-time.

Ciri-ciri siklus hidup Chlamydia trachomatis menyebabkan seringnya terjadinya bentuk infeksi yang persisten dan resistensi terhadap terapi. Reaktivasi infeksi dapat terjadi di bawah pengaruh perubahan status kekebalan atau hormonal, trauma, pembedahan, atau stres. Chlamydia trachomatis memiliki imunogenisitas yang rendah, akibatnya antibodi tidak terdeteksi pada 50% orang yang terinfeksi. Oleh karena itu (terutama dalam kasus yang meragukan, tanpa adanya serokonversi), mikroorganisme dideteksi dengan metode langsung yang sangat sensitif dan spesifik - PCR.

Indikator analitik: untuk mendeteksi DNA C. trachomatis dalam sampel klinis dengan reaksi berantai polimerase (PCR):

• fragmen yang ditentukan adalah wilayah spesifik DNA Chlamydia trachomatis;
• spesifisitas deteksi - 100%;
• sensitivitas analisis - 100 salinan DNA Chlamydia trachomatis per sampel.

Persiapan

Dianjurkan untuk melakukan pemeriksaan terhadap wanita pada paruh pertama siklus menstruasi, tidak lebih awal dari hari ke-5. Pemeriksaan diperbolehkan pada paruh kedua siklus, selambat-lambatnya 5 hari sebelum perkiraan awal menstruasi. Jika terdapat gejala peradangan yang parah, bahan tersebut diambil pada hari pengobatan. Sehari sebelum dan pada hari pemeriksaan, pasien tidak dianjurkan melakukan douche pada vagina. Tidak dianjurkan pengambilan biomaterial selama terapi antibiotik (umum/lokal) dan saat menstruasi, lebih awal dari 24-48 jam setelah hubungan seksual, USG intravaginal dan kolposkopi. Disarankan untuk mengambil bahan paling awal 14 hari setelah penggunaan obat antibakteri dan antiseptik lokal, dan paling awal 1 bulan setelah penggunaan antibiotik oral. Apabila diambil kerokan dari uretra untuk penelitian, maka bahannya diambil sebelum atau paling lambat 2 sampai 3 jam setelah buang air kecil.

Indikasi untuk digunakan

• Fase akut penyakit.
• Menetapkan etiologi proses infeksi kronis pada saluran urogenital, termasuk bagian atasnya, kemampuan mendeteksi molekul DNA tunggal sel klamidia yang tidak terdeteksi dengan metode lain.
• Kehamilan dengan riwayat obstetrik yang terbebani.
• Infertilitas.
• Memantau efektivitas terapi (tidak lebih awal dari sebulan setelah berhenti minum obat antibakteri).
• Studi skrining preventif (untuk menyingkirkan kemungkinan infeksi tanpa gejala).

Interpretasi hasil

Interpretasi hasil penelitian berisi informasi untuk dokter yang merawat dan bukan merupakan diagnosis. Informasi di bagian ini tidak boleh digunakan untuk diagnosis mandiri atau pengobatan mandiri. Dokter membuat diagnosis yang akurat dengan menggunakan hasil pemeriksaan ini dan informasi yang diperlukan dari sumber lain: riwayat kesehatan, hasil pemeriksaan lain, dll.

Tesnya bersifat kualitatif. Hasilnya diberikan dalam istilah “terdeteksi” atau “tidak terdeteksi”.

• “terdeteksi”: sebuah fragmen DNA spesifik untuk Chlamydia trachomatis ditemukan dalam sampel bahan biologis yang dianalisis; Infeksi Chlamydia trachomatis;
• “tidak terdeteksi”: tidak ditemukan fragmen DNA spesifik untuk Chlamydia trachomatis dalam sampel bahan biologis yang dianalisis atau konsentrasi patogen dalam sampel berada di bawah batas sensitivitas pengujian.

Harap diperhatikan bahwa waktu penyelesaian pemeriksaan PCR dapat diperpanjang ketika tes konfirmasi dilakukan.

Bahan biologis: mengolesi

Klamidia trachomatis

Reaksi berantai polimerase (PCR) memungkinkan Anda meningkatkan jumlah salinan DNA bakteri atau virus jutaan kali lipat menggunakan enzim DNA polimerase. Satu molekul DNA sudah cukup untuk diagnosis. Jumlah DNA yang disintesis diidentifikasi dengan enzim immunoassay atau elektroforesis. Diagnostik PCR memungkinkan Anda mendeteksi patogen pada tahap awal proses infeksi, di lingkungan biologis tubuh mana pun, dengan kemungkinan penentuan kuantitatif virus atau bakteri.

Bahan penelitiannya adalah kerokan sel epitel saluran serviks, uretra, konjungtiva mata, dinding posterior faring, dan cairan sinovial (artikular).

Untuk penyakit yang ditimbulkan klamidia trachomatis , termasuk: klamidia dan konjungtivitis urogenital, limfogranuloma venereum, artritis reaktif, jarang - endokarditis.
Klamidia urogenital akut ditandai dengan keluarnya cairan mukopurulen yang banyak, kemerahan dan pembengkakan pada selaput lendir, gangguan buang air kecil, dan nyeri di daerah panggul. Gejala biasanya muncul 3-4 minggu setelah terinfeksi. Klamidia kronis ditandai dengan gejala yang kurang jelas, hilang, dan terkadang tidak ada. Komplikasi berat dari klamidia kronis adalah infertilitas, keguguran, dan kelainan ekstragenital.
Bentuk utama klamidia urogenital adalah endometritis, salpingitis, ooforitis, sistitis, epididimitis, orkitis, prostatitis. Klamidia sering disertai dengan infeksi patogen infeksi genitourinari lainnya, seperti mikoplasma, ureaplasma, gonokokus, dan Trichomonas. Deteksi infeksi yang tepat waktu dapat meningkatkan efektivitas pengobatan dan menghindari proses yang kronis.
Reaksi berantai polimerase (PCR) meningkatkan jumlah salinan DNA bakteri atau virus hingga jutaan kali lipat menggunakan enzim DNA polimerase. Satu molekul DNA sudah cukup untuk diagnosis. Jumlah DNA yang disintesis diidentifikasi dengan enzim immunoassay atau elektroforesis. Diagnostik PCR memungkinkan Anda mendeteksi patogen pada tahap awal proses infeksi, di lingkungan biologis tubuh mana pun, dengan kemungkinan penentuan kuantitatif virus atau bakteri.

Indikasi untuk tujuan penelitian

1. Diagnosis IMS.
2. Penyakit radang kronis pada sistem genitourinari.
3. Patologi obstetri dan ginekologi.
4. Erosi semu pada serviks.
5. Artritis reaktif.
6. Konjungtivitis kronis.
7. Demam yang tidak diketahui asalnya.
8. Ketidakteraturan menstruasi.
9. Kebiasaan keguguran.
10. Kuretase terapeutik dan diagnostik pada selaput lendir serviks dan badan rahim.
11. Pemeriksaan preventif.

Mempersiapkan studi

2 minggu sebelum penelitian, dianjurkan untuk menghindari penggunaan obat antibakteri dan melakukan hubungan seksual sehari sebelumnya. Saat mengambil apusan dari uretra, Anda harus menahan diri untuk tidak buang air kecil selama 2-3 jam. Saat mengambil apusan dari vagina dan saluran serviks satu hari sebelum tes, douching dan penggunaan obat-obatan intravaginal tidak termasuk. Tidak ada apusan yang diambil selama menstruasi. Pengambilan bahan dari konjungtiva mata hanya dilakukan oleh dokter spesialis mata.

Pemeriksaan primer eksternal oleh dokter tidak memungkinkan dibuatnya diagnosis yang akurat. Pasien diwawancarai, dan berdasarkan keluhannya, dibuat asumsi tentang kemungkinan penyakitnya. Klarifikasi diagnosis kontroversial hanya mungkin dilakukan berdasarkan hasil tes laboratorium dan berbagai tes. PCR adalah reaksi berantai polimerase. Metode yang populer dan efektif adalah dengan memeriksa partikel DNA terkecil dalam sampel yang diambil dari pasien. Pembesaran buatan partikel-partikel ini dengan bantuan enzim memungkinkan untuk melihat agen penyebab infeksi - klamidia. Akurasi teknik PCR jauh lebih tinggi dibandingkan tes serupa. Klamidia dapat dideteksi pada tahap awal hanya melalui PCR. Metode diagnostik lain memerlukan konfirmasi.

Hasil tes bergantung pada persiapan pasien, berapa lama waktu yang telah berlalu sejak terinfeksi, dan karakteristik individu dari tubuh orang yang terinfeksi. Apusan untuk klamidia menggunakan metode PCR hanya ditentukan oleh dokter, dan hanya spesialis berpengalaman yang terlibat dalam menguraikan hasil yang diperoleh. Menentukan klamidia menggunakan PCR tidak memakan banyak waktu dan memungkinkan Anda memulai pengobatan penyakit menular seksual yang efektif sesegera mungkin.

Hati-hati

Pada wanita: nyeri dan radang ovarium. Fibroma, mioma, mastopati fibrokistik, radang kelenjar adrenal, kandung kemih dan ginjal berkembang. Serta penyakit jantung dan kanker.

Mempersiapkan analisis

PCR untuk klamidia hanya terjadi setelah pasien dipersiapkan dengan matang. Mengikuti rekomendasi dari seorang spesialis adalah jaminan hasil yang akurat. Aturan persiapan pengiriman biomaterial:

1. Tiga puluh hari sebelum tes, pasien harus berhenti minum obat apa pun, termasuk antibiotik dan obat antijamur. Dalam kasus luar biasa, dokter meresepkan obat yang tidak mempengaruhi hasil PCR di masa depan (pasien menderita penyakit kronis atau ada kebutuhan mendesak untuk mendiagnosis klamidia).
2. Bahan yang cocok untuk penelitian laboratorium lebih lanjut dapat dikumpulkan hanya tiga atau empat jam setelah pasien terakhir buang air kecil.
3. Segala hubungan seksual dihentikan seminggu sebelum tes (PCR untuk klamidia). Jika tidak, hasilnya akan tidak akurat.
4. Bagi wanita, pengambilan biomaterial hanya dijadwalkan pada hari keempat setelah berakhirnya menstruasi.
5. Seminggu sebelum tes, wanita tersebut harus menghindari douching atau prosedur pembersihan serupa yang mungkin diresepkan oleh dokter kandungan.

Mempersiapkan sampel yang diambil dari pasien untuk pengujian laboratorium merupakan prasyarat untuk mendiagnosis infeksi dengan benar. Mengabaikan rekomendasi dan resep dokter spesialis dapat menyebabkan komplikasi akibat pengobatan klamidia yang salah.

Metode pengumpulan darah

Tujuan pemeriksaan

Metode diagnostik yang efektif untuk mendeteksi infeksi

Metode reaksi polimerase digunakan dalam pengobatan modern sebagai salah satu cara paling efektif untuk mendiagnosis klamidia.

Melakukan analisis

Analisisnya, berdasarkan reaksi berantai partikel DNA kecil di bawah pengaruh enzim, terjadi dalam beberapa tahap. Pasien mengikuti semua rekomendasi dokter dan mempersiapkan diri dengan cermat untuk pemberian sampel. Pemeriksaan PCR diawali dengan pengambilan darah atau biomaterial dari alat kelamin pasien suspek klamidia. Jika kerokan diambil untuk pemeriksaan laboratorium lebih lanjut, maka laki-laki menjalani prosedur di kantor ahli urologi, dan perempuan pergi ke dokter kandungan.

Untuk perwakilan dari jenis kelamin yang lebih kuat, prosesnya memakan waktu lebih lama, karena untuk mengambil sampel perlu menggunakan alat khusus: sendok dan probe. Alat untuk mengumpulkan biomaterial dimasukkan langsung ke dalam uretra pria tersebut, dan kemudian sampel dikeluarkan dengan hati-hati untuk dianalisis. Probe ditempatkan dalam tabung yang sudah disiapkan dan dibersihkan (diisi dengan media transportasi). Dengan cara serupa, biomaterial dikumpulkan dari vagina wanita. Dalam kasus khusus, ketika pengambilan sampel dari uretra tidak memungkinkan (karena berbagai alasan), air liur, urin setelah pijat prostat, atau ejakulasi diambil dari pria. Setelah dilakukan kerokan, sampel yang dihasilkan dikirim ke laboratorium untuk penelitian lebih lanjut.

Dari:

Saya merasa sangat buruk selama beberapa tahun terakhir. Kelelahan terus-menerus, susah tidur, apatis, malas, sering sakit kepala. Saya juga punya masalah pencernaan, dan di pagi hari saya mengalami bau mulut.

Dan inilah cerita saya

Semua ini mulai menumpuk dan saya menyadari bahwa saya sedang bergerak ke arah yang salah. Saya mulai menjalani gaya hidup sehat dan makan dengan benar, tetapi hal ini tidak mempengaruhi kesehatan saya. Para dokter juga tidak bisa berkata apa-apa. Segalanya tampak normal, tetapi saya merasa tubuh saya tidak sehat.

Beberapa minggu kemudian saya menemukan sebuah artikel di Internet. benar-benar mengubah hidup saya. Saya melakukan segalanya seperti yang tertulis di sana dan setelah beberapa hari, saya merasakan peningkatan yang signifikan pada tubuh saya. Saya mulai cukup tidur lebih cepat, dan energi yang saya miliki di masa muda muncul. Kepala saya tidak sakit lagi, pikiran saya menjadi lebih jernih, otak saya mulai bekerja lebih baik. Pencernaan saya membaik, meski sekarang saya makan sembarangan. Saya mengikuti tes dan memastikan tidak ada orang lain yang tinggal di dalam saya!

Menguraikan hasilnya

Dalam diagnosis yang cepat dan akurat, yang penting bukanlah metode pengumpulan biomaterial, melainkan hasil, yang harus diuraikan dengan benar. Bagi seseorang yang tidak memiliki pendidikan kedokteran, mustahil untuk memahami kesimpulan dari pemeriksaan laboratorium. Diagnosis ditegakkan berdasarkan:

• mewawancarai pasien (anamnesis dikumpulkan pada pemeriksaan awal);
• dua atau lebih hasil pemeriksaan laboratorium;
• penyakit penyerta yang ditemukan selama pemeriksaan tubuh secara menyeluruh.

Mengapa PCR smear untuk mendeteksi klamidia dianggap paling akurat? Mengirimkan biomaterial untuk penelitian lebih lanjut menggunakan metode ini memungkinkan Anda mendapatkan hasil yang cepat, yang penting jika penyakit sudah lanjut. Metode pengumpulan sampel yang berbeda membantu menghindari kontraindikasi bagi wanita hamil, wanita dengan ketidakseimbangan hormon, dan pria yang tidak dapat melakukan pemeriksaan. PCR membantu mengidentifikasi banyak patogen penyakit berbahaya. Metode yang aman digunakan pada setiap tahap penyakit yang ditularkan melalui kontak seksual.

Chlamydia adalah bakteri atipikal yang ditularkan secara seksual. Dalam tubuh manusia, selama hidupnya, hal ini menyebabkan peradangan kronis pada organ panggul, pada pria - orkitis, uretritis atau prostatitis. Tidak mungkin mendiagnosis patologi ini hanya berdasarkan manifestasi klinis. Untuk melakukan ini, perlu dilakukan diagnosis lanjutan, yang meliputi pemeriksaan laboratorium. Dengan bantuan mereka, klamidia juga dapat dideteksi bahkan sebelum seseorang mulai merasakan manifestasi yang tidak menyenangkan dari penyakit ini.

Seringkali, untuk menentukan klamidia, dokter meresepkan tes PCR (reaksi berantai polimer) kepada pasiennya. Ini memungkinkan Anda mendeteksi mikroorganisme patogen dalam bahan biologis dengan cepat dan akurat. Rata-rata, hasil penelitian disiapkan dalam 1-2 hari. Karena kenyataan bahwa pengujian dalam beberapa kasus memberikan hasil positif palsu, dokter yang merawat akan meresepkan metode penelitian lain kepada pasien mereka setelah beberapa waktu.

Apa itu PCR?

PCR, atau reaksi berantai polimerase, adalah salah satu tes terpenting untuk mengidentifikasi klamidia dengan cepat. Akurasinya adalah 98%. Inti dari metode ini adalah selama analisis, spesialis mencari partikel klamidia - DNA-nya - dalam bahan biologis. Hal ini paling sering didiagnosis dengan kuretase. Trachomatis - DNA bakteri - berukuran kecil, tetapi pada saat yang sama berisi semua informasi genetik tentang bakteri tersebut. Ingatlah bahwa jika klamidia dalam jumlah kecil ada di dalam tubuh, analisis pasti akan menunjukkan hal ini pada hasilnya.

Karena akurasinya yang tinggi, banyak dokter menyebut PCR sebagai metode ideal untuk mendiagnosis klamidia. Untuk penelitian biasanya diambil kerokan dari selaput lendir alat kelamin atau sedikit sekretnya. Ketika terjadi infeksi, bahan-bahan ini selalu menjadi yang pertama terinfeksi. Selain itu, uji klinis klamidia juga dilakukan dengan usapan pada rektum, uretra, saluran serviks, konjungtiva mata, dan belakang tenggorokan.

Meskipun memiliki banyak keuntungan, reaksi berantai polimer juga memiliki sejumlah kelemahan. Pertama-tama, Anda perlu memperhitungkan bahwa analisis tidak dapat membedakan sel mana yang ditemukan dalam bahan biologis: hidup atau mati. Oleh karena itu, PCR tidak dapat digunakan sebagai penelitian untuk memantau efektivitas pengobatan. Untuk mendapatkan hasil yang paling akurat, Anda harus mempersiapkan penelitian. Ingatlah bahwa untuk mendapatkan hasil yang akurat, sebaiknya jangan menggunakan antibiotik selama 1 bulan dan selama pengobatan.

Hasil PCR yang positif tidak selalu menunjukkan adanya klamidia di dalam tubuh. Karena alasan inilah dokter segera meresepkan serangkaian tes diagnostik kepada pasien. Namun harus diingat bahwa indikator negatif juga tidak berarti tidak ada infeksi bakteri. Statistik menunjukkan bahwa dalam 2-5% kasus, dokter memberikan hasil yang salah. Jika diperoleh hasil seperti itu, tetapi tanda klamidia masih ada, maka dilakukan pemeriksaan tambahan.

Keunikan

Ciri utama PCR sebagai tes klamidia adalah diperbolehkan menggunakan bahan biologis apa pun untuk melakukan tes ini. Untuk melakukan ini, mereka berhasil mengambil darah, cairan seksual, sekret, noda dan kerokan.

Cara ini adalah yang paling universal dan juga nyaman. Anda tidak akan mengalami ketidaknyamanan saat mengambil materi, Anda akan segera mendapatkan hasil yang dapat diandalkan. Biasanya, klamidia dapat didiagnosis menggunakan PCR ketika fokus peradangan kecil muncul di permukaan selaput lendir. Kebenaran hasil yang diperoleh tergantung pada seberapa baik Anda mempersiapkan ujian. Anda harus mematuhi aturan berikut:

• Berhenti minum antibiotik setidaknya sebulan sebelum tes;
• Hindari hubungan seksual seminggu sebelum pengumpulan bahan biologis;
• Penting untuk melakukan pemeriksaan selama eksaserbasi penyakit;
• 3 hari sebelum penelitian, dilarang melakukan douching;
• Anda dapat mengirimkan bahan untuk diambil hanya setelah 3 jam berlalu sejak terakhir kali Anda buang air kecil;
• PCR tidak dilakukan pada saat menstruasi dan 2 hari setelahnya.

Bahaya utama klamidia terletak pada perjalanannya yang tanpa gejala dalam jangka panjang. Ada kasus di mana bakteri ditemukan beberapa tahun setelah infeksi. Karena alasan inilah PCR menjadi pemeriksaan wajib yang dilakukan seseorang untuk mengetahui adanya infeksi menular seksual. Analisis juga dilakukan pada ibu hamil, karena klamidia dapat menyebabkan bahaya yang serius pada anak.

Kemajuan reaksi

Kemajuan reaksi

Melakukan PCR melibatkan 20-20 siklus terpisah, yang masing-masing mencakup tiga tahap terpisah. Pada awalnya, cetakan DNA untai ganda dipanaskan hingga 96 derajat selama beberapa menit sehingga rantai akhirnya terpisah. Fenomena ini disebut denaturasi - rusaknya ikatan hidrogen. Campuran yang menjadi tempat pencelupan DNA dipanaskan terlebih dahulu agar denaturasi terjadi semaksimal mungkin.

Ketika rantai menyimpang, suhu pemaparan berkurang. Hal ini memungkinkan primer khusus untuk berikatan dengan templat beruntai tunggal. Tahap ini biasa disebut annealing. Suhu pengoperasian pada tahap ini tergantung pada jenis primer; biasanya diatur 4-5 derajat lebih rendah dari suhu leleh. Sel DNA menghabiskan 1-2 menit pada tahap ini.

Selama PCR, untai templat direplikasi karena paparan primer. Tahap ini biasa disebut elongasi. Suhu pengoperasian pada tahap ini sepenuhnya bergantung pada polimerase. Dalam kebanyakan kasus, obat ini menunjukkan aktivitas tinggi pada suhu 72 derajat. Durasi prosedur bergantung pada jenis DNA polimerase dan panjang fragmen yang diamplifikasi. Dalam kebanyakan kasus, beberapa ribu pasangan basa ditempatkan per menit. Ketika semua siklus selesai, dokter melakukan pemanjangan tambahan atau akhir. Ini memungkinkan Anda untuk menyelesaikan semua fragmen beruntai tunggal. Durasi tahap ini bisa sekitar 10 menit.

Materi klinis untuk PCR

Materi klinis untuk PCR

Untuk melakukan analisis PCR, dokter perlu mengambil sedikit bahan biologis. Ini bisa berupa darah, sampel jaringan, dan beberapa cairan biologis. Spesialis akan memilih bahan mana yang terbaik untuk digunakan secara khusus dalam kasus Anda. Paling sering, pria diambil apusan dari uretra, jus prostat, ejakulasi, dan cairan sinovial.

Ingatlah bahwa PCR untuk klamidia juga dapat dilakukan pada anak-anak. Pemeriksaan seperti ini dapat diterima bahkan untuk anak kecil dan bayi baru lahir. Mereka dapat dengan mudah tertular infeksi ini saat melewati jalan lahir. Ingatlah bahwa dilarang melakukan tes PCR saat menstruasi. Ini adalah tes kualitatif yang menunjukkan apakah terdapat bakteri pada apusan atau tidak. Biasanya mereka tidak seharusnya berada di sana.

Saat dokter mengirim pasiennya untuk tes PCR, hal itu selalu menimbulkan kekhawatiran. Namun bagi ibu hamil, pemeriksaan seperti itu selalu menjadi gangguan yang serius. Perlu diperhatikan bahwa selama kehamilan, setiap wanita sangat peka terhadap status kesehatannya. Infeksi seksual yang menembus rongga panggul dapat sangat mengganggu kesehatan ibu hamil. Selain itu, karena mereka, penyimpangan serius dalam pembentukan organ dalam janin, serta keguguran, dapat dengan mudah terjadi.

Semakin cepat Anda didiagnosis menderita klamidia dan diberikan pengobatan yang efektif, semakin tinggi peluang untuk mempertahankan perkembangan normal pada janin.

Analisis PCR merupakan bagian integral dari pemeriksaan setiap wanita hamil. Hal ini dilakukan meskipun wanita tersebut sudah lama tidak berganti pasangan seksual. Ingatlah bahwa klamidia dapat hidup lama di dalam tubuh dan tidak menunjukkan gejala apa pun. Namun, ketika menerima hasil tes, banyak orang mencatat bahwa mereka pernah mengalami ketidaknyamanan tertentu. Wanita dapat dengan mudah mengidentifikasi patologi dengan sariawan yang sering berulang atau rasa tidak nyaman yang terus-menerus pada vagina.